技术特征：
1.一种用于制备外泌体液体活检样本的装置，其包含固态固定元件，第一捕获材料，和第一可逆接头，所述第一捕获材料与与包含从细胞释放的外泌体的大群体样本的预定疾病相关的第一目标外泌体的第一分离标志物特异性结合以捕获所述第一目标外泌体，所述第一捕获材料通过所述第一可逆接头可分离地结合所述固定元件。2.根据权利要求1所述的装置，其还包含第二捕获材料，所述第二捕获材料与所述第一捕获材料未结合的所述固定元件结合，并且与作为所述第一目标外泌体群体的外泌体亚群中的第二目标外泌体的第二分离标志物特异性结合，以捕获泌第二目标外泌体。3.根据权利要求2所述的装置，其还包含第二可逆接头，所述第二捕获材料通过所述第二可逆接头可分离地结合所述固定元件。4.根据权利要求3所述的装置，其中所述第一可逆接头和/或所述第二可逆接头各自包含配体、与所述配体可分离地结合并且当与所述配体结合时其构象改变的结合剂，以及与所述构象改变的结合剂特异性结合并且当所述配体与所述结合剂分离时与结合剂分离的识别材料，并且其中所述结合剂和所述识别材料中的一个固定在所述固定元件的表面上，所述结合剂和所述识别材料中的另一个与所述捕获材料缀合以形成缀合物。5.根据权利要求4所述的装置，其中所述配体选自糖分子、离子、底物、抗原、肽、维生素、生长因子、激素及其组合。6.根据权利要求4所述的装置，其中所述结合剂选自糖结合蛋白、离子结合蛋白、酶、抗体、抗生物素蛋白、适体、细胞受体、纳米结构及其组合。7.根据权利要求4所述的装置，其中所述识别材料选自抗体、蛋白质受体、细胞受体、适体、酶、纳米颗粒、纳米结构、重金属螯合剂及其组合。8.根据权利要求3所述的装置，其中所述第一可逆接头和/或所述第二可逆接头各自包含：与所述捕获材料和所述固定元件中的一个缀合以形成缀合物的配体；以及固定在所述捕获材料和所述固定元件中的另一个上、与所述配体结合并且通过与竞争性配体竞争而与所述配体分离的结合剂。9.根据权利要求8所述的装置，其中所述结合剂选自二价金属离子、抗生物素蛋白、糖结合蛋白、离子结合蛋白、酶、抗体、适体、蛋白质受体、细胞受体、纳米结构及其组合；所述配体选自多组氨酸标签(his-标签)、维生素、糖分子、离子、底物、抗原、氨基酸、肽、核酸、生长因子、激素及其组合；和所述竞争性配体选自咪唑、维生素、糖分子、离子、底物、抗原、氨基酸、肽、核酸、生长因子、激素及其组合。10.根据权利要求1所述的装置，其中所述固定元件选自水凝胶、磁珠、乳胶珠、玻璃珠、纳米金属结构、多孔膜、无孔膜及其组合。11.根据权利要求1所述的装置，其还包含其中容纳所述固定元件的反应器。12.根据权利要求1所述的装置，其中所述固定元件使用磁力、重力和/或离心力集中。13.一种用于制备外泌体液体活检样本的方法，其包括(a)允许与与预定疾病相关的第一目标外泌体的第一分离标志物特异性结合的第一捕获材料通过第一可逆接头与固态固定元件结合，(b)允许包含从细胞释放的外泌体的大群体样本与与所述固定元件结合的所述第一捕获材料反应，使得所述第一捕获材料捕获所述第一目标外泌体以分离包含所述第一目标外泌体的亚群，和(c)解离所述第一可逆接头，使得捕获的第一目标外泌体与所述固定元件分离以回收所述外泌体亚群。
14.根据权利要求13所述的方法，其还包括(d)允许与所述外泌体亚群中的第二目标外泌体的第二分离标志物特异性结合的第二捕获材料与所述固定元件结合，并且(e)允许包含回收的外泌体亚群的外泌体亚群样本与与所述固定元件结合的所述第二捕获材料反应，使得所述第二捕获材料捕获所述第二目标外泌体以分离所述第二目标外泌体的亚亚群。15.根据权利要求14所述的方法，其中在步骤(d)中，所述第二捕获材料通过第二可逆接头与所述固定元件结合，并且所述方法还包括(f)解离所述第二可逆接头，使得捕获的第二目标外泌体与所述固定元件分离以回收所述外泌体亚亚群。16.根据权利要求14所述的方法，其还包含在步骤(b)和(c)之间使用磁力、重力和/或离心力集中所述固定元件，通过所述固定元件捕获所述第一目标外泌体。17.根据权利要求14所述的方法，其还包含(g)使用磁力、重力和/或离心力集中所述固定元件，通过所述固定元件捕获所述第二目标外泌体。18.一种用于分析外泌体液体活检样本的方法，其包括(a)从包含从正常组和患者组中的细胞释放的外泌体大群体样本制备包含与预定疾病相关的目标外泌体的外泌体液体活检样本，(b)测量来自所述外泌体液体活检样本中存在的目标外泌体的多个生物标志物的定量信号，以及(c)基于测量的定量信号值，根据多个生物标志物之间的相关性分析来自正常组和患者组的外泌体液体活检样本。19.根据权利要求18所述的方法，其中在步骤(c)中，根据来自一种生物标志物的定量信号与来自另一种生物标志物的定量信号之间的相关性分析各个外泌体液体活检样本。20.根据权利要求18所述的方法，其中步骤(c)包括将多个参数设置为作为参考信号的来自多个生物标志物之一的定量信号与来自其他生物标志物的定量信号之间的比率，并且根据两个不同参数之间的相关性分析所述外泌体液体活检样本。21.根据权利要求20所述的方法，其中参数设置包括：根据信号值，在多个xy坐标系中建立外泌体液体活检样本的坐标，其x轴显示来自多个生物标志物之一的定量信号，y轴显示来自另一个生物标志物的定量信号；计算来自正常组和患者组的外泌体液体活检样本的斜率；并且使用构成xy坐标系的生物标志物设置参数，其中来自所述正常组的外泌体液体活检样本的斜率与来自所述患者组的外泌体液体活检样本的斜率之间的差异相对大。22.根据权利要求20所述的方法，其中所述外泌体液体活检样本的分析包括：在第一xy坐标系中，其x轴显示多个参数中的一个作为第一参数并且y轴显示另一个参数作为第二参数，用信号值代替第一参数和第二参数以计算参数值，并且根据计算出的参数值建立所述外泌体液体活检样本的坐标；在所述第一xy坐标系中，设置其中来自所述正常组的外泌体液体活检样本的分布的阴性区域和阳性区域；并且根据除所述第一参数和第二参数中的至少一个之外的两个参数之间的相关性进一步分析阴性区域或阳性区域中的坐标中的液体活检样本。23.根据权利要求18所述的方法，其中所述生物标志物包括排列在所述外泌体表面上的预定疾病相关生物标志物和/或从所述外泌体洗脱的预定疾病相关生物标志物。
技术总结
本发明涉及一种技术，其中将与特定疾病相关的人类流体中的目标外泌体亚群、亚亚群或更低的群体高产率地分离并以其完整形式回收以制备液体活检样本并进行分析。制备液体活检样本并进行分析。制备液体活检样本并进行分析。
技术研发人员：白盛皓 崔多延
受保护的技术使用者：索尔生物公司
技术研发日：2020.11.23
技术公布日：2022/1/14