培养皿及其在制备细胞薄膜中的用途的制作方法

文档序号:30951465发布日期:2022-07-30 07:47阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种培养皿,其特征在于,包括:本体,所述本体内限定出培养空间;和涂层,所述涂层设置在所述培养空间的底部,其中,所述涂层的表面自由能不超过90mj/m2。2.根据权利要求1所述的培养皿,其特征在于,所述涂层的厚度不超过300nm。3.根据权利要求1所述的培养皿,其特征在于,所述涂层的厚度不低于2nm,但不超过100nm,优选不超过50nm,更优选不超过30nm,最优选不超过10nm。4.根据权利要求1所述的培养皿,其特征在于,所述涂层的表面自由能不超过60mj/m2。5.根据权利要求1所述的培养皿,其特征在于,所述涂层含有由下列单体中的至少一种形成的高聚物或者嵌段共聚物:乙烯基咪唑、乙烯基吡咯烷酮、氨基苯乙烯、甲基丙烯酰胺、二甲基丙烯酰胺、n-异丙基丙烯酰胺、4-乙烯基苄氯、氰甲基苯乙烯、1-甲基氯化吡啶、乙烯己内酰胺、丙烯酸、n,n-二甲基氨基乙酯、丙烯酸氯乙酯、丙烯酸氰乙酯、3-(二甲氨基)丙烯酸丙酯、丙烯、苯乙烯、氯乙烯、2-乙烯吡啶、丙烯腈、己内酯、n,n-二甲基乙烯基苯甲胺、4-乙烯吡啶、二乙烯基苯、苯甲酸乙烯酯、甲基丙烯酸苯甲酯、环己基甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸丁酯、甲基丙烯酸异丙酯、丙烯酰胺、甲基丙烯酸烯丙酯、甲基丙烯酸异氰基乙酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯、乙二醇甲酯甲基丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸羟乙酯、1,2,4-三乙基环己烷、糠醇甲酯、甲基丙烯酸四氢糠基酯、甲基丙烯酸己酯、甲基丙烯酸羟乙酯、甲基丙烯酸缩水甘油酯、甲基丙烯酸丙炔基酯、1,4-丁二醇乙烯醚、丙烯酸异冰片酯、乙二醇二丙烯酸酯、丙烯酸丙炔酯、2,4,6,8-四甲基-2,4,6,8-四乙烯基环四硅氧烷、六乙烯基二硅氧烷、2,4,6-三乙烯基-2,4,6-三甲基环三硅氧烷、三乙烯基三甲基环三硅氮烷、二甲基苯基乙烯基硅烷、(全氟辛基)乙基甲基丙烯酸酯、全氟癸基丙烯酸酯、七氟丁基甲基丙烯酸酯、1,1,1,3,3,3-六氟异丙基异丁烯酸酯、2,2,3,3,4,4-六氟-1,5-五基硅丙烯酸酯、2-(全氟己基)乙基甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸三氟乙酯、五氟苯基甲基丙烯酸酯、1h,1h,7h-十二氟庚基丙烯酸酯、1h,1h,2h,2h-全氟癸基丙烯酸酯、二乙二醇二乙烯基醚、1,9-癸二烯、2-甲基丙烯酸酐、1,2,4-三乙烯基环己烷、乙酰乙酸烯丙酯、马来酸酐、4-乙烯基苯胺、9-乙烯基咔唑、丙烯酸二甲胺基乙酯、丙烯酸n,n-二乙基氨基乙酯、2-(二甲氨基)丙烯酸乙酯、3-(二甲氨基)丙烯酸丙酯、2-(二甲氨基)甲基丙烯酸乙酯、2-(叔丁基氨基)甲基丙烯酸乙酯、n,n-二甲基乙烯基苯甲胺、甲基丙烯酸、丙烯酰胺、乙烯基-n-甲基氯化吡啶、n,n-二甲基乙烯基苯甲胺。6.根据权利要求5所述的培养皿,其特征在于,所述涂层是由聚(2-乙烯吡啶-co-苯乙烯)嵌段共聚物形成的。7.根据权利要求5所述的培养皿,其特征在于,所述涂层是通过溶液蒸发法、喷涂法、真空蒸发镀膜法、化学气象沉积法、脉冲激光沉积法和溶胶凝胶法的至少之一形成的。8.根据权利要求5所述的培养皿,其特征在于,所述涂层是通过对2-乙烯吡啶和苯乙烯进行固相沉积而形成的。9.根据权利要求1所述的培养皿,其特征在于,进一步包括:底板,所述底板可拆卸地设置在所述培养空间的底部,其中,所述涂层设置在所述底板的表面上。10.权利要求1~9任一项所述的培养皿在制备细胞薄膜中的用途。
11.一种调整细胞与培养皿结合力的方法,所述培养皿为权利要求1~8任一项所述的培养皿,所述方法包括:改变细胞培养液中的钙离子和/或镁离子浓度。12.一种制备细胞薄膜的方法,其特征在于,包括:利用液体培养基在权利要求1~8任一项所述的培养皿中,对细胞进行培养,以便形成单层细胞薄膜;使所述单层细胞薄膜处于剥离液中,所述剥离液中阳离子浓度低于所述液态培养基,所述阳离子包括钙离子和/或镁离子的至少之一;和从所述剥离液中,收集所述单层细胞薄膜。13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,所述细胞包括选自干细胞、神经元细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞、上皮细胞、内皮细胞、肌细胞、成纤维细胞的至少之一;可选的,所述干细胞包括诱导多能干细胞、成体干细胞、间充质干细胞、神经干细胞、心肌干细胞和肺干细胞的至少之一;可选的,所述间充质干细胞包括骨髓来源的间充质干细胞、脂肪来源的间充质干细胞、脐带来源的间充质干细胞的至少之一;可选的,所述上皮细胞包括角膜上皮细胞、前列腺上皮细胞、肾小管上皮细胞、冠状动的至少之一;可选的,所述内皮细胞包括脉内皮细胞、肺动脉内皮细胞、主动脉内皮细胞的至少之一;可选的,所述肌细胞包括主动脉平滑肌细胞、肺动脉平滑肌细胞、冠状动脉平滑肌细胞的至少之一;可选的,所述成纤维细胞包括心肌成纤维细胞、皮肤成纤维细胞、肾间质成纤维细胞的至少之一,优选间充质干细胞。14.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,所述剥离液为不含钙离子和镁离子的缓冲液。15.根据权利要求14所述的方法,其特征在于,所述缓冲液的ph为6.9~7.4,优选的,所述缓冲液为dpbs。16.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,采用pvdf膜进行收集所述单层细胞薄膜。17.根据权利要求16所述的方法,其特征在于,所述pvdf膜携带亲水改性基团,优选的,所述pvdf膜为星形-聚丙烯酸二甲氨基乙酯聚合物亲水改性的pvdf膜。18.根据权利要求16或17所述的方法,其特征在于,所述pvdf膜包括空心区域。19.根据权利要求18所述的方法,其特征在于,所述pvdf膜呈圆环状。20.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,进一步包括:将多个所述单层细胞薄膜进行叠加,以便获得复合细胞薄膜。21.根据权利要求20所述的方法,其特征在于,所述复合细胞薄膜包括2~3层细胞薄膜。22.一种复合细胞薄膜,其特征在于,包括:层叠的多个单层细胞薄膜,其中,所述单层细胞薄膜的细胞经过无钙镁缓冲液处理。23.根据权利要求22所述的复合细胞薄膜,其特征在于,所述复合细胞薄膜包括2~3层
细胞薄膜。24.根据权利要求22所述的复合细胞薄膜,其特征在于,所述单层细胞薄膜是由权利要求12~21任一项所述的方法形成的。25.权利要求22~24任一项所述的复合细胞薄膜在制备药物中的用途,所述药物用于治疗选自下列的至少之一:眼部损伤修复与再生、皮肤和软组织坏死、创伤组织的修复、皮肤烧伤、冻伤、肾脏移植、肝脏移植,心脏移植、肺移植、软组织移植、创面修复、美容外科、腹外疝修补、肝损伤、脾破裂、胃损伤、十二指肠损伤、小肠及系膜损伤、胃溃疡、十二指肠溃疡、糖尿病足、中枢神经系统损伤修复与再生、颅脑损伤、脊髓损伤、心肌炎、心肌梗死、心房间隔缺损、心室间隔缺损、骨折愈合、关节损伤,或人工骨的研制。26.一种药物组合物,其特征在于,包括:权利要求22~24任一项所述的复合细胞薄膜;和药学上可以接受的辅料。

技术总结
本发明公开了培养皿及其在制备细胞薄膜中的用途。其中,培养皿包括:本体,所述本体内限定出培养空间;和涂层,所述涂层设置在所述培养空间的底部,其中,所述涂层的表面自由能不超过90mJ/m2。由此,通过调整细胞液体培养基中的离子浓度,可以使涂层与细胞之间的结合力降低,从而使贴壁培养的细胞能够从培养皿底部的涂层上以细胞薄膜的形式脱落,有效地获得细胞薄膜。胞薄膜。胞薄膜。


技术研发人员:孙佳 郭啸华 唐漫书 廖鑫 胡隽源
受保护的技术使用者:深圳市碳源生物科技有限公司
技术研发日:2021.01.29
技术公布日:2022/7/29
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