一种具有启动、终止双功能调控元件的构建方法、双功能元件库和应用

文档序号:25588452发布日期:2021-06-22 17:04阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种具有启动、终止双功能调控元件的构建方法,其特征在于,将启动序列和终止序列按照先终止后启动的原则进行组装;

所述启动序列包括上游活性序列和核心启动子序列,所述上游活性序列包括mig1/mig2结合位点、rap1结合位点、gcr1结合位点、weakmig1结合位点、gc框、caat框和八聚体框;所述核心启动子序列包括tata框、bre元件、mte元件和inr元件;

所述终止序列包括效率元件、位置元件和polya。

2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述mig1/mig2结合位点的核苷酸序列如seqidno.1所示;

所述rap1结合位点的核苷酸序列如seqidno.2所示;

所述gcr1结合位点的核苷酸序列如seqidno.3所示;

所述weakmig1结合位点的核苷酸序列如seqidno.4所示;

所述gc框的核苷酸序列为gggcgg;

所述caat框的核苷酸序列为ccaatct;

所述八聚体框的核苷酸序列为atgcaaat。

3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述tata框的核苷酸序列为tatataaa;

所述bre元件的核苷酸序列为ggacgcc;

所述mte元件的核苷酸序列如seqidno.5所示;

所述inr元件的核苷酸序列为ttaatat。

4.根据权利要求1所述的核苷酸序列,其特征在于,所述效率元件的核苷酸序列为tatatata,所述位置元件的核苷酸序列为aataaa。

5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,将所述核心启动子序列连接在上游活性序列前。

6.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,将所述终止序列连接在核心启动子序列前。

7.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,将所述终止序列插入在核心启动子序列和上游活性序列之间。

8.一种基于权利要求1所述的构建方法构建得到的具有启动、终止双功能调控元件,其特征在于,所述具有启动、终止双功能调控元件的核苷酸序列如seqidno.6所示。

9.一种基于权利要求1~7任一项所述的构建方法得到的双功能元件库,其特征在于,将启动序列和终止序列按照先终止后启动的原则进行组装,调节所述启动序列和终止序列中各种序列的排列顺序和间隔区,得到双功能元件库。

10.权利要求8所述的具有启动、终止双功能调控元件或权利要求9所述的双功能元件库在番茄红素途径构建中的应用。


技术总结
本发明提供了一种具有启动、终止双功能调控元件的构建方法、双功能元件库和应用,涉及合成生物学技术领域。所述构建方法包括:将启动序列和终止序列按照先终止后启动的原则进行组装;所述启动序列包括上游活性序列和核心启动子序列,所述上游活性序列包括Mig1/Mig2结合位点、Rap1结合位点、Gcr1结合位点、weakMig1结合位点、GC框、CAAT框和八聚体框;所述核心启动子序列包括TATA框、BRE元件、MTE元件和Inr元件;所述终止序列包括效率元件、位置元件和polyA。采用本发明提供的具有启动、终止双功能调控元件应用到途径构建中,简化了构建过程,途径组装效率相比于现有技术提高了约18%。

技术研发人员:张根林;刘政洋;倪晓霞;张燕
受保护的技术使用者:石河子大学
技术研发日:2021.02.25
技术公布日:2021.06.22
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