一种与黄瓜果皮颜色基因连锁的分子标记及应用的制作方法

文档序号:25812781发布日期:2021-07-09 13:42阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种与黄瓜果皮颜色基因连锁的分子标记,其特征在于:所述的分子标记为黄瓜基因组3号染色体上39541731bp位置处发生的t向g的变异。2.根据权利要求1所述的分子标记,其特征在于:所述的分子标记对应的基因型:t:t为具有果皮颜色的深绿基因型、t:g为具有果皮颜色的绿基因型、g:g为具果皮颜色的浅绿基因型。3.根据权利要求2所述的分子标记,其特征在于:针对黄瓜果皮颜色基因设计的引物如下:引物名称引物序列5
’‑3’
cu

39541731fgaaggtgaccaagttcatgctccatgatttatcataactttattaggattagtcu

39541731rgaaggtcggagtcaacggattccatgatttatcataactttattaggattaggcu

39541731cagcaacaaaatcgattaggaaactt。4.根据权利要求3所述的分子标记,其特征在于:cu_39541731f、cu_39541731r两条引物5’端分别连接不同的荧光接头序列;所述的荧光接头序列为fam或hex接头序列:fam信号:gaaggtgaccaagttcatgct;hex信号:gaaggtcggagtcaacggatt。5.权利要求1

4任一项所述的分子标记的应用,其特征在于:用于鉴定和辅助筛选深绿果皮黄瓜。6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:用于果皮深绿颜色黄瓜材料育种。7.根据权利要求5所述的应用,其特征在于:采用pcr反应进行检测。8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于:具体包括以下步骤:(1)以待测样品基因组dna为模板,利用分子标记的扩增引物进行扩增,获得扩增产物;(2)对扩增产物进行检测与分析。9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:对扩增产物进行检测时,若是t:t基因型,则判定为果皮深绿颜色的种质;若是纯合g:g基因型,则判定为果皮浅颜色的种质;若是杂合t:g基因型,则判定为果皮绿颜色的种质。10.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:采用touchdown pcr;touchdown pcr 扩增程序为:94℃15min;95℃20s;65℃

56℃60s,10个循环,每个循环退火延伸温度降0.8℃;94℃20s;57℃60s,26个循环。
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