技术特征：
1.多核苷酸，其包含如seq id no:2所示的cmv增强子、如seq id no:3所示的cba启动子、如seq id no:4所示的嵌合内含子(chimeric intron)、如seq id no:6所示的kozak序列、阿柏西普编码序列、如seq id no:12所示的wpre序列，和如seq id no:13所示的bgh polya序列；其中优选地，所述阿柏西普编码序列如seq id nos:7
‑
9,18
‑
19所示。2.权利要求1所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸还包含其他治疗性多肽(如axt
‑
107、内皮抑素(eds183)或色素内皮衍生因子(pedf34))编码序列；其中优选地，所述axt
‑
107包含seq id no:36所示序列；其中优选地，所述eds183包含seq id no:37所示序列；其中优选地，所述pedf34包含seq id no:38所示序列。3.权利要求2所述的多核苷酸，其中所述阿柏西普编码序列与所述其他治疗性多肽编码序列之间以可切割肽(如p2a或t2a)编码序列和信号肽编码序列相连；其中，优选地，所述p2a编码序列包含选自seq id no:46,49
‑
50所示序列；其中，优选地，所述t2a编码序列分别包含seq id no:47所示序列；其中，优选地，所述信号肽编码序列如seq id nos:31
‑
35,48所示，更优选地，所述信号肽编码序列如seq id nos:31,35,48所示。4.重组病毒载体，其包含如权利要求1
‑
3中任一项所述的多核苷酸；其中优选地，所述病毒载体是腺相关病毒(aav)载体；其中更优选地，所述aav载体选自以下任一血清型：aav1、aav2、aav3、aav4、aav5、aav6、aav7、aav8、aav9、aav10，或aav11；其中最优选地，所述aav是aav8。5.重组病毒载体，其包含以下元件：(a)如seq id no:1所示的第一反向末端重复(itr)序列，(b)如seq id no:2所示的cmv增强子，(c)如seq id no:3所示的cba启动子，(d)如seq id no:4所示的嵌合内含子(chimeric intron)，(e)如seq id no:6所示的kozak序列，(f)阿柏西普编码序列(优选地，所述阿柏西普编码序列如seq id nos:7
‑
9,18
‑
19所示)，(g)如seq id no:12所示的wpre序列，(h)如seq id no:13所示的bgh polya序列，和(i)如seq id no:15所示的第二itr序列。6.重组病毒载体，其序列为以下任一：seq id no:17、seq id no:40、seq id no:41、seq id no:43或seq id no:44。7.宿主细胞，其包含权利要求1
‑
3中任一项的多核苷酸、权利要求4
‑
6中任一项的重组病毒载体。8.组合物，其包含权利要求1
‑
3中任一项的多核苷酸、权利要求4
‑
6中任一项的载体。9.向分离的哺乳动物细胞中递送编码阿柏西普的多核苷酸的方法，其包括向所述哺乳动物细胞施用权利要求1
‑
3中任一项的多核苷酸、权利要求4
‑
6中任一项的重组病毒载体，
或权利要求8的组合物，从而将所述编码阿柏西普的多核苷酸递送至所述哺乳动物细胞。10.权利要求1
‑
3中任一项的多核苷酸、权利要求4
‑
6中任一项的所述的重组病毒载体，或权利要求8的组合物在制备治疗哺乳动物(如人)眼部疾病的药物中的用途，其中优选地，所述眼部疾病为新生血管(湿性)年龄相关性黄斑变性(wet
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amd)、视网膜静脉阻塞后黄斑水肿、糖尿病性黄斑水肿(dme)或与dme相关的糖尿病性视网膜病变；更优选地，所述疾病为wet
‑
amd。
技术总结
本发明涉及基因治疗领域。具体来说，本发明涉及编码阿柏西普(Aflibercept)的多核苷酸、包含所述多核苷酸的病毒载体、宿主细胞或组合物、将本发明多核苷酸递送至哺乳动物或哺乳动物细胞的方法，以及应用前述核酸、病毒载体、组合物制备治疗哺乳动物(如人)眼部疾病的药物中的用途。药物中的用途。药物中的用途。
技术研发人员：张敬新 何婷
受保护的技术使用者：南京吉迈生物技术有限公司
技术研发日：2021.08.20
技术公布日：2021/12/21