技术特征：
1.一种anti-ngf药物细胞增殖抑制活性检定方法，其特征在于，包含如下步骤：s1：试剂配制，还包括以下子步骤：a:完全培养基，取一瓶rpmi 1640培养基500ml，加入55ml fbs，混匀标记后置于2-8℃冰箱中保存备用；b:gm-csf溶液准备,用完全培养基将gm-csf稀释至20ng/ml，得10x溶液待用；c：ngf溶液准备，用完全培养基将ngf稀释至5μg/ml，待用；s2：实验操作；s3：结果报告，根据数据拟合结果，报告供试品对参比品的细胞增殖抑制活性百分比，结果保留整数，根据质量标准判断供试品是否合格。2.根据权利要求1所述的一种anti-ngf药物细胞增殖抑制活性检定方法，其特征在于，所述s2实验操作，具体包括以下子步骤：d、检测用细胞准备，将tf-1细胞从培养箱中取出，用电动移液器将轻微吹打混匀，取适量细胞进行离心；离心后的细胞小心弃去上清，用pbs重悬洗涤3次，并用完全培养基重悬计数，调整细胞密度为1.5
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104cells/well/60μl至96孔板；e、anti-ngf药物稀释；f、抗体加入；g、ngf稀释及加入；h、cck8加入及孵育；i、数据采集，打开酶标仪待仪器自检结束后，设定测定波长为450nm，将细胞培养板放入酶标仪中进行读数。3.根据权利要求2所述的一种anti-ngf药物细胞增殖抑制活性检定方法，其特征在于，所述s2步骤的e子步骤的具体操作如下：用多道移液器将完全培养基加入96孔样品稀释板对应孔中，anti-ngf药物初始浓度5μg/ml加入1号ep管90μl得450ng/ml，混匀后从1号ep管开始依次每管取500μl梯度稀释至9号ep管,10号ep管不作稀释梯度，作为空白对照。4.根据权利要求3所述的一种anti-ngf药物细胞增殖抑制活性检定方法，其特征在于，所述s2步骤的f子步骤的具体操作如下：用12道移液器将样品稀释板中的样品加入细胞培养板中，终起始浓度90ng/ml，每个样品做6个复孔，每孔20μl，37℃，5％co2培养箱中孵育30min后可加ngf。5.根据权利要求4所述的一种anti-ngf药物细胞增殖抑制活性检定方法，其特征在于，所述s2步骤的g子步骤的具体操作如下：原始浓度5μg/ml，稀释至25ng/ml(5x稀释液)，每孔20μl加至已加入抗体的96孔板中，终起始浓度5ng/ml，37℃，5％co2培养箱中孵育72h。6.根据权利要求5所述的一种anti-ngf药物细胞增殖抑制活性检定方法，其特征在于，所述s2步骤的h子步骤的具体操作如下：h1、从2-8℃冰箱取出cck8溶液，室温放置，与pbs按体积比1:1混合适量，将其温度恢复至室温；h2、用多道移液器将cck8加入细胞培养板中，每孔20μl，振荡混匀，将细胞培养板置于37℃、5％co2培养箱中，孵育4h。
技术总结
本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种Anti-NGF药物细胞增殖抑制活性检定方法，包含如下步骤：S1：试剂配制；S2：实验操作；S3：结果报告，根据数据拟合结果，报告供试品对参比品的细胞增殖抑制活性百分比，结果保留整数，根据质量标准判断供试品是否合格；本发明通过确立Anti-NGF药物细胞增殖抑制活性检验标准操作规程，规范Anti-NGF药物细胞增殖抑制活性检验的操作步骤，保证Anti-NGF药物细胞增殖抑制活性检验的准确性。制活性检验的准确性。
技术研发人员：袁琳 王凯欣 丁华平 林以均 王春河
受保护的技术使用者：上海迈石生物技术有限公司
技术研发日：2021.08.28
技术公布日：2023/3/2