一组检测非洲猪瘟病毒的引物、探针、免提取试剂盒及应用的制作方法

文档序号:29615452发布日期:2022-04-13 11:22阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一组检测非洲猪瘟病毒的引物、探针,其特征在于,根据非洲猪瘟病毒p72基因的保守序列区域设计,探针5’端标记荧光基团,探针3’端标记淬灭基团,所述的引物序列分别为seq id no.1、seq id no.2所示的核苷酸序列,所述的探针为seq id no.3所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的检测非洲猪瘟病毒的引物、探针,其特征在于,所述的引物及探针序列分别为seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3所述核苷酸序列中的至少一个核苷酸经过缺失和/或替代和/或移位所构成的核苷酸序列。3.根据权利要求1所述的检测非洲猪瘟病毒的引物、探针,其特征在于,所述荧光基团选自fam、joe、vic、hex、rox、cy3、cy5任意一种。4.根据权利要求3所述的检测非洲猪瘟病毒的引物、探针,其特征在于,所述荧光基团为fam。5.根据权利要求1所述的检测非洲猪瘟病毒的引物、探针,其特征在于,所述淬灭荧光基团为tamra。6.一种采用权利要求1-5中任一项所述的引物、探针在制备检测或诊断非洲猪瘟病毒的试剂中的用途。7.一种检测非洲猪瘟病毒的荧光定量pcr试剂盒,其特征在于,采用含有权利要求1-5中任一项所述的引物、探针。8.权利要求7所述的检测非洲猪瘟病毒的荧光定量pcr试剂盒,其特征在于,还包括样品裂解液、荧光pcr反应缓冲液、阳性标准品、阴性对照以及无rna酶水。9.如权利要求8所述的检测非洲猪瘟病毒的荧光定量pcr试剂盒,其特征在于,所述阳性标准品为含有p72基因部分序列的质粒,其中非洲猪瘟病毒p72基因的核苷酸序列如seq id no.4所示。

技术总结
本发明提供一组用于非洲猪瘟病毒检测的引物、探针、免提取试剂盒及其应用,属于分子生物学诊断技术研发领域。本发明所述的引物、探针位于非洲猪瘟病毒p72基因的保守序列区域内,本发明采用所述的引物、探针,建立了一种检测非洲猪瘟病毒的荧光定量PCR方法,该方法具有简单快速、特异性强、灵敏度高等特点。同时,本发明采用所述的引物、探针及建立的方法,组建了免提取核酸的非洲猪瘟病毒检测试剂盒,适用于临床上非洲猪瘟病毒的检测。本发明为非洲猪瘟的快速、准确的检测及其防控提供了有效的技术手段。技术手段。技术手段。


技术研发人员:刘存 刘砚涵 田野 李云岗 兰邹然 柴士明 孙圣福 张月 汪洋
受保护的技术使用者:山东省动物疫病预防与控制中心
技术研发日:2021.12.01
技术公布日:2022/4/12
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