技术特征：
1.一种纯化tpo的工艺，包括，(1)筛选纯化tpo抗体；(2)将步骤(1)中纯化后的tpo抗体与填料按一定条件混合，制成亲和层析柱；(3)将需要纯化的样本加入步骤(2)制备的亲和层析柱中，利用洗脱液对亲和层析柱进行洗脱，纯化tpo蛋白；所述步骤(3)中的洗脱液，包含1-5m的金属离子盐，ph＝6.5-8.0。2.如权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述金属离子盐的浓度为2-4m，ph＝6.8-7.3。3.如权利要求2所述的工艺，其特征在于，所述金属离子盐选自nacl、licl或mgcl2，更优选的，所述金属离子盐选自mgcl2，所述tpo抗体与填料按一定条件混合为tpo抗体：填料＝10：1。4.一种生产高纯度tpo的方法，包括，(1)重组tpo基因转入细菌细胞制备质粒；(2)步骤(1)中制备的质粒转染到sf9细胞中，制作tpo病毒；(3)将tpo病毒导入sf9细胞中进行表达，得tpo蛋白；(4)筛选纯化tpo抗体；(5)将纯化后的tpo抗体与填料按一定条件混合，制成亲和层析柱；(6)在步骤(5)中制备的亲和层析柱中加入步骤(3)中的tpo蛋白，利用洗脱液对亲和层析柱进行洗脱，纯化tpo蛋白；所述重组tpo基因含有标签或不含标签，所述步骤(6)中的洗脱液，包含1-5m的金属离子盐，ph＝6.5-8.0。5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述重组基因tpo不含标签。6.如权利要求4或5所述的方法，其特征在于，所述金属离子盐的浓度为2-4m，ph＝6.8-7.3。7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述金属离子盐选自nacl、licl或mgcl2；更优选的，所述金属离子盐选自mgcl2，所述tpo抗体与填料按一定条件混合为tpo抗体：填料＝10：1混合。8.一种生产高纯度tpo的方法，包括，(1)重组tpo基因转入细菌细胞制备质粒；(2)步骤(1)中制备的质粒转染到sf9细胞中，制作tpo病毒；(3)将tpo病毒导入h.five细胞中进行表达，得tpo蛋白；(4)筛选纯化tpo抗体；(5)将纯化后的tpo抗体与填料按一定条件混合，制成亲和层析柱；(6)在步骤(5)中制备的亲和层析柱中加入步骤(3)中的tpo蛋白，利用洗脱液对亲和层析柱进行洗脱，纯化tpo蛋白；所述步骤(6)中的洗脱液，包含1-5m的金属离子盐，ph＝6.5-8.0。9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述重组tpo基因不含有任何标签。10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中的洗脱液所述金属离子盐的浓度为2-4m，ph＝6.8-7.3；更优选的，所述金属离子盐选自nacl、licl或mgcl2，所述tpo抗
体与填料按一定条件混合为tpo抗体：填料＝10：1。
技术总结
本发明涉及生物技术领域，公开了一种纯化TPO的工艺及方法，利用本发明公开的工艺及方法，纯化TPO蛋白不需要添加标签，大大的简化了纯化的步骤，且高浓度金属离子盐洗脱液TPO，得到的TPO蛋白稳定性好，不会在保存液中沉淀，利于后续试剂盒的开发应用。本发明还添加了筛选纯化TPO抗体的步骤，使Ni柱纯化工艺稳定，纯化出的TPO蛋白纯度高。出的TPO蛋白纯度高。出的TPO蛋白纯度高。
技术研发人员：冯奇 林晏因 李乾 付鹏德 蒋雪 姬成东
受保护的技术使用者：中元汇吉生物技术股份有限公司
技术研发日：2021.12.24
技术公布日：2022/3/18