Fmoc-氨基酸修饰的20（S）-原人参二醇衍生物及制备方法和用途

fmoc-氨基酸修饰的20（s）-原人参二醇衍生物及制备方法和用途
技术领域
1.本发明属于医药领域，具体涉及新的fmoc-氨基酸修饰的20(s)-原人参二醇衍生物及制备方法和用途。


背景技术：

2.20(s)-原人参二醇(20(s)-protopanxadiol，ppd)是原人参二醇型人参皂苷经化学水解或微生物酵解后的产物，是原人参二醇型人参皂苷的苷元。而原人参二醇型人参皂苷主要来源于人参、西洋参、三七等五加科植物，另外也可从葫芦科植物绞股藍中获得。现代药理研究表明，多种二醇组人参皂苷(如rg3、 rh2、c-k等)均表现出良好的抗肿瘤作用，进一步体内代谢研究发现它们的苷元20(s)-原人参二醇在抑制肿瘤增殖方面具有显著的效果。然而，20(s)-原人参二醇及rg3、rh2、c-k等人参皂苷活性成分的水溶性都较差，口服后生物利用度较低。本发明为了提高20(s)-原人参二醇的生物利用度，增强其抗肿瘤活性，选择fmoc-氨基酸对20(s)-原人参二醇进行结构修饰，合成一系列新的20(s)-原人参二醇氨基酸衍生物，力图达到提高其生物利用度，增强抗癌活性，为进一步研发抗癌药物提供候选化合物库。


技术实现要素：

3.本发明提供一系列新的20(s)-原人参二醇氨基酸衍生物及制备方法和用途的研究。
4.本发明20(s)-原人参二醇氨基酸衍生物是如下式的化合物或其可用盐：其中：r1、r2选自羟基、fmoc-氨基酰氧基、氨基酰氧基；r1、r2不同时为羟基。
5.以上所述fmoc-氨基酰氧基包括以下18种：fmoc-甘氨酰氧基、fmoc-缬氨酰氧基、fmoc-丙氨酰氧基、fmoc-苯丙氨酰氧基、fmoc-亮氨酰氧基、fmoc-蛋氨酰氧基、fmoc-半胱氨酰氧基、fmoc-组氨酸酰氧基、fmoc-精氨酸酰氧基、fmoc-天冬氨酰氧基、fmoc-异亮氨酰氧基、fmoc-脯氨酰氧基、fmoc-赖氨酸酰氧基、fmoc-色氨酰氧基、fmoc-丝氨酰氧基、fmoc-苏氨酰氧基、fmoc-酪氨酰氧基和fmoc-谷氨酸酰氧基；所述氨基酰氧基包括以下18种：甘氨酰氧基、缬氨酰氧基、丙氨酰氧基、苯丙氨酰氧基、亮氨酰氧基、蛋氨酰氧基、半胱氨酰氧基、组氨酸酰氧基、精氨酸酰氧基、天冬氨酰氧基、异亮氨酰氧基、脯氨酰氧基、赖氨酸酰氧基、色氨酰氧基、丝氨酰氧基、酪氨酰氧基、苏氨酰氧基和谷氨酰氧基。
6.本发明所述化合物包括下列化合物：
(1)3-o-芴甲氧羰基-甘氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(2)3-o-芴甲氧羰基-缬氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(3)3-o-芴甲氧羰基-苯丙氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(4)3-o-芴甲氧羰基-丙氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(5)3-o-芴甲氧羰基-异亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(6)3-o-芴甲氧羰基-o-叔丁酯基-天冬氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(7)3-o-芴甲氧羰基-s-三苯甲基-半胱氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(8)3-o-芴甲氧羰基-n-甲苯磺酰基-精氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(9)3，12-o-二芴甲氧羰-n-三苯甲基-组氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(10)3-o-芴甲氧羰基-o-叔丁基-酪氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(11)3-o-芴甲氧羰基-亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(12)3-o-芴甲氧羰基-n-叔丁酯-d-谷氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(13)3-o-芴甲氧羰基-o-叔丁基-苏氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(14)3-o-芴甲氧羰基-n-叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(15)3，12-o-二芴甲氧羰基-n-叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(16)3-o-芴甲氧羰基脯氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(17)3-o-芴甲氧羰基-n-叔丁氧羰基-色氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(18)3，12-o-二芴甲氧羰基-o-叔丁基-丝氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(19)3-o-芴甲氧羰基脯氨酰-蛋氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(20)3-o-甘氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(21)3-o-缬氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(22)3-o-苯丙氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(23)3-o-丙氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(24)3-o-异亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(25)3-o-叔丁基-天冬氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(26)3-o-三苯甲基-半胱氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(27)3-o-蛋氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(28)3-o-甲苯磺酰基-精氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(29)3，12-o-二三苯甲基-组氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(30)3-o-叔丁基-酪氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(31)3-o-亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(32)3-o-叔丁酯基-d-谷氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(33)3-o-叔丁基-苏氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(34)3-o-叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(35)3，12-o-二叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(36)3-o-脯氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(37)3-o-叔丁氧羰基-色氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇；(38)3，12-o-二叔丁基-丝氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇
17)、15.57(c-18)、16.00(c-19)、72.74(c-20)、 26.61(c-21)、35.64(c-22)、22.78(c-23)、126.11(c-24)、130.55(c-25)、23.75(c-26)、17.46(c-27)、27.84(c-28)、 16.51(c-29)、16.79(c-30)。
22.ms(m/z)：[m+hcoo-]-＝874.4374。
[0023]
化合物4：3-o-芴甲氧羰基丙氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-丙氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-丙氨酰氧基衍生物。
[0024]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.74(2h，d)、7.58(2h，t)、7.30(2h，m)、7.16(2h，t)、5.20(1h，t)，4.52(1h，dd)、 4.24、δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.85(3h，s)、0.82(3h，s)、0.82(3h，s)、0.77(3h，s)、0.67(3h，s)，此外，δ1.84(3h，s)为丙氨酰上的甲基信号。
[0025]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.15(c-1)、27.99(c-2)、82.32(c-3)、 39.41(c-4)、56.90(c-5)、19.28(c-6)、35.89(c-7)、40.89(c-8)、51.11(c-9)、38.03(c-10)、32.95(c-11)、 71.80(c-12)、49.44(c-13)、52.59(c-14)、32.25(c-15)、26.72(c-16)、55.68(c-17)、16.70(c-18)、17.13(c-19)、 73.87(c-20)、27.74(c-21)、36.77(c-22)、23.91(c-23)、127.24(c-24)、131.68(c-25)、24.87(c-26)、 18.92(c-27)、，28.98(c-28)、17.67(c-29)、17.93(c-30)。
[0026]
ms(m/z)：[m+hcoo-]-＝798.4510。
[0027]
化合物5：3-o-芴甲氧羰基异亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-异亮氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-异亮氨酰氧基衍生物。
[0028]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.73(2h，d)、7.56(2h，t)、7.28(2h，t)、7.08(2h，t)、 5.20(1h，t)、4.60(1h，d)、δ3.95、δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.85(6h，s)、0.82(3h，s)、0.79(6h，)、 0.69(3h，s)。
[0029]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.37(c-1)、28.36(c-2)、82.99(c-3)、 39.82(c-4)、57.32(c-5)、19.67(c-6)、36.27(c-7)、41.27(c-8)、51.50(c-9)、38.41(c-10)、33.34
(c-11)、72.17(c-12)、 49.81(c-13)、52.96(c-14)、32.62(c-15)、27.09(c-16)、56.07(c-17)、17.46(c-18)、17.50(c-19)、74.24(c-20)、 28.11(c-21)、37.16(c-22)、24.28(c-23)、127.61(c-24)、132.05(c-25)、26.90(c-26)、18.96(c-27)、29.41(c-28)、 18.15(c-29)、18.30(c-30)。
[0030]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝818.5624。
[0031]
化合物6：3-o-芴甲氧羰基-o-叔丁酯基-天冬氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-o-叔丁酯基-天冬氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-o-叔丁酯基-天冬氨酰氧基衍生物。
[0032]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.72(2h，d)、7.55(2h，t)、7.29(2h，t)、7.16(2h，t)为fmoc保护基中两个六元环上的质子信号；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.63(1h，dd)为c-3位质子信号；δ4.23为c-12位质子信号；δ1.53(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.84(3h，s)、0.83(3h，s)、0.81(3h， s)、0.77(3h，s)、0.67(3h，s)分别为8个甲基的信号峰；1.33(9h，s)为otbu保护基上3三个甲基的质子信号。
[0033]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.55(c-1)、28.36(c-2)、82.33(c-3)、 39.74(c-4)、57.29(c-5)、19.64(c-6)、36.24(c-7)、41.25(c-8)、51.48(c-9)、38.37(c-10)、33.33(c-11)、72.17(c-12)、 49.82(c-13)、52.95(c-14)、32.61(c-15)、27.10(c-16)、56.06(c-17)、17.06(c-18)、17.51(c-19)、74.24(c-20)、 28.10(c-21)、37.14(c-22)、24.28(c-23)、127.60(c-24)、132.06(c-25)、25.11(c-26)、18.97(c-27)、29.27(c-28)、 17.98(c-29)、18.29(c-30)。
[0034]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝876.5134。
[0035]
化合物7：3-o-芴甲氧羰基-s-三苯甲基-半胱氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-s-三苯甲基-半胱氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的 fmoc-s-三苯甲基-半胱氨酰氧基衍生物。
[0036]1h-nmr(400mhz，c5d5n)；δ7.50(2h，d)、7.27(2h，t)、7.19(2h，t)、7.14(2h，t)为fmoc保护基中两个六元环上的质子信号；δ5.21(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.51(1h，dd)为c-3位质子信号；δ4.26为c-12质子信号；δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.84(3h，s)、0.80(3h，s)、0.71(3h， s)、0.67(6h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0037]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.92(c-1)、26.86(c-2)、81.92(c-3)、 38.19(c-4)、55.71(c-5)、18.14(c-6)、34.73(c-7)、39.73(c-8)、49.94(c-9)、36.85(c-10)、31.82(c-11)、70.65(c-12)、 48.31(c-13)、51.45(c-14)、31.11(c-15)、25.60(c-16)、54.56(c-17)、15.56(c-18)、15.98(c-19)、72.72(c-20)、 26.60(c-21)、35.64(c-22)、22.78(c-23)、126.10(c-24)、130.55(c-25)、23.63(c-26)、17.46(c-27)、27.85(c-28)、 16.55(c-29)、16.78(c-30)。
[0038]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝1050.5410。
[0039]
化合物8：3-o-芴甲氧羰基蛋氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-蛋氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-蛋氨酰氧基衍生物。
[0041]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.84(2h，d)、7.68(2h，t)、7.40(2h，t)7.27(2h，t)为fmoc保护基中两个六元环上的质子信号；δ5.30(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.74(1h，dd)为c-3位质子信号；δ4.33为c-12质子信号；δ1.64(3h，s)、1.62(3h，s)、1.42(3h，s)、0.95(3h，s)、0.94(3h，s)、0.92(3h， s)、0.77(3h，s)、0.67(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0042]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：38.27(c-1)、27.92(c-2)、81.54(c-3)、 38.92(c-4)、55.76(c-5)、18.14(c-6)、34.75(c-7)、39.76(c-8)、49.98(c-9)、36.89(c-10)、31.82(c-11)、70.67(c-12)、 48.31(c-13)、51.45(c-14)、31.11(c-15)、26.60(c-16)、54.56(c-17)、15.57(c-18)、15.99(c-19)、72.74(c-20)、 26.86(c-21)、35.64(c-22)、22.77(c-23)、126.10(c-24)、130.55(c-25)、25.59(c-26)、17.46(c-27)、28.93(c-28)、 16.58(c-29)、16.79(c-30)。
[0043]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝836.4681。
[0044]
化合物9：3-o-芴甲氧羰基-n-甲苯磺酰基-精氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0045]
以20(s)-原人参二醇和fmoc-n-甲苯磺酰基-精氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-n-甲苯磺酰基-精氨酰氧基衍生物。
[0046]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.72(2h，d)、7.57(2h，t)、7.29(2h，t)、7.17(2h，t)为fmoc保护基中两个六元环上的质子信号；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.59(1h，dd)为c-3质子信号；δ4.22为c-12质子信号，δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.84(3h，s)、0.81(3h，s)、0.79(3h， s)、0.73(3h，s)、0.66(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0047]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.41(c-1)、29.04(c-2)、82.53(c-3)、39.83(c-4)、56.90(c-5)、19.27(c-6)、35.88(c-7)、40.88(c-8)、51.11(c-9)、38.01(c-10)、32.95(c-11)、71.80(c-12)、 49.44(c-13)、52.59(c-14)、32.24(c-15)、27.74(c-16)、55.70(c-17)、16.70(c-18)、17.14(c-19)、73.89(c-20)、 27.99(c-21)、36.77(c-22)、23.91(c-23)、127.23(c-24)、131.71(c-25)、26.73(c-26)、18.60(c-27)、30.64(c-28)、 17.73(c-29)、17.92(c-30)。
[0048]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝993.5568。
[0049]
化合物10：3，12-o-二芴甲氧羰-n-三苯甲基-组氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-n-三苯甲基-组氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的 fmoc-n-三苯甲基-组氨酰氧基衍生物。
[0050]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：7.71(2h，d)、7.56(1h，t)、7.27(4h，t)、7.17(4h，t)为fmoc保护基中连氧碳上的质子信号，五元环上质子信号以及两个六元环上的八个质子信号；δ8.86(1h，d)、8.74(1h，d) 为氨基酸上氨基所连质子的信号峰；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ1.54(6h，s)、1.26(3h， s)、0.83(6h，s)、0.77(3h，s)、0.73(3h，s)、0.54(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0051]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.35(c-1)、26.73(c-2)、80.70(c-3)、 37.67(c-4)、59.55(c-5)、17.55(c-6)、33.90(c-7)、39.08(c-8)、52.06(c-9)、36.30(c-10)、30.79
(c-11)、75.86(c-12)、 49.44(c-13)、52.44(c-14)、30.18(c-15)、25.13(c-16)、54.62(c-17)、14.88(c-18)、15.37(c-19)、72.89(c-20)、 26.46，(c-21)、36.09(c-22)、22.34(c-23)、125.60(c-24)、130.08(c-25)、23.04(c-26)、17.09(c-27)、27.31(c-28)、 15.89(c-29)、17.01(c-30)。
[0053]
化合物11：3-o-芴甲氧羰基-o-叔丁基-酪氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-o-叔丁基-酪氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的 fmoc-o-叔丁基-酪氨酰氧基衍生物。
[0054]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.72(2h，d)、7.55(1h，t)、7.29(4h，t)、7.15(4h，t)分别为fmoc保护基中连氧碳上的质子信号、五元环上质子信号以及两个六元环上的8个质子信号；δ7.24(2h，d)、6.98(2h， d)为氨基酸上苯环的四个质子信号；δ9.04(1h，d)为氨基酸上氨基所连质子的质子信号；δ5.20(1h，t)为 c-24位不饱和质子信号；δ4.45(1h，dd)为c-3质子信号；δ4.19为c-12质子信号；δ1.54(3h，s)、1.51(3h， s)、1.31(3h，s)、0.88(3h，s)、0.85(3h，s)、0.81(3h，s)、0.76(3h，s)、0.67(3h，s)分别为8个甲基的信号峰；1.17(9h，s)为tbu上三个甲基的质子信号。
[0055]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.95(c-1)、26.85(c-2)、81.43(c-3)、 38.27(c-4)、55.81(c-5)、18.16(c-6)、34.74(c-7)、39.75(c-8)、49.98(c-9)、36.87(c-10)、31.80(c-11)、70.67(c-12)、 48.31(c-13)、51.45(c-14)、31.11(c-15)、25.58(c-16)、54.54(c-17)、15.57(c-18)、16.00(c-19)、72.76(c-20)、 26.59(c-21)、35.64(c-22)、22.77(c-23)、126.09(c-24)、132.25(c-25)、23.64(c-26)、17.46(c-27)、27.89(c-28)、 16.46(c-29)、16.79(c-30)。
[0057]
化合物12：3-o-芴甲氧羰基亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-亮氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-亮氨酰氧基衍生物。
[0058]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ8.84为亮氨酸上n-h的质子信号，δ4.24为亮氨酸上-ch-n
的质子信号；δ7.72(2h，d)、7.59(2h，t)、7.28(2h，m)、7.17(2h，m)为fmoc保护基上两个六元环上的质子信号；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.56(1h，d)为c-3质子信号，δ3.79为c-12质子信号；δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.86(3h，s)、0.85(3h，s)、0.82(3h，s)、0.79(3h，s)、0.68(3h， s)分别为8个甲基的信号峰。
[0059]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：38.00(c-1)、26.85(c-2)、81.23(c-3)、 38.27(c-4)、55.78(c-5)、18.14(c-6)、34.74(c-7)、39.75(c-8)、49.97(c-9)、36.90(c-10)、31.83(c-11)、70.67(c-12)、 48.30(c-13)、51.45(c-14)、31.10(c-15)、25.59(c-16)、54.56(c-17)、15.57(c-18)、16.00(c-19)、72.73(c-20)、 26.60(c-21)、36.63(c-22)、22.90(c-23)、126.10(c-24)、130.55(c-25)、24.98(c-26)、17.46(c-27)、27.93(c-28)、 16.60(c-29)、16.79(c-30)。
[0060]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝818.5682。
[0061]
化合物13：3-o-芴甲氧羰基-n-叔丁酯-d-谷氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-n-叔丁酯-谷氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的 fmoc-n-叔丁酯-谷氨酰氧基衍生物。
[0062]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ8.93(1h，d)为谷氨酸上n-h的质子信号，δ7.72(2h，d)、7.57(2h， m)、7.29(2h，m)、7.15(2h，t)为fmoc保护基上两个六元环上的质子信号；δ1.34(9h，s)为叔丁基上的质子信号；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.22(1h，t)为c-3质子信号；δ3.78为c-12质子信号；δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.85(3h，s)、0.84(3h，s)、0.80(3h，s)、0.78(3h，s)、0.67(3h， s)分别为8个甲基的信号峰。
[0063]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：38.27(c-1)、26.85(c-2)、81.40(c-3)、 38.70(c-4)、55.78(c-5)、18.15(c-6)、35.64(c-7)、39.75(c-8)、49.97(c-9)、37.95(c-10)、31.96(c-11)、70.67(c-12)、 48.31(c-13)、51.45(c-14)、31.81(c-15)、25.59(c-16)、54.36(c-17)、15.57(c-18)、16.00(c-19)、72.75(c-20)、 26.60(c-21)、36.89(c-22)、22.77(c-23)、126.10(c-24)、130.56(c-25)、23.73(c-26)、17.46(c-27)、27.51(c-28)、 16.48(c-29)、16.80(c-30)。
[0064]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝890.5338。
[0065]
化合物14：3-o-芴甲氧羰基-o-叔丁基-苏氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0066]
以20(s)-原人参二醇和fmoc-o-叔丁基-苏氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-o-叔丁基-苏氨酰氧基衍生物。
[0067]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ8.17(1h，d)为谷氨酸上n-h的信号，δ7.59(2h，d)、7.47(2h，t)、7.17(2h，t)、7.04(2h，t)为fmoc保护基上两个六元环上的质子信号；δ0.97(9h，s)为叔丁基上的质子信号；δ5.09(1h，m) 为c-24位不饱和质子信号；δ4.50(1h，dd)为c-3质子信号；δ4.13为c-12质子信号；δ1.42(3h，s)、1.40(3h， s)、1.20(3h，s)、0.76(3h，s)、0.74(6h，s)、0.71(3h，s)、0.58(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0068]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：38.01(c-1)、26.87(c-2)、81.76(c-3)、 38.32(c-4)、55.85(c-5)、18.23(c-6)、34.78(c-7)、39.78(c-8)、50.02(c-9)、36.87(c-10)、31.84(c-11)、70.68(c-12)、 48.33(c-13)、51.47(c-14)、31.13(c-15)、25.59(c-16)、54.57(c-17)、15.59(c-18)、16.08(c-19)、72.74(c-20)、 26.62(c-21)、35.67(c-22)、22.79(c-23)、126.12(c-24)、130.56(c-25)、23.78(c-26)、17.46(c-27)、28.04(c-28)、 16.57(c-29)、16.81(c-30)。
[0069]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝862.5889。
[0070]
化合物15：3-o-芴甲氧羰基-n-叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0071]
以20(s)-原人参二醇和fmoc-n-叔丁氧羰基-赖氨酸(n-叔丁氧羰基)为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-n-叔丁氧羰基-赖氨酰氧基衍生物。
[0072]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ8.67、7.32为赖氨酸上n-h的质子信号，δ7.60(2h，d)、7.44(2h， m)、7.15(2h，t)、7.02(2h，t)为fmoc保护基上两个六元环上的质子信号；δ1.27(9h，s)为boc保护基上叔丁基的质子信号；δ5.07(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.52(1h，t)为c-3质子信号；δ3.68为c-12 质子信号；δ1.41(3h，s)、1.38(3h，s)、1.18(3h，s)、0.74(3h，s)、0.71(3h，s)、0.67(6h，s)、0.55(3h， s)分别为8个甲基的信号峰。
[0073]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.47(c-1)、29.41(c-2)、82.68(c-3)、39.81(c-4)、57.33(c-5)、19.67(c-6)、36.25(c-7)、41.98(c-8)、51.49(c-9)、38.41(c-10)、33.30(c-11)、72.18(c-12)、 49.81(c-13)、52.96(c-14)、32.62(c-15)、27.10(c-16)、56.05(c-17)、
17.08(c-18)、17.54(c-19)、74.27(c-20)、 28.35(c-21)、37.15(c-22)、25.04(c-23)、127.61(c-24)、132.07(c-25)、25.24(c-26)、18.97(c-27)、29.90(c-28)、 18.01(c-29)、18.31(c-30)。
[0074]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝933.6263。
[0075]
化合物16：3，12-o-二芴甲氧羰基-n-叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0076]
以20(s)-原人参二醇和fmoc-n-叔丁氧羰基-赖氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-n-叔丁氧羰基-赖氨酰氧基衍生物。
[0077]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ8.91(1h，d)、8.81(1h，d)、7.45(2h，s)为两个赖氨酸上n-h的信号；δ7.72(2h，d)、7.57(2h，m)、7.29(2h，t)、7.16(2h，t)为fmoc保护基上两个六元环上的质子信号另给出一组20(s)-原人参二醇特征信号，δ5.15(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.58为c-3质子信号；δ4.52 为c-12质子信号；δ1.60(6h，s)、1.32(3h，s)、0.84(3h，s)、0.82(3h，s)、0.76(6h，s)、0.55(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0078]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：38.78(c-1)、27.81(c-2)、81.10(c-3)、 39.59(c-4)、60.06(c-5)、18.06(c-6)、36.78(c-7)、45.17(c-8)、52.50(c-9)、38.00(c-10)、34.39(c-11)、76.16(c-12)、 49.84(c-13)、53.04(c-14)、31.21(c-15)、23.52(c-16)、54.96(c-17)、15.38(c-18)、15.86(c-19)、73.43(c-20)、 25.66(c-21)、37.89(c-22)、22.90(c-23)、126.11(c-24)、130.69(c-25)、23.52(c-26)、17.63(c-27)、28.39(c-28)、 16.42(c-29)、17.38(c-30)。
[0079]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝1383.7937。
[0080]
化合物17：3-o-芴甲氧羰基-脯氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0081]
以20(s)-原人参二醇和fmoc-脯氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc
‑ꢀ
脯氨酰氧基衍生物。1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.45(1h，s)为脯氨酸上n-h的信号；δ7.76(2h，t)、7.65(2h，m)、7.32(2h，m)、 7.29(2h，m)为fmoc保护基上两个六元环上的质子信号；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ 4.59(1h，m)为c-3质子信号；δ3.78为c-12质子信号；δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.85(3h，s)、 0.80(6h，t)、0.76(3h，s)、0.68(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0082]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.44(c-1)、28.34(c-2)、82.64(c-3)、 39.75(c-4)、57.27(c-5)、19.64(c-6)、36.24(c-7)、41.26(c-8)、51.47(c-9)、38.40(c-10)、33.30(c-11)、72.17(c-12)、 49.80(c-13)、52.95(c-14)、32.61(c-15)、27.09(c-16)、56.04(c-17)、17.08(c-18)、17.50(c-19)、74.26(c-20)、 28.10(c-21)、37.14(c-22)、24.27(c-23)、127.59(c-24)、132.06(c-25)、25.90(c-26)、18.96(c-27)、29.34(c-28)、 18.03(c-29)、18.29(c-30)。
[0083]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝802.5236。
[0084]
化合物18：3-o-芴甲氧羰基-n-叔丁氧羰基-色氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0085]
以20(s)-原人参二醇和fmoc-n-叔丁氧羰基-色氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的fmoc-n-叔丁氧羰基-色氨酰氧基衍生物。
[0086]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ8.51、7.61、7.35、7.15为fmoc保护基上两个六元环上的质子信号。δ1.33(9h，t)为boc保护基上叔丁基的信号；δ5.03(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.50(1h，m)为c-3 质子信号；δ4.08为c-12质子信号；δ1.41(6h，m)、1.19(6h，t)、0.74
(3h，s)、0.71(3h，s)、0.57(6h，s)分别为 8个甲基的信号峰。
[0087]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.90(c-1)、26.87(c-2)、81.73(c-3)、 38.30(c-4)、55.79(c-5)、18.16(c-6)、34.74(c-7)、39.76(c-8)、49.97(c-9)、36.88(c-10)、31.79(c-11)、70.68(c-12)、 48.33(c-13)、51.45(c-14)、31.11(c-15)、25.59(c-16)、54.56(c-17)、15.57(c-18)、16.03(c-19)、72.76(c-20)、 26.61(c-21)、35.65(c-22)、22.78(c-23)、126.10(c-24)、130.57(c-25)、23.49(c-26)、17.46(c-27)、27.87(c-28)、 16.31(c-29)、16.80(c-30)。
[0088]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝991.6165。
[0089]
化合物19：3，12-o-二芴甲氧羰基-o-叔丁基-丝氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。以20(s)-原人参二醇和fmoc-o-叔丁基-丝氨酸为原料，其他操作同化合物1，得20(s)-原人参二醇的 fmoc-o-叔丁基-丝氨酰氧基衍生。
[0090]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ9.03、8.68(1h，d)为两个丝氨酸上n-h的信号，δ1.16(9h，d)、1.01(9h， s)为两个叔丁基上的信号。另给出一组20(s)-原人参二醇特征信号，δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号。δ4.47(1h，t)为c-3质子信号；δ4.23为c-12质子信号，δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、 0.87(3h，m)、0.85(3h，d)、0.83(3h，t)、0.67(6h，m)分别为8个甲基的信号峰。
[0091]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.46(c-1)、28.62(c-2)、82.95(c-3)、 39.78(c-4)、57.98(c-5)、19.69(c-6)、36.26(c-7)、41.27(c-8)、51.50(c-9)、38.39(c-10)、33.32(c-11)、74.26(c-12)、 49.83(c-13)、52.96(c-14)、32.62(c-15)、28.10(c-16)、56.05(c-17)、17.08(c-18)、17.52(c-19)、72.18(c-20)、 28.36(c-21)、37.15(c-22)、24.28(c-23)、127.61(c-24)、131.66(c-25)、27.09(c-26)、18.97(c-27)、29.41(c-28)、 17.97(c-29)、18.30(c-30)。
[0092]
化合物20：3-o-甘氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
3质子信号；δ3.86为c-12质子信号，δ1.55(3h，s)、1.52(3h，s)、1.31(3h，s)、0.86(3h，s)、0.84(3h，s)、0.75(3h，s)、0.70(6h，s) 分别为8个甲基的信号峰。
[0104]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：39.46(c-1)、28.97(c-2)、82.04(c-3)、40.90(c-4)、56.96(c-5)、19.30(c-6)、 35.92(c-7)、42.96(c-8)、51.15(c-9)、38.02(c-10)、32.93(c-11)、71.77(c-12)、49.44(c-13)、52.59(c-14)、 32.25(c-15)、27.73(c-16)、55.66(c-17)、16.72(c-18)、17.17(c-19)、73.87(c-20)、27.98(c-21)、36.75(c-22)、23.89(c-23)、127.23(c-24)、131.65(c-25)、26.74(c-26)、18.61(c-27)、30.91(c-28)、17.66(c-29)、17.94(c-30)。 ms(m/z)：[m+hcoo-]-＝652.4572。
[0105]
3-o-丙氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0106]
以化合物4为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的丙氨酰氧基衍生物。
[0107]1h-nmr谱(400mhz，c5d5n)给出丙氨酰特征信号，δ1.19(3h，s)为丙氨酰上的甲基信号，δ5.07(1h，t) 为c-24位不饱和质子信号。δ4.44(1h，d)为c-3质子信号，δ3.65为c-12质子信号，δ1.41(3h，s)、1.38(3h，s)、1.18(3h，s)、0.73(3h，s)、0.70(3h，s)、0.66(3h，s)、0.64(3h，s)、0.57(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0108]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：39.13(c-1)、27.99(c-2)、81.66(c-3)、39.45(c-4)、56.94(c-5)、22.21(c-6)、 35.91(c-7)、40.90(c-8)、51.15(c-9)、38.04(c-10)、32.94(c-11)、71.78(c-12)、49.46(c-13)、52.59(c-14)、 32.25(c-15)、26.73(c-16)、55.67(c-17)、16.72(c-18)、17.17(c-19)、73.86(c-20)、27.73(c-21)、36.75(c-22)、 23.89(c-23)、127.23(c-24)、131.65(c-25)、24.86(c-26)、19.31(c-27)、29.00(c-28)、17.66(c-29)、17.95(c-30)。
[0109]
ms(m/z)：[m+hcoo-]-＝576.4272。
[0110]
化合物24：3-o-异亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0111]
以化合物5为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的异亮氨酰氧基衍生物。
[0112]1h-nmr谱(400mhz，c5d5n)给出异亮氨酰特征信号，δ5.36(1h，t)为c-24位不饱和质子信号。δ4.70(1h，d)为c-3质子信号，δ3.90为c-12质子信号。δ1.65(3h，s)、1.62(3h，s)、1.42(3h，s)、0.94(6h，s)、 0.91(6h，s)、0.81(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
17)、17.07(c-18)、17.52(c-19)、 74.24(c-20)、28.10(c-21)、38.36(c-22)、24.28(c-23)、127.60(c-24)、132.06(c-25)、25.16(c-26)、18.96(c-27)、 29.42(c-28)、18.06(c-29)、18.29(c-30)。
[0124]
ms(m/z)：[m+na]
+
＝828.4977。
[0125]
化合物27：3-o-蛋氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0126]
以化合物8为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的蛋氨酰氧基衍生物。
[0127]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ5.30(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.69(1h，dd)为c-3质子信号；δ4.33为c-12质子信号；δ1.67(3h，s)、1.62(3h，s)、1.41(3h，s)、0.96(3h，s)、0.93(3h，s)、0.91(3h， s)、0.89(3h，s)、0.80(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0128]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.46(c-1)、29.48(c-2)、82.35(c-3)、 39.82(c-4)、57.31(c-5)、19.68(c-6)、36.21(c-7)、41.28(c-8)、51.52(c-9)、38.42(c-10)、33.34(c-11)、 72.17(c-12)、49.85(c-13)、52.97(c-14)、32.63(c-15)、28.11(c-16)、55.64(c-17)、16.40(c-18)、17.09(c-19)、 74.25(c-20)、28.38(c-21)、36.28(c-22)、24.28(c-23)、127.60(c-24)、131.26(c-25)、27.10(c-26)、18.32(c-27)、 32.19(c-28)、32.19(c-29)、18.10(c-30)。
[0129]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝592.4702。
[0130]
化合物28：3-o-甲苯磺酰基-精氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0131]
以化合物9为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的精氨酰氧基(n-甲苯磺酰基)衍生物。
[0132]1h-nmr谱(400mhz，c5d5n)给出化合物9特征信号，δ5.21(1h，t)为c-24位不饱和质子信号。 1.54(3h，s)、1.52(3h，s)、1.32(3h，s)、0.86(3h，s)、0.83(3h，s)、0.76(3h，s)、0.75(3h，s)、0.69(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0133]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：39.42(c-1)、28.11(c-2)、82.34(c-3)、39.82(c-4)、56.31(c-5)、19.67(c-6)、36.28(c-7)、41.28(c-8)、51.52(c-9)、38.40(c-10)、32.62(c-11)、72.18(c-12)、49.85(c-13)、52.97(c-14)、 29.45(c-15)、25.23(c-16)、56.06(c-17)、17.09(c-18)、17.54(c-19)、74.28(c-20)、27.09(c-21)、37.14(c-22)、 22.40(c-23)、127.59(c-24)、132.08(c-25)、24.28(c-26)、18.97(c-27)、28.37(c-28)、18.11(c-29)、18.31(c-30)。
[0134]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝771.1563。
[0135]
化合物29：3，12-o-二三苯甲基-组氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0136]
以化合物10为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的二组氨酰氧基(n-三苯甲基)衍生物。
[0137]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ5.25(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ1.55(6h，s)、1.24(3h，s)、 0.88(3h，s)、0.84(6h，s)、0.77(3h，s)、0.75(3h，s)、0.62(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0138]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.41(c-1)、29.32(c-2)、82.24(c-3)、 39.77(c-4)、56.85(c-5)、19.62(c-6)、35.98(c-7)、41.17(c-8)、51.40(c-9)、38.38(c-10)、35.25(c-11)、76.92(c-12)、 46.75(c-13)、53.90(c-14)、32.62(c-15)、27.17(c-16)、55.08(c-17)、17.00(c-18)、17.52(c-19)、74.70(c-20)、 28.51(c-21)、37.59(c-22)、24.30(c-23)、127.54(c-24)、132.10(c-25)、25.13(c-26)、19.10(c-27)、29.99(c-28)、 17.98(c-29)、18.74(c-30)。
[0139]
lc-ms(m/z)：[m+h]
+
＝1219.7875。
[0140]
化合物30：3-o-叔丁基-酪氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0141]
以化合物11为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的酪氨酰氧基(o-叔丁基)衍生物。
[0142]
h-nmr谱(400mhz，c5d5n)给出络氨酰特征信号，δ7.00(2h，d)、7.24(2h，d)为氨基酸上苯环上的四个质子信号；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号。δ4.56(1h，dd)为c-3质子信号，δ3.88(1h，t)为 c-12质子信号。δ1.54(3h，s)、1.52(3h，s)、1.32(3h，s)、0.86(3h，s)、0.83(3h，s)、0.76(3h，s)、0.74(3h，s)、0.69(3h，s) 分别为8个甲基的信号峰。δ1.19(9h，s)为tbu保护基上三个甲基的质子信号。
[0143]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：39.81(c-1)、28.36(c-2)、82.34(c-3)、41.27(c-4)、57.32(c-5)、19.67(c-6)、 36.27(c-7)、42.63(c-8)、51.51(c-9)、38.39(c-10)、33.32(c-11)、72.18(c-12)、49.83(c-13)、52.96(c-14)、 32.62(c-15)、27.09(c-16)、56.06(c-17)、17.09(c-18)、17.54(c-19)、74.25(c-20)、28.10(c-21)、37.15(c-22)、 24.28(c-23)、127.60(c-24)、134.60(c-25)、25.15(c-26)、18.96(c-27)、29.34(c-28)、17.98(c-29)、
18.31(c-30)。
[0145]
化合物31：3-o-亮氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0146]
以化合物12为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的亮氨酰氧基衍生物。
[0147]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.16、6.76为亮氨酸上n-h的质子信号；δ5.09(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.49(1h，t)为c-3质子信号；δ3.69为c-12质子信号；δ1.42(3h，s)、1.40(3h，s)、1.20(3h， s)、0.75(3h，s)、0.72(9h，s)、0.59(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0148]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.98(c-1)、26.87(c-2)、80.55(c-3)、 38.32(c-4)、55.83(c-5)、18.17(c-6)、34.78(c-7)、39.77(c-8)、50.02(c-9)、36.92(c-10)、31.84(c-11)、70.68(c-12)、 48.34(c-13)、51.47(c-14)、31.12(c-15)、25.60(c-16)、54.57(c-17)、15.59(c-18)、16.04(c-19)、72.75(c-20)、 26.61(c-21)、35.64(c-22)、23.01(c-23)、126.10(c-24)、130.56(c-25)、24.92(c-26)、17.46(c-27)、27.96(c-28)、 16.61(c-29)、16.81(c-30)。
[0149]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝574.4847。
[0150]
化合物32：3-o-叔丁酯基-d-谷氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0151]
以化合物13为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的谷氨酰氧基(n-gamma-叔丁酯) 衍生物。
[0152]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ8.60、7.46(1h，s)为谷氨酸上n-h的质子信号；δ1.35(9h，t)为叔丁基上的质子信号；δ5.21(1h，s)为c-24位不饱和质子信号，δ4.57(1h，dd)为c-3质子信号；δ3.80为c-12质子信号；δ1.55(3h，s)、1.52(3h，s)、1.32(3h，s)、0.86(3h，s)、0.83(3h，s)、0.78(6h，s)、0.69(3h，s) 分别为8个甲基的信号峰。
[0153]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.39(c-1)、28.35(c-2)、82.33(c-3)、 39.81(c-4)、57.31(c-5)、19.68(c-6)、36.26(c-7)、41.28(c-8)、51.51(c-9)、38.42(c-10)、33.31(c-11)、72.18(c-12)、 49.82(c-13)、52.97(c-14)、32.62(c-15)、27.1(c-16)、55.87(c-17)、17.09(c-18)、17.53(c-19)、74.27(c-20)、 28.11(c-21)、37.15(c-22)、24.28(c-23)、127.61(c-24)、132.07(c-25)、25.22(c-26)、18.97(c-27)、29.34(c-28)、 18(c-29)、18.32(c-30)。
[0154]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝646.5018。
[0155]
化合物33：3-o-叔丁基-苏氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0156]
以化合物14为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的苏氨酰氧基(o-叔丁基)衍生物。
[0157]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.32、6.72(1h，s)为苏氨酸上-n-h的质子信号；δ0.96(9h，t)为叔丁基上的信号；δ5.09(1h，m)为c-24位不饱和质子信号；δ4.47(1h，t)为c-3质子信号；δ3.89为c-12质子信号；δ1.41(3h，s)、1.38(3h，s)、1.18(6h，d)、0.73(3h，s)、0.70(3h，s)、0.69(3h，s)、0.59(3h，d)分别为8个甲基的信号峰。
[0158]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.13(c-1)、28.02(c-2)、82.14(c-3)、 39.51(c-4)、57.02(c-5)、19.38(c-6)、35.94(c-7)、40.94(c-8)、51.19(c-9)、38.05(c-10)、32.99(c-11)、71.83(c-12)、 49.48(c-13)、52.63(c-14)、32.28(c-15)、26.75(c-16)、55.71(c-17)、16.75(c-18)、17.24(c-19)、73.9(c-20)、 27.77(c-21)、36.82(c-22)、23.94(c-23)、127.27(c-24)、131.71(c-25)、24.98(c-26)、18.62(c-27)、29.13(c-28)、 17.76(c-29)、17.98(c-30)。
[0159]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝618.5048。
[0160]
化合物34：3-o-叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0161]
以化合物15为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的赖氨酰氧基(n-叔丁氧羰基)衍生物。
[0162]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.33、7.20、6.75(1h，s)为赖氨酸上n-h的质子信号；δ1.27(9h，s) 为叔丁氧羰基上的质子信号；δ5.08(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.46(1h，t)为c-3质子信号；δ3.67 为c-12质子信号；δ1.41(3h，s)、1.39(3h，s)、1.19(3h，s)、0.73(3h，s)、0.70(3h，s)、0.66(6h，d)、 0.57(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0163]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.89(c-1)、26.85(c-2)、80.63(c-3)、 38.34(c-4)、55.85(c-5)、18.19(c-6)、35.13(c-7)、40.64(c-8)、50.02(c-9)、36.93(c-10)、34.77(c-11)、70.68(c-12)、 48.31(c-13)、51.47(c-14)、31.81(c-15)、25.60(c-16)、54.54(c-17)、15.59(c-18)、16.06(c-19)、72.77(c-20)、 26.61(c-21)、35.65(c-22)、23.31(c-23)、126.1(c-24)、130.57(c-25)、23.72(c-26)、17.47(c-27)、27.87(c-28)、 16.52(c-29)、16.82(c-30)。
[0164]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝689.4960。
[0165]
化合物35：3，12-o-二叔丁氧羰基-赖氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0166]
以化合物16为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的赖氨酰氧基(n-二叔丁氧羰基) 衍生物。
[0167]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.34、7.23(1h，s)为两个赖氨酸上-nh-的信号；δ1.41(18h，d)为两个叔丁氧羰基上一共18个质子的信号；δ5.15(1h，m)为c-24位不饱和质子信号；δ4.72为c-3质子信号；δ4.57为c-12质子信号；δ1.58(3h，d)、1.54(3h，d)、1.27(3h，s)、0.84(6h，s)、0.78(6h，s)、0.67(3h，s)分别为 8个甲基的信号峰。
[0168]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：38.10(c-1)、25.64(c-2)、80.54(c-3)、 39.64(c-4)、54.96(c-5)、18.10(c-6)、36.18(c-7)、45.18(c-8)、49.80(c-9)、37.86(c-10)、35.07(c-11)、75.10(c-12)、 48.32(c-13)、52.35(c-14)、31.01(c-15)、23.48(c-16)、53.66(c-17)、15.45(c-18)、15.94(c-19)、73.17(c-20)、 23.63(c-21)、36.85(c-22)、22.81(c-23)、126.00(c-24)、130.67(c-25)、23.30(c-26)、17.58(c-27)、27.80(c-28)、 16.48(c-29)、17.11(c-30)。
[0169]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝917.6950。
[0170]
化合物36：3-o-脯氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0171]
以化合物17为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的脯氨酰氧基衍生物。
[0172]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ7.45(2h，s)为脯氨酸上n-h的信号；δ5.20(1h，t)为c-24位不饱和质子信号；δ4.59(1h，t)为c-3质子信号；δ3.79为c-12质子信号；δ1.54(3h，s)、1.51(3h，s)、1.31(3h，s)、0.86(3h，s)、 0.83(3h，s)、0.81(3h，s)、0.78(3h，s)、0.69(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0173]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：39.15(c-1)、28.00(c-2)、81.94(c-3)、39.42(c-4)、56.90(c-5)、19.30(c-6)、35.90(c-7)、40.90(c-8)、51.14(c-9)、38.03(c-10)、32.96(c-11)、71.80(c-12)、 49.47(c-13)、52.60(c-14)、32.25(c-15)、26.78(c-16)、55.69(c-17)、16.71(c-18)、17.17(c-19)、73.87(c-20)、 27.74(c-21)、36.77(c-22)、23.91(c-23)、127.23(c-24)、131.69(c-25)、26.73(c-26)、18.60(c-27)、29.06(c-28)、17.68(c-29)、17.94(c-30)。
[0174]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝558.4692。
[0175]
化合物37：3-o-叔丁氧羰基-色氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0176]
以化合物18为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的色氨酰氧基(n-叔丁氧羰基)衍生物。
[0177]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ3.06(9h，t)为boc保护基上叔丁基的信号；δ5.40(1h，m)为c-24位不饱和质子信号，δ4.76(1h，m)为c-3质子信号；δ4.12为c-12质子信号。δ3.15(3h，s)、3.12(3h，s)、2.92(6h，m)、 2.47(3h，m)、2.44(3h，d)、2.36(3h，m)、2.30(3h，s)、0.69(3h，s)分别为8个甲基的信号峰。
[0178]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.85(c-1)、26.87(c-2)、81.09(c-3)、 38.34(c-4)、55.81(c-5)、18.18(c-6)、34.77(c-7)、39.77(c-8)、50.00(c-9)、36.90(c-10)、31.80(c-11)、70.68(c-12)、 48.33(c-13)、51.47(c-14)、31.13(c-15)、25.60(c-16)、54.56(c-17)、15.58(c-18)、16.05(c-19)、72.77(c-20)、 26.62(c-21)、35.65(c-22)、22.78(c-23)、126.11(c-24)、130.57(c-25)、23.54(c-26)、17.47(c-27)、27.02(c-28)、 16.38(c-29)、16.82(c-30)。
[0179]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝747.5298。
[0180]
化合物38：3，12-o-二叔丁基-丝氨酰-达玛-24-烯-3β，12β，20s-三醇。
[0181]
以化合物19为原料，其他操作同化合物20，得20(s)-原人参二醇的丝氨酰氧基(o-叔丁基)衍生物。
[0182]1h-nmr(400mhz，c5d5n)：δ5.21(1h，t)为c-24位不饱和质子信号。δ4.61为c-3质子信号，δ3.80 为c-12质子信号。δ1.54(3h，s)、1.52(3h，s)、1.32(3h，s)、0.87(3h，s)、0.83(6h，s)、0.81(3h，s)、0.72(3h，s) 分别为8个甲基的信号峰。
[0183]
13
cnmr(400mhz，c5d5n)：δppm：37.42(c-1)、26.33(c-2)、80.26(c-3)、 37.82(c-4)、55.41(c-5)、17.69(c-6)、34.27(c-7)、39.26(c-8)、49.51(c-9)、36.39(c-10)、31.31(c-11)、70.16(c-12)、 47.80(c-13)、50.95(c-14)、30.60(c-15)、25.08(c-16)、54.03(c-17)、15.07(c-18)、15.56(c-19)、72.24(c-20)、26.09(c-21)、35.13(c-22)、22.26(c-23)、125.59(c-24)、130.04(c-25)、23.30(c-26)、16.95(c-27)、27.38(c-28)、 16.01(c-29)、16.29(c-30)。
[0184]
ms(m/z)：[m+h]
+
＝747.5354。
[0185]
实验例1本发明新合成19个新型结构化合物对huh-7人肝癌细胞、a2780人卵巢癌细胞、a549 人肺泡腺癌基底上皮细胞及huvec人脐静脉内皮细胞四种细胞的毒性作用评
价。
[0186]
用胰酶消化对数期细胞，2min后加入完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀并取1ml细胞悬液用细胞计数仪计数，根据计数结果调整其浓度至1*104/ml接种于96孔板(2-11列)，每孔加入100μl的细胞悬液。
[0187]
待细胞贴壁后，加入用完全培养基稀释的浓度分别为0，0.78125，1.5625，3.125，6.25，12.5，25， 50，100μg/ml的样品溶液，每个浓度设置3个副孔。在5％的co2，37℃的培养箱中继续孵育。
[0188]
48小时后，每孔再加入10μl的mtt溶液(5mg/ml，即0.5％mtt)，继续培养4小时，接着向每孔加入100μl甲瓒溶解液，4小时后利用酶标仪测量吸光度，测量波长是570nm，取三个副孔的平均值，计算出不同药物浓度下的细胞存活率，用graphpad计算ic
50
。
[0189]
表1 19个目标化合物作用于不同细胞的ic
50
值。*与正常对照组比较，p＜0.05；**与正常对照组比较，p＜0.01。
δ
与正常对照组比较，p＜0.05；
δδ
与正常对照组比较，p＜0.01。
[0190]
结论：由表1可知，对于huh-7细胞来说，asp(otbu)-ppd及arg(tos)-ppd的ic
50
值较小，说明 arg(tos)-ppd及asp(otbu)-ppd对huh-7肝癌细胞的抑制作用较强，对此癌细胞有较好的抑制作用；对于a549细胞来说，asp(otbu)-ppd、lys(boc)-ppd及arg(tos)-ppd的ic
50
值较小，说明asp(otbu)-ppd、 lys(boc)-ppd及arg(tos)-ppd对a549肺癌细胞的抑制作用较强；同理可得asp(otbu)-ppd、lys(boc)-ppd、 2[lys(boc)]-ppd及arg(tos)-ppd作用于a2780卵巢癌细胞的ic
50
值较小，说明asp(otbu)-ppd、lys(boc)-ppd及arg(tos)-ppd对a2780卵巢癌细胞的抑制作用较强；与上述几个化合物作用于huvec 细胞的ic
50
相比较来说，arg(tos)-ppd不仅对三个癌细胞同时具有较强的抑制作用，同时对于正常细胞的抑制作用也低于lys(boc)-ppd，所以，结合对癌细胞的抑制作用以及对正常细胞的毒性作用，本研究选择 arg(tos)-ppd和lys(boc)-ppd进行后续药代动力学研究。
[0191]
实验例2化合物arg(tos)-ppd的药代动力学研究。
[0192]
大鼠给药前随机分为空白对照组、ppd组、arg(tos)-ppd组，每组动物6只，给药前24h禁食，自由饮水，分别灌胃ppd、arg(tos)-ppd于对应大鼠，灌胃量按100mg/kg计算，空白组灌胃2ml生理盐水。分别于给药后20min、40min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h眼眶取血至加有6μl(5000 u/ml)肝素的ep管中。所取血浆以3000r/min离心20min，吸取上清液150μl，保存至-20℃待测。
[0193]
上述待测样品用乙酸乙酯与水饱和正丁醇先后各萃取3次，乙酸乙酯和正丁醇萃取所得上清液分别用氮吹仪吹于。挥干的乙酸乙酯提取部分残渣用150μl的0.1mg/ml的f1内标溶液溶解，进样，记录质量色谱图及峰面积，采用内标法计算大鼠血浆中ppd及arg(tos)-ppd的血药浓度，应用masslnyx v4.1软件对血浆样品进行质谱数据采集。
[0194]
建立了uplc-q/tof-ms体内定量方法，对大鼠给予不同时间点血浆样品进行定量分析。将ppd、 arg(tos)-ppd的峰面积与内标拟人参皂苷f1的峰面积比值代入标准工作曲线，计算血药浓度及平均血药浓度。
[0195]
本实验采用uplc-q/tof-ms结合pksolver软件进行arg(tos)-ppd药代动力学研究，药代动力学参数如下表所示。
[0196]
表2 arg(tos)-ppd药代动力学研究(n＝6，x
±
sd)*与对照组比较，p＜0.05；**与正常对照组比较，p＜0.01。
[0197]
结论：由表2可知，与ppd相比，arg(tos)-ppd的tmax有所增加，说明arg(tos)-ppd减缓了ppd 的吸收速率；t
1/2
增加一倍，说明其药效时长延长；相比于ppd，arg(tos)-ppd代
谢得到的ppd的auc 有所提高，说明其生物利用度增加；综合来说，arg(tos)-ppd能够降低ppd的清除率，提高ppd的生物利用度，促进20(s)-原人参二醇的吸收。
[0198]
实验例3化合物lys(boc)-ppd的药代动力学研究。
[0199]
大鼠给药前随机分为空白对照组、ppd组、lys(boc)-ppd组，每组动物6只，给药前24h禁食，自由饮水，分别灌胃ppd、lys(boc)-ppd于对应大鼠，灌胃量按100mg/kg计算，空白组灌胃2ml生理盐水。分别于给药后20min、40min、1h、1.5h、2h、3h、4h、6h、8h、12h、24h眼眶取血至加有6μl(5000 u/ml)肝素的ep管中。所取血浆以3000r/min离心20min，吸取上清液150μl，保存至-20℃待测。
[0200]
上述待测样品用乙酸乙酯与水饱和正丁醇先后各萃取3次，乙酸乙酯和正丁醇萃取所得上清液分别用氮吹仪吹干。挥干的乙酸乙酯提取部分残渣用150μl的0.1mg/ml的f1内标溶液溶解，进样，记录质量色谱图及峰面积，采用内标法计算大鼠血浆中ppd及lys(boc)-ppd的血药浓度，应用masslnyx v4.1 软件对血浆样品进行质谱数据采集。
[0201]
建立了uplc-q/tof-ms体内定量方法，对大鼠给予不同时间点血浆样品进行定量分析。将ppd 及lys(boc)-ppd的峰面积与内标拟人参皂苷f1的峰面积比值代入标准工作曲线，计算血药浓度及平均血药浓度。
[0202]
本实验采用uplc-q/tof-ms结合pksolver软件进行lys(boc)-ppd药代动力学研究，药代动力学参数如下表所示。
[0203]
表3 lys(boc)-ppd药代动力学研究(n＝6，x
±
sd)*与对照组比较，p＜0.05；**与正常对照组比较，p＜0.01。
[0204]
结论：由表3可知，与ppd相比，lys(boc)-ppd的tmax增加较多，说明lys(boc)-ppd较大幅度的减缓了ppd的吸收速率；t
1/2
缩短一倍，说明其药效时长缩短；lys(boc)-ppd代谢得到的ppd的auc 大幅提高，说明其生物利用度增加；综合来说，lys(boc)-ppd能够降低ppd的清除率，提高ppd的生物利用度，促进20(s)-原人参二醇的吸收。
[0205]
实验例4化合物arg(tos)-ppd胶囊剂的制备。
[0206]
提供了衍生物arg(tos)-ppd为原料的胶囊剂，所述胶囊剂由胶囊填充物和胶囊壳组成，所述胶囊填充物包括重量比为2∶5的药物组合物和辅料，具体流程如下：(1)制粒：将arg(tos)-ppd原料药粉末用湿法混合制粒，以80％乙醇作为润湿剂制粒，润湿剂用量为粉末重量的40％，造粒3-5min，将湿颗粒过35目筛；(2)干燥：将湿颗粒置于65℃烘箱中干燥控制含水量≤6％；(3)整粒：将干颗粒再次整粒，过35目筛；(4)辅料添
加：添加辅料，按重量份数计，包括：微晶纤维素8份，微粉硅胶1份，硬脂酸钙2份；(5)胶囊填充：使用胶囊填充机填充胶囊，每粒填充50mg。