一种产反式橙花叔醇的解脂耶氏酵母基因工程菌及其构建方法和应用

文档序号:35065965发布日期:2023-08-09 05:34阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种产反式橙花叔醇的解脂耶氏酵母基因工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:先将解脂耶氏酵母内源的hmgr基因导入解脂耶氏酵母中,得到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-16;然后再将1个拷贝的优化的含有点突变的fanes1g498q基因导入解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-16中获得解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-18,其中,优化的含有点突变的fanes1g498q基因的序列如seq id no.1所示。

2.如权利要求1所述的构建方法,其特征在于,还包括:将解脂耶氏酵母内源的基因erg13、erg19、fanes1g498qlerg20整合到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-18中,得到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-19。

3.如权利要求2所述的构建方法,其特征在于,还包括将质粒pub4-cre转化到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-19中,获得解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-24。

4.如权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法还包括:将解脂耶氏酵母内源的cat2基因整合到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-24中,得到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-21。

5.如权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法还包括:将含有过氧化物酶体定位标签epts1的hmgr、erg13和erg19整合到工程菌株sbt02-21中,得到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-26,其中,过氧化物酶体定位标签epts1的序列如seq id no.4所示。

6.如权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述构建方法还包括:将含有过氧化物酶体定位标签epts1的erg8、erg12、idi和fanes1g498qlerg20整合到工程菌株sbt02-21中,得到解脂耶氏酵母基因工程菌sbt02-27,其中,过氧化物酶体定位标签epts1的序列如seq idno.4所示。

7.一种产反式橙花叔醇的解脂耶氏酵母基因工程菌,其特征在于,其采用如权利要求1-6任一项所述的构建方法构建获得。

8.一种如权利要求7所述的产反式橙花叔醇的解脂耶氏酵母基因工程菌在生产反式橙花叔醇中的应用。


技术总结
本发明公开了一种产反式橙花叔醇的解脂耶氏酵母基因工程菌的构建方法,包括如下步骤:先将解脂耶氏酵母内源的HMGR基因导入解脂耶氏酵母中,得到解脂耶氏酵母基因工程菌SBT02‑16;然后再将1个拷贝的优化的含有点突变的FaNES1G498Q基因导入解脂耶氏酵母基因工程菌SBT02‑16中获得解脂耶氏酵母基因工程菌SBT02‑18,其中,优化的含有点突变的FaNES1G498Q基因的序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了用上述的构建方法构建获得的解脂耶氏酵母基因工程菌及其在生产反式橙花叔醇中的应用。本发明的解脂耶氏酵母基因工程菌能极大幅度地提高反式橙花叔醇的产量。

技术研发人员:花强,刘顺成,刘枫,韦柳静,陈骏
受保护的技术使用者:华东理工大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/14
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