技术特征：
1.特异性结合人程序性死亡配体-1(pd-l1)的分离的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段的重链可变区和轻链可变区分别具有seq id no:3和seq id no:4所示序列，或者与seq id no:3和seq id no:4所示序列相比具有至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或更高一致性的序列。2.权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，其与人程序性死亡配体-1(pd-l1)结合的解离常数(kd)不大于2.1
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10-9
m，与食蟹猴程序性死亡配体-1(pd-l1)结合的解离常数(kd)不大于1.2
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10-9
m。3.权利要求1或2所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段为：(1)嵌合抗体或其片段；(2)人源化抗体或其片段；(3)全人源抗体或其片段。4.权利要求1-3任一项的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体包含人或鼠抗体igg1、igg2、igg3、igg4、iga、igm、ige或igd任何其中之一恒定区的序列；优选包含人或鼠抗体igg1、igg2、igg3或igg4的恒定区的序列。5.权利要求1-4任一项的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段选自f(ab)2、fab’、fab、fv、scfv、双特异抗体中的一种或多种。6.一种抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段与权利要求1-5任一项所述的抗体或抗原结合片段竞争性地结合pd-l1或其抗原表位，并且具备以下特性：1)特异性结合pd-l1重组蛋白及表达pd-l1的细胞；2)阻断pd-l1与pd-1蛋白的结合；3)抑制pd-1与细胞表面表达的pd-l1的结合；4)增强t细胞活性；或/和5)抑制肿瘤生长。7.根据权利要求1-6任一项所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段进一步还偶联有治疗剂或示踪剂；优选地，所述治疗剂选自放射性同位素、化疗药或免疫调节剂，所述示踪剂选自放射学造影剂、顺磁离子、金属、荧光标记、化学发光标记、超声造影剂或光敏剂。8.一种多特异性抗原结合分子，其特征在于，所述多特异性抗原结合分子包含第一抗原结合模块和第二抗原结合模块，所述第一抗原结合模块包含权利要求1-7任一项所述的抗体或抗原结合片段，所述第二抗原结合模块特异性结合pd-l1以外的其他抗原或结合与第一抗原结合模块不同的pd-l1抗原表位；优选地，所述其他抗原选自pd-1、tnfr2、ctla-4、lag-3、cd28、cd122、4-1bb、tim3、ox-40、ox40l、cd40、cd40l、light、icos、icosl、gitr、gitrl、tigit、cd27、vista、b7h3、b7h4、hevm、btla、cd47或cd73；优选地，所述多特异性抗体为“双特异性”、“三特异性”或“四特异性”。9.一种嵌合抗原受体(car)，其特征在于，所述嵌合抗原受体至少包含细胞外抗原结合结构域、跨膜结构域和胞内信号传导结构域，所述细胞外抗原结合结构域包含权利要求1-7任一项所述pd-l1抗体或抗原结合片段。
10.一种免疫效应细胞，其特征在于，所述免疫效应细胞包含权利要求9所述嵌合抗原受体或包含编码权利要求9所述嵌合抗原受体的核酸片段；优选地，所述免疫效应细胞选自t细胞、nk细胞(natural killer cell)、nkt细胞(natural killer t cell)、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞或肥大细胞；所述t细胞可选自炎性t细胞、细胞毒性t细胞、调节性t细胞(treg)或辅助性t细胞；优选地，所述免疫效应细胞为同种异体免疫效应细胞或自体免疫细胞。11.一种分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1-7任一项所述的抗体、抗原结合片段、或其任意组合，权利要求8所述的多特异性抗原结合分子或权利要求9所述的嵌合抗原受体。12.包含权利要求11所述分离的核酸分子的表达载体。13.包含权利要求11所述的分离的核酸分子、或权利要求12所述的表达载体的分离的宿主细胞；优选，所述宿主细胞是真核细胞或原核细胞；更优选，所述宿主细胞来源于哺乳动物细胞、酵母细胞、昆虫细胞、大肠杆菌和/或枯草杆菌；更优选，所述宿主细胞选自中国仓鼠卵巢细胞(cho)。14.一种制备权利要求1-7任一项所述抗体或抗原结合片段或权利要求8所述多特异性抗原结合分子的方法，其特征在于，在适当的条件下培养权利要求13所述的宿主细胞，并分离抗体或抗原结合片段或多特异性抗原结合分子。15.一种制备权利要求10所述免疫效应细胞的方法，其特征在于，所述方法包括将编码权利要求9所述car的核酸片段导入所述免疫效应细胞，可选地，所述方法还包括启动所述免疫效应细胞表达权利要求9所述car。16.一种药物组合物，其特征在于，所述组合物包含权利要求1-7任一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求8所述的多特异性抗原结合分子、权利要求9所述的嵌合抗原受体、权利要求10所述的免疫效应细胞、权利要求11的分离的核酸分子、权利要求12的表达载体、权利要求13的细胞，或权利要求14或15所述方法制备的产品；优选，所述组合物还包含药学上可接受的运载体(carrier)、稀释剂或助剂；优选，所述药物组合物还包含额外的抗肿瘤剂。17.权利要求1-7任一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求8所述的多特异性抗原结合分子、权利要求9所述的嵌合抗原受体、权利要求10所述的免疫效应细胞、权利要求11的分离的核酸分子、权利要求12的表达载体、权利要求13的细胞，权利要求14或15所述方法制备的产品、或权利要求16所述的药物组合物在制备预防和/或治疗pd-l1表达异常/或t细胞功能异常相关的疾病的药物中的用途，所述疾病优选肿瘤；优选，所述肿瘤选自淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、神经胶质瘤、乳腺癌、肺癌、骨癌、卵巢癌、膀胱癌、肾癌、肝癌、睾丸癌、唾液腺癌、甲状腺癌、胸腺癌、上皮癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、恶性血液病、头颈癌、胶质瘤、胃癌、鼻咽癌、喉癌、宫颈癌、子宫体癌和骨肉瘤。18.一种预防和/或治疗pd-l1表达异常和/或t细胞功能异常相关的疾病的方法，包含向有此需要的患者施用权利要求1-7任一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求8所述的多特异性抗原结合分子、权利要求9所述的嵌合抗原受体、权利要求10所述的免疫效应细胞、权利要求11的分离的核酸分子、权利要求12的表达载体、权利要求14或15所述方法制备的产品、或权利要求16所述的药物组合物；所述疾病优选肿瘤；
优选，所述肿瘤选自淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、神经胶质瘤、乳腺癌、肺癌、骨癌、卵巢癌、膀胱癌、肾癌、肝癌、睾丸癌、唾液腺癌、甲状腺癌、胸腺癌、上皮癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、恶性血液病、头颈癌、胶质瘤、胃癌、鼻咽癌、喉癌、宫颈癌、子宫体癌和骨肉瘤。19.权利要求1-7任一项所述的抗体或抗原结合片段、权利要求8所述的多特异性抗原结合分子、权利要求9所述的嵌合抗原受体、权利要求10所述的免疫效应细胞、权利要求11的分离的核酸分子、权利要求12的表达载体、权利要求13的细胞，权利要求14或15所述方法制备的产品、或权利要求16所述的药物组合物，其特征在于，用于和/或治疗肿瘤；优选，所述肿瘤选自淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、神经胶质瘤、乳腺癌、肺癌、骨癌、卵巢癌、膀胱癌、肾癌、肝癌、睾丸癌、唾液腺癌、甲状腺癌、胸腺癌、上皮癌、胰腺癌、结肠癌、直肠癌、恶性血液病、头颈癌、胶质瘤、胃癌、鼻咽癌、喉癌、宫颈癌、子宫体癌和骨肉瘤。20.一种试剂盒，其包含权利要求1-7任一项的抗体或其抗原结合片段、权利要求8所述的多特异性抗原结合分子、权利要求9所述的嵌合抗原受体、权利要求10所述的免疫效应细胞、权利要求11的分离的核酸分子、权利要求12的表达载体、权利要求13的细胞，权利要求14或15所述方法制备的产品、或权利要求16所述的药物组合物；任选地，还包含使用说明。
技术总结
本发明公开了特异性结合人程序性死亡配体-1(PD-L1)的抗体或抗原结合片段，所述抗体或抗原结合片段能够增强T细胞的功能，上调T细胞介导的免疫应答和用于治疗PD-L1表达异常相关和/或T细胞功能异常的疾病，例如肿瘤的用途。途。
技术研发人员：刘杨 邓婧 卢士强 曹卓晓 唐任宏 任晋生
受保护的技术使用者：江苏先声药业有限公司
技术研发日：2022.03.03
技术公布日：2022/10/13