技术特征：
1.1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物，其具有如下通式：其中：r1为苯基、取代苯基或杂环基，r2为eto基、氨基、苯胺基、取代苯胺基或杂环胺基，r3为苯基、取代苯基或杂环基，r4为苯基、取代苯基或杂环基。2.根据权利要求1所述的1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物，其特征在于，其为结构式为如下任意一种的化合物：
3.权利要求1所述1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物的制备方法，其特征在于，包括合成方法a和合成方法b；当r1为苯基、取代苯基或杂环基，r2为eto基，r4为苯基、取代苯基或杂环基时，1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物称为化合物a；当r1为苯基、取代苯基或杂环基，r2为氨基、苯胺基、取代苯胺基或杂环胺基，r4为苯基、取代苯基或杂环基时，1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物称为化合物b；
其中合成方法a用于合成化合物a，合成方法b用于合成化合物b该合成方法a为：以联烯酸酯和n-苯基苯并腙酰氯为原料，以碳酸钾为催化剂，以二氯甲烷为溶剂进行反应所制得；该合成方法b为：以联烯酸酯和n-苯基苯并腙酰氯为原料，以碳酸钾为催化剂，以二氯甲烷为溶剂进行反应，获得化合物a；再以化合物a为原料，氢氧化锂为催化剂，四氢呋喃水溶液为溶剂，得到水解产物a；然后将水解产物a和亚硫酰氯溶解在chcl3中，进行反应并浓缩；将浓缩液溶解在二氯甲烷中，并滴加三乙胺和胺类化合物的混合溶液进行反应后，得到化合物b；其中的胺类化合物为2-丙胺、乙醇胺、甘氨酸乙酯盐酸盐、苯丙氨酸乙酯盐酸盐、苯胺、4-甲基苯胺、4-氯-3-氟苯胺、3,5-二甲氧基苯胺、吗啉、1-甲基哌嗪或1-乙基哌嗪。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，合成方法a包括如下步骤：(1.1)将n-苯基苯并腙酰氯溶于二氯甲烷中，然后加入碳酸钾，再逐滴加入联烯酸酯，在氩气保护下，置于室温下反应6-10小时；(1.2)反应完成后，向反应液中加入去离子水，用乙酸乙酯萃取后，合并有机相，再使用去离子水洗涤；收集有机相，然后用无水硫酸钠对有机相进行脱水，获得脱水有机相；(1.3)在脱水有机相中加入硅胶，旋干溶剂制沙，获得第一旋干物，随后以石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂作为洗脱剂对第一旋干物进行柱层析梯度洗脱，收集检测到的所有产物的洗脱液，旋蒸脱除洗脱液中的混合溶剂后得到化合物a；合成方法b包括如下步骤：(2.1)将n-苯基苯并腙酰氯溶于二氯甲烷中，然后加入碳酸钾，再逐滴加入联烯酸酯，在氩气保护下，置于室温下反应6-10小时；(2.2)反应完成后，向反应液中加入去离子水，用乙酸乙酯萃取后，合并有机相，再使用去离子水洗涤3-5次；收集有机相，然后用无水硫酸钠对有机相进行脱水，获得脱水有机相；(2.3)在脱水有机相中加入硅胶，旋干溶剂制沙，获得第一旋干物，随后以石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂作为洗脱剂对第一旋干物进行柱层析梯度洗脱，收集检测到的所有产物的洗脱液，旋蒸脱除洗脱液中的混合溶剂后得到化合物a；(2.4)将1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物和氢氧化锂溶于四氢呋喃水溶液中，得到衍生物混合液，将衍生物混合液油浴锅中110℃加热回流，进行水解反应，用薄层色谱法监测反应，直至1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物全部反应；反应完成后，将四氢呋喃真空旋干，获得第二旋干物，在第二旋干物中加入稀盐酸调节ph至2，析出黄色固体，然后通过真空过滤收集产物并干燥以获得水解产物a；(2.5)将水解产物a和亚硫酰氯溶解在chcl3中，然后在80℃回流，当水解产物a被消耗完毕时，将混合物浓缩，得相应的酰氯化合物b；将酰氯化合物b溶解在二氯甲烷中，并向二氯甲烷中滴加三乙胺和胺类化合物的混合溶液，保持搅拌，在0℃及氩气保护下进行胺化反应，反应结束后，在反应混合物中加入硅胶，旋干溶剂制沙，获得第三旋干物，随后通过pe:ea＝5:1-1:1的柱色谱法对第三旋干物进
行纯化，得到化合物b。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1.1)和(2.1)中，反应时间均为6-10小时。6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(1.3)和(2.3)中，在石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂中，石油醚与乙酸乙酯体积比均为5:1；n-苯基苯并腙酰氯、联烯酸酯以及碳酸钾三者的摩尔比均为1：1：1.2。7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2.4)中，1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物与氢氧化锂的摩尔比为1：4；四氢呋喃水溶液中，四氢呋喃与水的体积比为1:1；稀盐酸的浓度3mol/l。8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤(2.5)中，水解产物a与亚硫酰氯的摩尔比为1：4，酰氯化合物b与胺类化合物的摩尔比为1：1；三乙胺的浓度为0.5mmol/ml。9.权利要求1或2所述的1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物在细胞活性分析中的应用。
技术总结
本发明公开了一种1,3,5-三取代-吡唑-4-羧酸衍生物。本申请还公开了该羧酸衍生物的制备方法和应用。本申请中的羧酸衍生物扩大了多取代吡唑衍生物的品种，为相应药物的选择提供了更大的选择范围。了更大的选择范围。
技术研发人员：周庆发 王玉琳 钟嘉诚 王碧川 汤玉姜 吴添枝
受保护的技术使用者：中国药科大学
技术研发日：2022.03.11
技术公布日：2022/6/1