技术特征：
1.一种高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌整合有编码重金属吸附融合蛋白的核苷酸序列，所述高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌通过所述的编码重金属吸附融合蛋白的核苷酸序列表达所述重金属吸附融合蛋白，所述重金属吸附融合蛋白为枯草芽孢杆菌cotx蛋白、重金属铅高效特异性结合多肽p
pb
、重金属镉高效特异性结合多肽p
cd
、重金属镍高效特异性结合多肽p
ni
和高效吸附多种重金属的组氨酸簇多肽p
his
的融合蛋白，所述枯草芽孢杆菌cotx蛋白的氨基酸序列如seq id no：2所示，所述重金属铅高效特异性结合多肽p
pb
的氨基酸序列如seq id no：4所示，所述重金属镉高效特异性结合多肽p
cd
的氨基酸序列如seq id no：6所示，所述重金属镍高效特异性结合多肽p
ni
的氨基酸序列如seq id no：8所示，所述高效吸附多种重金属的组氨酸簇多肽p
his
的氨基酸序列如seq id no：10所示。2.根据权利要求1所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，编码所述枯草芽孢杆菌cotx蛋白的核苷酸序列如seq id no：1所示，编码所述重金属铅高效特异性结合多肽p
pb
的核苷酸序列如seq id no：3所示，编码所述重金属镉高效特异性结合多肽p
cd
的核苷酸序列如seq id no：5所示，编码所述重金属镍高效特异性结合多肽p
ni
的核苷酸序列如seq id no：7所示，编码所述高效吸附多种重金属的组氨酸簇多肽p
his
的核苷酸序列如seq id no：9所示。3.根据权利要求1所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述重金属铅高效特异性结合多肽p
pb
的数目、所述重金属镉高效特异性结合多肽p
cd
的数目、所述重金属镍高效特异性结合多肽p
ni
的数目以及所述高效吸附多种重金属的组氨酸簇多肽p
his
的数目均为2个。4.根据权利要求1所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌cotx蛋白和所述重金属铅高效特异性结合多肽p
pb
通过刚性连接肽连接，所述重金属镉高效特异性结合多肽p
cd
和所述重金属镍高效特异性结合多肽p
ni
通过柔性连接肽连接。5.根据权利要求4所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述刚性连接肽为eaaak，所述刚性连接肽的数目为2个～5个，所述柔性连接肽为g4s，所述柔性连接肽的数目为2个～4个。6.根据权利要求1所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌还整合有枯草芽孢杆菌组成型强启动子p
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，所述枯草芽孢杆菌组成型强启动子p
hpaii
的核苷酸序列如seq id no：11所示，所述枯草芽孢杆菌组成型强启动子p
hpaii
位于所述的编码重金属吸附融合蛋白的核苷酸序列的上游。7.一种根据权利要求1～权利要求6中任一项所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将所述的编码重金属吸附融合蛋白的核苷酸序列克隆于质粒载体中，构建融合表达所述重金属吸附融合蛋白的整合性质粒；(2)对所述的融合表达所述重金属吸附融合蛋白的整合性质粒采用线性化酶酶切进行线性化并采用磷酸酶去掉5
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粘性末端后转入枯草芽孢杆菌感受态细胞中进行同源重组，筛选得到的阳性克隆即为所述高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌。8.根据权利要求7所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌的制备方法，其特征
在于，在所述步骤(1)中，所述质粒载体为pdl质粒。9.根据权利要求7所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌的制备方法，其特征在于，在所述步骤(2)中，所述线性化酶为pstⅰ限制性内切酶，所述磷酸酶为小牛肠碱性磷酸酶。10.根据权利要求1～权利要求6中任一项所述的高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌在重金属吸附钝化处理中的应用。
技术总结
本发明提供了一种高效吸附多种重金属重组枯草芽孢杆菌，其整合有编码重金属吸附融合蛋白的核苷酸序列，通过该核苷酸序列表达重金属吸附融合蛋白，重金属吸附融合蛋白为枯草芽孢杆菌CotX蛋白、重金属铅高效特异性结合多肽P
技术研发人员：孙爱友 孙冰 孙菁泽
受保护的技术使用者：两山生态科技（山东）有限公司
技术研发日：2022.03.25
技术公布日：2022/5/6