技术特征:
1.一种使用动物尸体制备基质胶的方法,其特征在于其步骤包括:(1)对动物尸体进行消毒处理;(2)去除动物尸体的皮肤和内脏,将其余剩余动物组织用液氮冷冻后粉碎;(3)抽提细胞外基质组分,使用硫酸铵沉淀细胞外基质组分;(4)重新溶解细胞外基质组分,离心,取上清液,上清液即为基质胶。2.根据权利要求1所述的使用动物尸体制备基质胶的方法,其特征在于步骤(3)中抽提细胞外基质组分具体指待液氮挥发完全后,在粉碎的动物组织中加入预冷的pbs溶液,4℃搅拌过夜,离心,弃沉淀,取上清。3.根据权利要求2所述的使用动物尸体制备基质胶的方法,其特征在于:步骤(3)中使用硫酸铵沉淀去除细胞外基质组分的杂质具体为在上清中缓慢添加饱和硫酸铵溶液,至体系中的硫酸铵浓度为10-30%,离心,取沉淀,即为细胞外基质组分。4.根据权利要求3所述的使用动物尸体制备基质胶的方法,其特征在于:步骤(4)具体为:将沉淀使用pbs溶解,离心去除不溶物,上清液即为基质胶。5.根据权利要求4所述的使用动物尸体制备基质胶的方法,其特征在于:步骤(4)中上清液再进行透析处理。6.根据权利要求1所述的使用动物尸体制备基质胶的方法,其特征在于:步骤(1)具体为将动物尸体使用75%乙醇浸泡1分钟以上。7.根据权利要求1所述的使用动物尸体制备基质胶的方法,其特征在于:还包括步骤(5):对上清液进行蛋白质定量,控制蛋白质浓度在2~30mg/ml。
技术总结
本发明公开了一种使用动物尸体制备基质胶的方法,其步骤包括:对动物尸体进行消毒处理;去除动物尸体的皮肤和内脏,将其余剩余动物组织用液氮冷冻后粉碎;抽提细胞外基质组分,使用硫酸铵沉淀细胞外基质组分;重新溶解细胞外基质组分,离心,取上清液,上清液即为基质胶。本发明方法可以用动物实验中剩下的动物尸体来制备基质胶,实现动物尸体的再利用。在基质胶产量要求大的时候,也可以饲养动物来制备基质胶。本发明方法取材方便,基质胶产量高,而且基质胶性能满足3D细胞培养要求。使用本发明方法,一只小鼠能得到约10mL基质胶,一只大鼠能制备得到50mL基质胶。鼠能制备得到50mL基质胶。鼠能制备得到50mL基质胶。
技术研发人员:滕以刚 杜君瑶 李晓迪
受保护的技术使用者:翌圣生物科技(上海)股份有限公司
技术研发日:2022.04.09
技术公布日:2022/7/29