技术特征：
1.一种重组酿酒酵母，其特征在于，所述重组酿酒酵母过表达柚皮素合成途径、脂肪酶和/或脂肪酸β氧化强化相关蛋白；所述重组酿酒酵母以酿酒酵母c800为宿主细胞；所述柚皮素合成途径包括矮牵牛来源的查尔酮合成酶chs，紫苜蓿来源的查尔酮异构酶chi和香芹菜来源的4-香桂酸:辅酶a连接酶4cl。2.根据权利要求1所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述查尔酮合成酶chs，查尔酮异构酶chi和4-香桂酸:辅酶a连接酶4cl氨基酸序列的genebank登录号分别为“aaf60297.1”，“p28012.1”，“p14912.1”。3.根据权利要求1所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述脂肪酶来源于短小芽孢杆菌(bacilluspumilus)、枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)、米曲霉(aspergillus oryzae)、米根霉(rhizopus oryzae)、解脂亚洛酵母(yarrowia lipolytica)或酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)。4.根据权利要求3所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述脂肪酶的氨基酸序列的genebank登录号分别为“afu81785.1”，“np_388152.1”，“xp_023093192.1”，“aaf32408.1”，“cab91111.1”，“np_014044.1”。5.根据权利要求1所述的重组酿酒酵母，其特征在于，所述脂肪酸β氧化强化相关蛋白包括脂酰辅酶a氧化酶fox1p，双功能的羟酰辅酶a脱氢酶/烯酰辅酶a水合酶fox2p或乙酰辅酶a酰基转移酶fox3p，所述脂肪酸β氧化强化相关蛋白的氨基酸序列的genebank登录号分别为“np_011310.1”，“np_012934.1”，“np_012106.1”。6.一种生产柚皮素的方法，其特征在于，所述方法为以油脂或脂肪酸为底物，利用权利要求1～5任一所述重组酿酒酵母进行柚皮素的合成。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述油脂包括棕榈油、椰子油、大豆油、玉米油、花生油、橄榄油和/或废弃油脂；所述脂肪酸包括肉豆蔻酸、硬脂酸、棕榈酸、棕榈油酸、油酸、亚油酸和/或亚麻酸。8.一种促进酿酒酵母合成柚皮素的方法，其特征在于，所述方法为酿酒酵母细胞中过表达柚皮素合成途径、脂肪酶和/或脂肪酸β氧化强化相关蛋白。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述柚皮素合成途径包括矮牵牛来源的查尔酮合成酶chs，紫苜蓿来源的查尔酮异构酶chi和香芹菜来源的4-香桂酸:辅酶a连接酶4cl；所述脂肪酶来源于短小芽孢杆菌(bacilluspumilus)、枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)、米曲霉(aspergillus oryzae)、米根霉(rhizopus oryzae)、解脂亚洛酵母(yarrowia lipolytica)或酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)；所述脂肪酸β氧化强化相关蛋白包括脂酰辅酶a氧化酶fox1p，双功能的羟酰辅酶a脱氢酶/烯酰辅酶a水合酶fox2p或乙酰辅酶a酰基转移酶fox3p。10.权利要求1～5任一所述重组酿酒酵母，或权利要求6或7所述生产柚皮素的方法，或权利要求8或9所述促进酿酒酵母合成柚皮素的方法在制备含有柚皮素的产品中的应用。
技术总结
本发明公开了一种基于脂肪酸和油脂促进柚皮素合成的方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过在柚皮素合成的底盘细胞中过表达脂肪酸β氧化过程的关键基因构建重组酿酒酵母，发现添加不同的脂肪酸对柚皮素的合成有一定的促进作用。通过在柚皮素合成的底盘细胞中分别过表达不同来源的脂肪酶，获得分别表达不同来源脂肪酶的重组酿酒酵母，发现在添加不同的油脂条件下，重组酿酒酵母菌株的柚皮素的产量有所提高。工业废油等含有甘油三酯的废弃油脂有潜力作为柚皮素合成细胞中添加的底物，因此，本研究所述的重组酿酒酵母为低成本的，绿色环保的工业化柚皮素的高效合成奠定基础。础。础。
技术研发人员：周景文 陈坚 张倩 余世琴 曾伟主 堵国成 高松
受保护的技术使用者：江南大学
技术研发日：2022.04.19
技术公布日：2022/8/30