4-磷酸羟基-L-苏氨酸脱氢酶PdxA突变体及其在制备维生素B6中的应用

文档序号:30519820发布日期:2022-06-25 04:33阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种4-磷酸羟基-l-苏氨酸脱氢酶pdxa的突变体,其特征在于,选自(1)-(30)中任一种:(1)seqidno.1中的第245位的p置换为c;(2)seqidno.1中的第136位的h置换为n;(3)seqidno.1中的第119位的g置换为c;(4)seqidno.1中的第214位的e置换为n;(5)seqidno.1中的第267位的d置换为l;(6)seqidno.1中的第285位的t置换为l;(7)seqidno.1中的第149位的v置换为l;(8)seqidno.1中的第151位的m置换为e,且第136位的h置换为n;(9)seqidno.1中的第165位的t置换为r,且第285位的t置换为l;(10)seqidno.1中的第149位的v置换为l,且第248位的t置换为l;(11)seqidno.1中的第149位的v置换为l,且第296位的d置换为i;(12)seqidno.1中的第151位的m置换为e,且第273位的l置换为c;(13)seqidno.1中的第151位的m置换为e,且第121位的v置换为l;(14)seqidno.1中的第160位的v置换为i,且第248位的t置换为c;(15)seqidno.1中的第133位的f置换为m,且第214位的e置换为n;(16)seqidno.1中的第212位的a置换为w;(17)seqidno.1中的第207位的g置换为a;(18)seqidno.1中的第317位的a置换为v;(19)seqidno.1中的第35位的v置换为i;(20)seqidno.1中的第164位的t置换为i,且第270位的l置换为e;(21)seqidno.1中的第151位的m置换为w,且第137位的t置换为f;(22)seqidno.1中的第294位的s置换为m,且第295位的v置换为i;(23)seqidno.1中的第212位的a置换为w,第206位的c置换为f,且第207位的g置换为a;(24)seqidno.1中的第294位的s置换为m,第295位的v置换为i,且第151位的m置换为w;(25)seqidno.1中的第294位的s置换为m,第295位的v置换为i,且第154位的a置换为l;(26)seqidno.1中的第294位的s置换为m,第295位的v置换为i,且第313位的s置换为w;(27)seqidno.1中的第151位的m置换为w,第137位的t置换为f,且第313位的s置换为w;(28)seqidno.1中的第285位的t置换为v,第151位的m置换为w,且第137位的t置换为f;(29)seqidno.1中的第212位的a置换为w,第206位的c置换为f,且第207位的g置换为a,且第35位的v置换为i;(30)seqidno.1中的第212位的a置换为w,第206位的c置换为f,且第207位的g置换
为a,且第323位的k置换为h。2.编码如权利要求1所述的4-磷酸羟基-l-苏氨酸脱氢酶突变体的核酸。3.如权利要求2所述的核酸,其特征在于,其核苷酸序列是在seqidno:3所示序列的基础变更而成的。4.含有如权利要求2或3所述的核酸的表达盒。5.含有如权利要求2或3所述的核酸的重组表达载体。6.含有如权利要求2或3所述的核酸或如权利要求4所述的表达盒或如权利要求5所述的重组表达载体的重组微生物。7.如权利要求6所述的重组微生物,其特征在于,其是大肠杆菌。8.如权利要求1所述的4-磷酸羟基-l-苏氨酸脱氢酶突变体,或如权利要求2或3所述的核酸,或如权利要求4所述的表达盒,或如权利要求5所述的重组表达载体,或如权利要求7所述的重组微生物在制备维生素b6中的应用。9.一种制备维生素b6的方法,其特征在于,包括培养如权利要求7所述的重组微生物,收集所产生的维生素b6。10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述的重组微生物是用分泌型重组表达载体转化的重组微生物,在培养后的发酵液中收集维生素b6。

技术总结
本发明公开一种4-磷酸羟基-L-苏氨酸脱氢酶PdxA突变体及其在制备维生素B6中的应用。本发明在野生型4-磷酸羟基-L-苏氨酸脱氢酶PdxA的基础上引入特定位点的突变,通过在大肠杆菌中过表达4-磷酸羟基-L-苏氨酸脱氢酶突变基因,其生产维生素B6的能力得到了提高,具有较大的应用推广价值。大的应用推广价值。大的应用推广价值。


技术研发人员:张大伟 刘林霞 王岩岩 李金龙 田治中
受保护的技术使用者:中国科学院天津工业生物技术研究所
技术研发日:2022.05.24
技术公布日:2022/6/24
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