技术特征：
1.一种嵌合抗原受体组合，其特征在于，其包含car il13ra2
分子、car gd2
分子和laco融合蛋白，所述car il13ra2
分子包含氨基酸序列如seq id no: 12所示的scfv il13ra2
，所述car gd2
分子包含氨基酸序列如seq id no: 9所示的scfv
gd2
，所述laco融合蛋白包含氨基酸序列如seq id no: 13所示的scfv cd40
。2.如权利要求1所述的嵌合抗原受体组合，其特征在于，所述car il13ra2
分子从n末端至c末端依次为：cd8信号肽、scfv il13ra2
、cd8铰链区、cd8穿膜区、胞内信号域4-1bb、cd3ζ区域；所述car gd2
分子从n末端至c末端依次为：cd8信号肽、scfv
gd2
、cd8铰链区、cd8穿膜区、胞内信号域4-1bb、cd3ζ区域。3. 如权利要求1或2所述的嵌合抗原受体组合，其特征在于，所述laco融合蛋白从n末端至c末端依次为cd8信号肽、scfv cd40
、cd8铰链区、cd28穿膜区和cd28胞内区。4. 一种嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，其由car il13ra2
分子、car gd2
分子和laco融合蛋白融合而成；所述car il13ra2
分子包含氨基酸序列如seq id no: 12所示的scfv il13ra2
，所述car gd2
分子包含氨基酸序列如seq id no: 9所示的scfv
gd2
，所述laco融合蛋白包含氨基酸序列如seq id no: 13所示的scfv cd40
。5. 如权利要求4所述的嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，所述car il13ra2
分子从n末端至c末端依次为：cd8信号肽、scfv il13ra2
、cd8铰链区、cd8穿膜区、胞内信号域4-1bb、cd3ζ区域；所述car gd2
分子从n末端至c末端依次为：cd8信号肽、scfv
gd2
、cd8铰链区、cd8穿膜区、胞内信号域4-1bb、cd3ζ区域。6. 如权利要求4或5所述的嵌合抗原受体融合蛋白，其特征在于，所述laco融合蛋白从n末端至c末端依次为cd8信号肽、scfv cd40
、cd8铰链区、cd28穿膜区和cd28胞内区。7.一种分离的核酸，其特征在于，其编码如权利要求1~3任一项所述的嵌合抗原受体组合或如权利要求4~6任一项所述的嵌合抗原受体融合蛋白。8.一种重组表达载体，其特征在于，其包含如权利要求7所述的分离的核酸。9.如权利要求8所述的重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体的骨架为慢病毒载体。10.一种转化体，其包含如权利要求8或9所述的重组表达载体；所述转化体的宿主细胞为真核细胞。11.一种基因修饰的细胞，其特征在于，其在底盘细胞中包含如权利要求1~3任一项所述的嵌合抗原受体组合或如权利要求4~6任一项所述的嵌合抗原受体融合蛋白，所述底盘细胞为人t细胞。12.一种嵌合抗原受体组合或嵌合抗原受体融合蛋白的制备方法，其包含以下步骤：培养如权利要求10所述的转化体，从培养物中获得所述嵌合抗原受体、嵌合抗原受体组合或嵌合抗原受体融合蛋白。13.一种药物组合物，其特征在于，其包含如权利要求1~3任一项所述的嵌合抗原受体组合或如权利要求4~6任一项所述的嵌合抗原受体融合蛋白，以及药学上可接受的载体。14. 如权利要求13所述的药物组合物，其特征在于，所述car
il13ra2
分子与所述car gd2
分子的质量比为(0.5~3):1，和/或，所述car
il13ra2
分子与所述laco融合蛋白的质量比为(0.5~3): 1。15.一种套装药盒，其包含药盒a和药盒b，其中：
所述药盒a包含如权利要求1~3任一项所述的嵌合抗原受体组合或如权利要求4~6任一项所述的嵌合抗原受体融合蛋白；所述药盒b含有其他抗肿瘤抗体或者包含所述其他抗肿瘤抗体的药物组合物，和/或由激素制剂、靶向小分子制剂、蛋白酶体抑制剂、成像剂、诊断剂、化疗剂、溶瘤药物、细胞毒性剂、细胞因子、共刺激分子的激活剂、抑制性分子的抑制剂以及疫苗组成的群组中的一种或多种。16.如权利要求1~3任一项所述的嵌合抗原受体组合、如权利要求4~6任一项所述的嵌合抗原受体融合蛋白、如权利要求11所述的基因修饰的细胞或如权利要求13或14所述的药物组合物在制备治疗、诊断和/或预防肿瘤的药物中的应用，所述肿瘤为il13ra2阳性和/或gd2阳性肿瘤。
技术总结
本发明公开了一种抗GD2抗体、含其的CAR、CAR组合及其应用。一种嵌合抗原受体组合，其包含CAR IL13RA2分子、CAR GD2分子和如SEQ ID NO:13所示的LACO融合蛋白，所述CAR IL13RA2分子包含氨基酸序列如SEQ ID NO:12所示的scFv IL13RA2，所述CAR GD2分子包含氨基酸序列如SEQ ID NO:9所示的scFvGD2。本发明提供的CAR组合可增强CAR-T细胞对IL13RA2高表达的神经胶质瘤细胞系的杀伤能力；且LACO融合蛋白引入到H08 CAR上后可促进H08 CAR-T的肿瘤清除能力，同时，CAR组合可破坏U87肿瘤细胞的异质性，避免肿瘤的逃逸。避免肿瘤的逃逸。避免肿瘤的逃逸。
技术研发人员：赵阳兵 刘晓军 訾振国
受保护的技术使用者：上海优替济生生物医药有限公司
技术研发日：2022.06.29
技术公布日：2022/7/28