技术特征：
1.一种订书肽，其特征在于，所述订书肽以ac-dphrllqqlvlsgnlikeavrrlhsr-nh2为肽链模板，其中3
h
、7
q
、19
a
和23
l
被s5替换并分别环合两次。2.一种如权利要求1所述的订书肽的应用，其特征在于，该订书肽用于制备治疗骨质疏松症的药物中。3.一种如权利要求1所述的订书肽的应用，其特征在于，该订书肽用于制备抑制破骨细胞分化的试剂中。4.一种制备如权利要求1所述的订书肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在缩合剂的作用下分别使c端首个氨基酸与固相载体偶联；(2)使用脱保护试剂脱去氨基酸上的fmoc保护基；(3)在缩合剂作用下连接下一个氨基酸；(4)重复进行脱保护-耦合操作，依照氨基酸序列合成肽链；其中，环合位点以s5分别替代i和i+4位氨基酸；(5)在环合剂作用下使i和i+4位s5氨基酸发生烯烃复分解反应，环合肽链；(6)重复进行脱保护-耦合操作，依照氨基酸序列合成肽链；其中，环合位点以s5分别替代i和i+4位氨基酸；(7)最后一个氨基酸脱保护后乙酰化；(8)在环合剂作用下使i和i+4位s5氨基酸发生烯烃复分解反应，二次环合肽链；(9)使用切割试剂将肽链从载体上切下，纯化后得相应订书肽。5.根据权利要求4所述的订书肽的制备方法，其特征在于，步骤(9)采用的纯化方法为反向高效液相色谱法，条件如下：色谱柱：ymc-pack ods-aq柱；流动相：流动相a为0.1％tfa/水，流动相b为0.1％tfa/乙腈；梯度洗脱程序：40％b洗脱0～5min，40％b～60％b、5～60min；流速为15ml/min，进样量为5ml，检测波长214nm。6.根据权利要求4所述的订书肽的制备方法，其特征在于，步骤(1)中采用的缩合剂为dic-oxyme缩合体系，活化剂为dic，以nmp为溶剂。7.根据权利要求4所述的订书肽的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述脱保护试剂为oxyme、哌啶及dmf的混合溶液，比例为71:2:4(m/v/v)。8.根据权利要求4所述的订书肽的制备方法，其特征在于，步骤(7)中，乙酰化试剂为吡啶与醋酸酐的混合液，投料比为1:1(v/v)。9.根据权利要求4所述的订书肽的制备方法，其特征在于，步骤(5)、步骤(8)中所述环合剂为grubbsⅰ试剂的二氯乙烷的溶液，投料比为树脂载样量:grubbsⅰ试剂:二氯乙烷＝0.3:58:6(mmol/mg/ml)。10.根据权利要求4所述的订书肽的制备方法，其特征在于，步骤(9)中，所述切割试剂为tips、h2o和tfa的混合溶液，体积比为2.5:2.5:95，所述切割试剂与直链肽的体积质量比为1:10ml/mg。
技术总结
发明涉及一种抑制破骨细胞分化的订书肽及其制备方法和应用。本发明以氨基树脂为载体，按照模板FRATtide：Ac-DPHRLLQQLVLSGNLIKEAVRRLHSR-NH2氨基酸序列在DIC-Oxime缩合体系中，通过Fmoc固相合成法，合成得到肽链，其间在保留关键氨基酸残基的基础上，于特定位置以S5代替原有氨基酸，连接在树脂上直链肽在GrubbsⅠ试剂的二氯乙烷溶液中进行烯烃复分解反应环合后从树脂上切下得到目标双订书肽。本发明的方法简单易行，纯度大，产率高。进一步的实验证实，本发明的双订书肽可显著抑制破骨细胞分化，在骨质疏松症等相关疾病治疗中具有潜在的应用价值。疾病治疗中具有潜在的应用价值。疾病治疗中具有潜在的应用价值。
技术研发人员：胡宏岗 丛薇 陈思 苏笠 何世鹏
受保护的技术使用者：上海大学绍兴研究院
技术研发日：2022.07.27
技术公布日：2022/11/15