技术特征：
1.一种酶促反应结晶制备高纯度头孢克洛的方法，其特征为该方法包括如下步骤：步骤(1)：将7-氨基-3-氯-头孢烯酸(7-acca)和d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐(pgme)加入到浓度为0.1～0.3mol/l、ph为6.0～6.5的磷酸盐缓冲液中，20～25℃、磁力搅拌下，加入青霉素g酰化酶(pga)，进行酶催化合成反应；其中，每1.0～1.5克7-氨基-3-氯-头孢烯酸加15～25毫升磷酸盐缓冲液；7-氨基-3-氯-头孢烯酸和d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐的摩尔比为1:1.2～1:1.6；每mmol7-氨基-3-氯-头孢烯酸加入220～300u青霉素g酰化酶；步骤(2)：当酶催化合成反应液中的头孢克洛的过饱和度为2.0～2.4时，再加入头孢克洛晶种进行反应结晶，搅拌下反应140～200min，反应结束后进行抽滤、干燥，得到头孢克洛产品；其中，每ml酶催化合成反应液加入0.004～0.006g的头孢克洛晶种。2.如权利要求1所述的酶促反应结晶制备高纯度头孢克洛的方法，其特征为所述的步骤(1)、(2)中酶催化反应中的搅拌速率为150～200r/min。3.如权利要求1所述的酶促反应结晶制备高纯度头孢克洛的方法，其特征为所述的头孢克洛晶种的纯度为99％。4.如权利要求1所述的酶促反应结晶制备高纯度头孢克洛的方法，其特征为步骤(2)中，在添加晶种后的搅拌反应过程中，还加入d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐溶液，d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐溶液的浓度为80～120mmol/l，添加的d-苯甘氨酸甲酯盐酸盐的质量是步骤(1)中7-氨基-3-氯-头孢烯酸质量的10～20％。
技术总结
本发明为一种酶促反应结晶制备高纯度头孢克洛的方法。该方法包括如下步骤：将7-氨基-3-氯-头孢烯酸和D-苯甘氨酸甲酯盐酸盐加入到磷酸盐缓冲液中，再加入青霉素G酰化酶(PGA)，进行酶催化合成反应；当酶催化合成反应液中的头孢克洛的过饱和度为2.0～2.4时，再加入头孢克洛晶种进行反应结晶，搅拌下反应140～200min，得到头孢克洛产品。本发明在解决酶法生产过程产物分解问题的同时，实现了酶促反应结晶一步制备出高纯度头孢克洛(纯度99％以上)。上)。上)。
技术研发人员：左雪丽 苏伟怡 杨春
受保护的技术使用者：河北工业大学
技术研发日：2022.08.08
技术公布日：2022/9/15