本发明属于分子生物学,更具体地,本发明涉及一种检测血液肿瘤融合基因的引物组、试剂盒和方法。
背景技术:
1、自1960年在慢性髓系白血病(cml)中发现了第一个融合基因bcr-abl1以来,融合基因的种类不断增加,尤其是随着近十年二代测序基础的广泛应用,不断有新的融合基因被发现。目前已知,超过95%的cml患者具有bcr-abl1融合基因,超过90%的apl患者具有pml-rara、zbtb16-rara等其他rara融合基因,超过35%的aml患者具有runx1-runxt1、cbfb-myh11等融合基因,超过50%的all患者具有etv6-runx1、bcr-abl1等融合基因,超过80%的滤泡性淋巴瘤患者中具有bcl2-igh融合基因等,在各类血液肿瘤中均发现了众多的融合基因。融合基因在血液肿瘤的诊断、预后、分层以及治疗中均起到重要作用。
2、血液肿瘤是一类具有高度异质性的疾病,其诊疗需要结合形态学、免疫学、遗传学和分子生物学进行综合分析。目前血液肿瘤融合基因检测的金标准是细胞遗传学方法核型分析和fish检测,然而,细胞遗传学检测局限性包括不能区分融合亚型,通量低,基因微缺失或涉及较小片段的基因融合无法识别等,依然存在患者未能准确分层,遭遇过度治疗或治疗不足的情况。因此分子水平的诊断对于血液肿瘤患者而言,能够通过基因分型检测提升诊疗精准度,进而实现准确的预后分层,是临床治愈率能否进一步提高的关键。
3、此外,荧光原位杂交(fish)技术检测融合基因,只能检测单基因或单对基因,检测效率低。且融合的分型对于临床治疗选择和预后判断的重要性日益凸显,融合基因检测“金标准”核型分析和fish检测不能区分融合亚型,rt-pcr检测常见融合型但只能区分主要亚型。核型分析和fish检测对技术要求高,依赖人工判读结果。
4、因此,非常有必要提供一种高效率地、可以对血液肿瘤融合基因的融合亚型进行准确分型的方法。
技术实现思路
1、基于此,本发明的目的在于提供一种检测血液肿瘤融合基因的引物组、试剂盒和方法。
2、实现上述发明目的的技术方案包括如下。
3、本发明的第一个方面,是提供了一种检测血液肿瘤融合基因的引物组,包括:
4、检测融合基因bcr-jak2的b1j19亚型的序列如seq id no.1所示的正向引物和序列如seq id no.2所示的反向引物;
5、检测融合基因etv6-jak2的e5j12亚型的序列如seq id no.3所示的正向引物和序列如seq id no.4所示的反向引物;
6、检测融合基因etv6-jak2的e5j19亚型的序列如seq id no.3所示的正向引物和序列如seq id no.2所示的反向引物;
7、检测融合基因etv6-jak2的e4j17亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.6所示的反向引物;
8、检测融合基因fus-erg的f6e11亚型和f7e11亚型的序列如seq id no.7所示的正向引物和序列如seq id no.8所示的反向引物;
9、检测融合基因fus-erg的f8e9亚型的序列如seq id no.9所示的正向引物和序列如seq id no.10所示的反向引物;
10、检测融合基因pax5-jak2的p5j19亚型的序列如seq id no.11所示的正向引物和序列如seq id no.2所示的反向引物;
11、检测融合基因ssbp2-jak2的s4j11亚型的序列如seq id no.12所示的正向引物和序列如seq id no.13所示的反向引物;
12、检测融合基因ssbp2-jak2的s5j11亚型的序列如seq id no.14所示的正向引物和序列如seq id no.13所示的反向引物;
13、检测融合基因tcf3-pbx1的t16p3亚型的序列如seq id no.15所示的正向引物和序列如seq id no.16所示的反向引物;
14、检测融合基因bcr-jak2的b1j17亚型的序列如seq id no.17所示的正向引物和序列如seq id no.6所示的反向引物;
15、检测融合基因bcr-jak2的b13j11亚型的序列如seq id no.18所示的正向引物和序列如seq id no.13所示的反向引物;
16、检测融合基因etv6-jak2的e4j16亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.19所示的反向引物;
17、检测融合基因fus-erg的f5e8亚型的序列如seq id no.20所示的正向引物和序列如seq id no.21所示的反向引物;
18、检测融合基因fus-erg的f6e11亚型的序列如seq id no.7所示的正向引物和序列如seq id no.8所示的反向引物;
19、检测融合基因fus-erg的f7e10亚型的序列如seq id no.7所示的正向引物和序列如seq id no.10所示的反向引物;
20、检测融合基因fus-erg的f7e8亚型的序列如seq id no.7所示的正向引物和序列如seq id no.21所示的反向引物;
21、检测融合基因ssbp2-jak2的s3j11亚型的序列如seq id no.22所示的正向引物和序列如seq id no.13所示的反向引物;
22、检测融合基因bcr-abl1的b13a3亚型的序列如seq id no.18所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
23、检测融合基因bcr-abl1的b14a3亚型的序列如seq id no.24所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
24、检测融合基因bcr-abl1的b18a2亚型的序列如seq id no.25所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
25、检测融合基因bcr-abl1的b18a3亚型的序列如seq id no.25所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
26、检测融合基因bcr-abl1的b19a2亚型的序列如seq id no.27所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
27、检测融合基因bcr-abl1的b19a3亚型的序列如seq id no.27所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
28、检测融合基因bcr-abl1的b1a3亚型的序列如seq id no.17所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
29、检测融合基因bcr-abl1的b6a2亚型的序列如seq id no.28所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
30、检测融合基因bcr-abl1的b6a3亚型的序列如seq id no.28所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
31、检测融合基因bcr-abl1的b8a2亚型的序列如seq id no.29所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
32、检测融合基因bcr-abl1的b8a3亚型的序列如seq id no.29所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
33、检测融合基因bcr-jak2的b13j11亚型的序列如seq id no.18所示的正向引物和序列如seq id no.13所示的反向引物;
34、检测融合基因bcr-jak2的b13j19亚型的序列如seq id no.18所示的正向引物和序列如seq id no.2所示的反向引物;
35、检测融合基因bcr-jak2的b1j11亚型的序列如seq id no.17所示的正向引物和序列如seq id no.13所示的反向引物;
36、检测融合基因bcr-pdgfra的b12p12亚型的序列如seq id no.30所示的正向引物和序列如seq id no.31所示的反向引物;
37、检测融合基因bcr-pdgfra的b7p12亚型的序列如seq id no.28所示的正向引物和序列如seq id no.31所示的反向引物;
38、检测融合基因cbfb-myh11的c4m28亚型的序列如seq id no.32所示的正向引物和序列如seq id no.33所示的反向引物;
39、检测融合基因cdk5rap2-pdgfra的c13p12亚型的序列如seq id no.34所示的正向引物和序列如seq id no.31所示的反向引物;
40、检测融合基因etv6-abl1的e4a2亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
41、检测融合基因etv6-abl1的e5a2亚型的序列如seq id no.3所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
42、检测融合基因etv6-jak2的e4j12亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.4所示的反向引物;
43、检测融合基因etv6-jak2的e4j19亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.2所示的反向引物;
44、检测融合基因etv6-jak2的e5j17亚型的序列如seq id no.3所示的正向引物和序列如seq id no.6所示的反向引物;
45、检测融合基因etv6-pdgfra的e6p12亚型的序列如seq id no.35所示的正向引物和序列如seq id no.31所示的反向引物;
46、检测融合基因etv6-pdgfra的e4p10亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.36所示的反向引物;
47、检测融合基因etv6-pdgfra的e4p11亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.37所示的反向引物;
48、检测融合基因etv6-pdgfra的e7p10亚型的序列如seq id no.38所示的正向引物和序列如seq id no.36所示的反向引物;
49、检测融合基因etv6-pdgfra的e7p11亚型的序列如seq id no.38所示的正向引物和序列如seq id no.37所示的反向引物;
50、检测融合基因fip1l1-pdgfra的f12p13亚型的序列如seq id no.39所示的正向引物和序列如seq id no.40所示的反向引物;
51、检测融合基因fip1l1-rara的f15r3亚型的序列如seq id no.41所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
52、检测融合基因fus-erg的f8e11亚型的序列如seq id no.9所示的正向引物和序列如seq id no.8所示的反向引物;
53、检测融合基因kif5b-pdgfra的k23p12亚型的序列如seq id no.43所示的正向引物和序列如seq id no.31所示的反向引物;
54、检测融合基因mll-aff1的m8a4亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.45所示的反向引物;
55、检测融合基因mll-aff4的m8a5亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.46所示的反向引物;
56、检测融合基因mll-aff4的m8a6亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.47所示的反向引物;
57、检测融合基因mll-aff4的m9a5亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.46所示的反向引物;
58、检测融合基因mll-aff4的m9a6亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.47所示的反向引物;
59、检测融合基因mll-ell的m7e2亚型的序列如seq id no.49所示的正向引物和序列如seq id no.50所示的反向引物;
60、检测融合基因mll-eps15的m10e12亚型的序列如seq id no.51所示的正向引物和序列如seq id no.52所示的反向引物;
61、检测融合基因mll-mllt1的m8m2亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.53所示的反向引物;
62、检测融合基因mll-mllt1的m8m4亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.54所示的反向引物;
63、检测融合基因mll-mllt1的m8m6亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.55所示的反向引物;
64、检测融合基因mll-mllt1的m8m7亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.56所示的反向引物;
65、检测融合基因mll-mllt10的m8m9亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.57所示的反向引物;
66、检测融合基因mll-mllt11的m8m2亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.58所示的反向引物;
67、检测融合基因mll-mllt11的m9m2亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.58所示的反向引物;
68、检测融合基因mll-mllt3的m7m6亚型的序列如seq id no.49所示的正向引物和序列如seq id no.59所示的反向引物;
69、检测融合基因mll-mllt3的m8m6亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.59所示的反向引物;
70、检测融合基因mll-mllt3的m8m7亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.60所示的反向引物;
71、检测融合基因mll-mllt3的m9m6亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.59所示的反向引物;
72、检测融合基因mll-mllt3的m9m7亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.60所示的反向引物;
73、检测融合基因mll-mllt4的m7m2亚型的序列如seq id no.49所示的正向引物和序列如seq id no.61所示的反向引物;
74、检测融合基因mll-mllt4的m8m2亚型的序列如seq id no.44所示的正向引物和序列如seq id no.61所示的反向引物;
75、检测融合基因mll-mllt4的m9m2亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.61所示的反向引物;
76、检测融合基因mll-mllt6的m7m11亚型的序列如seq id no.49所示的正向引物和序列如seq id no.62所示的反向引物;
77、检测融合基因mll-mllt6的m9m11亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.62所示的反向引物;
78、检测融合基因mll-sept6的m7s2亚型的序列如seq id no.49所示的正向引物和序列如seq id no.63所示的反向引物;
79、检测融合基因npm1-mlf1的n6m2亚型的序列如seq id no.64所示的正向引物和序列如seq id no.65所示的反向引物;
80、检测融合基因npm1-rara的n3r3亚型的序列如seq id no.66所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
81、检测融合基因numa-rara的n22r3亚型的序列如seq id no.67所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
82、检测融合基因nup214-abl1的n23a2亚型的序列如seq id no.68所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
83、检测融合基因nup214-abl1的n29a2亚型的序列如seq id no.69所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
84、检测融合基因nup214-abl1的n31a2亚型的序列如seq id no.70所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
85、检测融合基因nup214-abl1的n32a2亚型的序列如seq id no.71所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
86、检测融合基因nup214-abl1的n34a2亚型的序列如seq id no.72所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
87、检测融合基因nup98-hoxa11的n12h2亚型的序列如seq id no.73所示的正向引物和序列如seq id no.74所示的反向引物;
88、检测融合基因nup98-hoxa13的n11h2亚型的序列如seq id no.75所示的正向引物和序列如seq id no.76所示的反向引物;
89、检测融合基因nup98-hoxa13的n12h2亚型的序列如seq id no.73所示的正向引物和序列如seq id no.76所示的反向引物;
90、检测融合基因nup98-hoxa9的n11h2亚型的序列如seq id no.75所示的正向引物和序列如seq id no.77所示的反向引物;
91、检测融合基因nup98-hoxc11的n12h2亚型的序列如seq id no.73所示的正向引物和序列如seq id no.78所示的反向引物;
92、检测融合基因nup98-hoxd13的n12h2亚型的序列如seq id no.73所示的正向引物和序列如seq id no.79所示的反向引物;
93、检测融合基因nup98-mllt10的n11m15亚型的序列如seq id no.75所示的正向引物和序列如seq id no.80所示的反向引物;
94、检测融合基因nup98-prrx1的n12p2亚型的序列如seq id no.73所示的正向引物和序列如seq id no.81所示的反向引物;
95、检测融合基因picalm-mllt10的p17m10亚型的序列如seq id no.82所示的正向引物和序列如seq id no.83所示的反向引物;
96、检测融合基因picalm-mllt10的p17m4亚型的序列如seq id no.82所示的正向引物和序列如seq id no.84所示的反向引物;
97、检测融合基因picalm-mllt10的p17m9亚型的序列如seq id no.82所示的正向引物和序列如seq id no.57所示的反向引物;
98、检测融合基因picalm-mllt10的p18m10亚型的序列如seq id no.85所示的正向引物和序列如seq id no.83所示的反向引物;
99、检测融合基因picalm-mllt10的p18m4亚型的序列如seq id no.85所示的正向引物和序列如seq id no.84所示的反向引物;
100、检测融合基因picalm-mllt10的p18m9亚型的序列如seq id no.85所示的正向引物和序列如seq id no.57所示的反向引物;
101、检测融合基因picalm-mllt10的p19m10亚型的序列如seq id no.86所示的正向引物和序列如seq id no.83所示的反向引物;
102、检测融合基因picalm-mllt10的p19m4亚型的序列如seq id no.86所示的正向引物和序列如seq id no.84所示的反向引物;
103、检测融合基因picalm-mllt10的p19m9亚型的序列如seq id no.86所示的正向引物和序列如seq id no.57所示的反向引物;
104、检测融合基因pml-rara的p5r3亚型的序列如seq id no.87所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
105、检测融合基因prkar1a-rara的p2r3亚型的序列如seq id no.88所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
106、检测融合基因rcsd1-abl1的r2a4亚型的序列如seq id no.89所示的正向引物和序列如seq id no.90所示的反向引物;
107、检测融合基因rcsd1-abl1的r3a4亚型的序列如seq id no.91所示的正向引物和序列如seq id no.90所示的反向引物;
108、检测融合基因runx1-cbfa2t3的r3c2亚型的序列如seq id no.92所示的正向引物和序列如seq id no.93所示的反向引物;
109、检测融合基因runx1-cbfa2t3的r3c4亚型的序列如seq id no.92所示的正向引物和序列如seq id no.94所示的反向引物;
110、检测融合基因runx1-mecom的r3m2亚型的序列如seq id no.92所示的正向引物和序列如seq id no.95所示的反向引物;
111、检测融合基因runx1-rpl22的r3r2亚型的序列如seq id no.92所示的正向引物和序列如seq id no.96所示的反向引物;
112、检测融合基因runx1-runx1t1的r3r3亚型的序列如seq id no.92所示的正向引物和序列如seq id no.97所示的反向引物;
113、检测融合基因set-nup214的s7n18亚型的序列如seq id no.98所示的正向引物和序列如seq id no.99所示的反向引物;
114、检测融合基因snx2-abl1的s3a4亚型的序列如seq id no.100所示的正向引物和序列如seq id no.90所示的反向引物;
115、检测融合基因stat5b-rara的s15r3亚型的序列如seq id no.101所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
116、检测融合基因stil-tal1的s1t2亚型的序列如seq id no.102所示的正向引物和序列如seq id no.103所示的反向引物;
117、检测融合基因strn-pdgfra的s6p12亚型的序列如seq id no.104所示的正向引物和序列如seq id no.31所示的反向引物;
118、检测融合基因tcf3-hlf的t15h4亚型的序列如seq id no.105所示的正向引物和序列如seq id no.106所示的反向引物;
119、检测融合基因tcf3-hlf的t16h4亚型的序列如seq id no.15所示的正向引物和序列如seq id no.106所示的反向引物;
120、检测融合基因tcf3-pbx1的t16p5亚型的序列如seq id no.15所示的正向引物和序列如seq id no.107所示的反向引物;
121、检测融合基因tcf3-pbx1的t17p3亚型的序列如seq id no.108所示的正向引物和序列如seq id no.16所示的反向引物;
122、检测融合基因tcf3-pbx1的t17p5亚型的序列如seq id no.108所示的正向引物和序列如seq id no.107所示的反向引物;
123、检测融合基因zbtb16-rara的z3r3亚型的序列如seq id no.109所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
124、检测融合基因zbtb16-rara的z4r3亚型的序列如seq id no.110所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
125、检测融合基因zmiz1-abl1的z18a2亚型的序列如seq id no.111所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
126、检测融合基因bcr-abl1的b13a2亚型的序列如seq id no.18所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
127、检测融合基因bcr-abl1的b14a2亚型的序列如seq id no.24所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
128、检测融合基因bcr-abl1的b1a2亚型的序列如seq id no.17所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
129、检测融合基因cbfb-myh11的c5m28亚型的序列如seq id no.112所示的正向引物和序列如seq id no.33所示的反向引物;
130、检测融合基因cbfb-myh11的c5m29亚型的序列如seq id no.112所示的正向引物和序列如seq id no.113所示的反向引物;
131、检测融合基因cbfb-myh11的c5m33亚型的序列如seq id no.112所示的正向引物和序列如seq id no.114所示的反向引物;
132、检测融合基因dek-can_nup214的d9c18亚型的序列如seq id no.115所示的正向引物和序列如seq id no.99所示的反向引物;
133、检测融合基因pml-rara的p3r3亚型的序列如seq id no.116所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
134、检测融合基因pml-rara的p6r3亚型和p6r3.1亚型的序列如seq id no.117所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
135、检测融合基因cbfb-myh11的c5m12亚型的序列如seq id no.112所示的正向引物和序列如seq id no.118所示的反向引物;
136、检测融合基因cbfb-myh11的c5m8亚型的序列如seq id no.112所示的正向引物和序列如seq id no.119所示的反向引物;
137、检测融合基因etv6-runx1的e5r2亚型的序列如seq id no.3所示的正向引物和序列如seq id no.120所示的反向引物;
138、检测融合基因mll-aff1的m10a4亚型的序列如seq id no.51所示的正向引物和序列如seq id no.45所示的反向引物;
139、检测融合基因mll-aff1的m9a5亚型的序列如seq id no.48所示的正向引物和序列如seq id no.121所示的反向引物;
140、检测融合基因pml-rara的p6r3亚型的序列如seq id no.122所示的正向引物和序列如seq id no.42所示的反向引物;
141、检测融合基因tcf3-pbx1的t13p2亚型的序列如seq id no.123所示的正向引物和序列如seq id no.124所示的反向引物;
142、检测融合基因etv6-ntrk3的e4n15亚型的序列如seq id no.5所示的正向引物和序列如seq id no.125所示的反向引物;
143、检测融合基因etv6-ntrk3的e5n15亚型的序列如seq id no.3所示的正向引物和序列如seq id no.125所示的反向引物;
144、检测融合基因bcr-abl1的b12a2亚型的序列如seq id no.30所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
145、检测融合基因bcr-abl1的b12a3亚型的序列如seq id no.30所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
146、检测融合基因bcr-abl1的b20a2亚型的序列如seq id no.126所示的正向引物和序列如seq id no.26所示的反向引物;
147、检测融合基因bcr-abl1的b20a3亚型的序列如seq id no.126所示的正向引物和序列如seq id no.23所示的反向引物;
148、检测融合基因cbfb-myh11的c4m29亚型的序列如seq id no.32所示的正向引物和序列如seq id no.113所示的反向引物;
149、检测融合基因cbfb-myh11的c4m30亚型的序列如seq id no.32所示的正向引物和序列如seq id no.127所示的反向引物;
150、检测融合基因cbfb-myh11的c4m31亚型的序列如seq id no.32所示的正向引物和序列如seq id no.128所示的反向引物;
151、检测融合基因cbfb-myh11的c5m30亚型的序列如seq id no.112所示的正向引物和序列如seq id no.127所示的反向引物;
152、检测融合基因cbfb-myh11的c5m31亚型的序列如seq id no.112所示的正向引物和序列如seq id no.128所示的反向引物;
153、检测融合基因dek-nup214的d9n19亚型的序列如seq id no.115所示的正向引物和序列如seq id no.129所示的反向引物;
154、检测融合基因etv6-runx1_aml1的e5r3亚型的序列如seq id no.3所示的正向引物和序列如seq id no.130所示的反向引物;
155、检测融合基因mll_kmt2a-foxo4的m7f2亚型的序列如seq id no.49所示的正向引物和序列如seq id no.131所示的反向引物;
156、检测融合基因npm1-mlf1的n4m4亚型的序列如seq id no.132所示的正向引物和序列如seq id no.133所示的反向引物;
157、检测融合基因npm1-rara的n4r5亚型的序列如seq id no.132所示的正向引物和序列如seq id no.134所示的反向引物;
158、检测融合基因stil-tal1的s1t1亚型的序列如seq id no.102所示的正向引物和序列如seq id no.135所示的反向引物;
159、检测融合基因tcf3-hlf的t14h4亚型的序列如seq id no.136所示的正向引物和序列如seq id no.106所示的反向引物;
160、检测融合基因zbtb16-rara的z4r5亚型的序列如seq id no.110所示的正向引物和序列如seq id no.134所示的反向引物;
161、检测融合基因fus-erg的f6e9亚型的序列如seq id no.7所示的正向引物和序列如seq id no.10所示的反向引物;
162、检测融合基因mnx1-etv6的m1e2亚型的序列如seq id no.137所示的正向引物和序列如seq id no.138所示的反向引物;和,
163、检测融合基因mnx1-etv6的m1e3亚型的序列如seq id no.137所示的正向引物和序列如seq id no.139所示的反向引物。
164、本发明的第二个方面,是提供了一种检测血液肿瘤融合基因的试剂盒,所述试剂盒包括上述检测血液肿瘤融合基因的引物组。
165、本发明的第三个方面,是提供了一种检测血液肿瘤融合基因的方法,包括以下步骤:以待测样本的cdna为模板,采用上述试剂盒进行血液肿瘤融合基因的pcr扩增,对扩增产物进行末端修复后,连接特异性接头,再进行文库扩增,对文库进行上机测序。
166、在本发明中,针对62对血液肿瘤融合基因,设计并筛选目标基因扩增的特异性引物组,并通过优化多重pcr扩增体系中引物的浓度(使特异性引物组的每对引物扩增均一性达到一个理想的效果)和文库构建(基于扩增子建库方法,一步扩增靶向基因)的条件,基于ion genestudios5plus高通量测序平台进行测序,建立了检测血液肿瘤融合基因的方法,检测覆盖面广,可以同时检测多种基因融合,且检出的融合型均可区分亚型,提升了诊疗精准度。