1.一种重组逆转录病毒载体,其包含编码突变型整合酶的第一核酸序列和编码至少一个有效载荷的第二核酸序列,当与野生型整合酶相比时,所述突变型整合酶包含在催化核心结构域的mg2+结合基序中的至少一个突变;并且所述至少一个有效载荷包含抗原。
2.如权利要求1所述的重组逆转录病毒载体,其中所述突变型整合酶的逆转录病毒整合活性有缺陷。
3.如权利要求1所述的重组逆转录病毒载体,其中所述抗原包含病原体多肽或其片段或者癌症多肽或其片段。
4.如权利要求1所述的重组逆转录病毒载体,其中所述癌症多肽或其片段与癌细胞或肿瘤微环境相关。
5.如权利要求3所述的重组逆转录病毒载体,其中所述病原体多肽或其片段包含病毒多肽或其片段。
6.如权利要求3所述的重组逆转录病毒载体,其中所述病原体多肽或其片段包含细菌多肽或其片段。
7.如权利要求3所述的重组逆转录病毒载体,其中所述病原体多肽或其片段包含真菌多肽或其片段。
8.如权利要求3所述的重组逆转录病毒载体,其中所述病原体多肽或其片段包含原生生物多肽或其片段。
9.如权利要求3所述的重组逆转录病毒载体,其中所述病原体多肽或其片段包含原生动物多肽或其片段。
10.如权利要求5所述的重组逆转录病毒载体,其中所述病毒多肽或其片段包含冠状病毒多肽或其片段。
11.如权利要求10所述的重组逆转录病毒载体,其中所述冠状病毒多肽或其片段包含重症急性呼吸综合征(sars-cov)多肽或其片段、sars-cov-2多肽或其片段、或中东呼吸综合征(mers-cov)多肽或其片段。
12.如权利要求11所述的重组逆转录病毒载体,其中所述冠状病毒多肽或其片段包含所述sars-cov-2多肽或其片段。
13.如权利要求12所述的重组逆转录病毒载体,其中所述sars-cov-2多肽或其片段包含刺突蛋白或其片段。
14.如权利要求13所述的重组逆转录病毒载体,其中所述刺突蛋白或其片段是全长刺突蛋白。
15.如权利要求13所述的重组逆转录病毒载体,其中所述刺突蛋白或其片段是截短刺突蛋白。
16.如权利要求15所述的重组逆转录病毒载体,其中所述截短刺突蛋白包含所述刺突蛋白的n端结构域或所述刺突蛋白的s2结构域。
17.如权利要求16所述的重组逆转录病毒载体,其中所述截短刺突蛋白包含所述刺突蛋白的n端结构域和所述刺突蛋白的s2结构域。
18.如权利要求17所述的重组逆转录病毒载体,其中所述刺突蛋白或其片段是重组刺突蛋白。
19.如权利要求13-18中任一项所述的重组逆转录病毒载体,其中所述刺突蛋白或其片段包含至少一个修饰。
20.如权利要求19所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个修饰包含密码子优化。
21.如权利要求20所述的重组逆转录病毒载体,其中所述密码子优化优化或增加所述至少一个有效载荷在人细胞中的表达。
22.如权利要求19所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个修饰包含至少一个氨基酸突变。
23.如权利要求21所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个氨基酸突变消除所述刺突蛋白中的切割位点。
24.如权利要求23所述的重组逆转录病毒载体,其中所述切割位点是弗林蛋白酶切割位点。
25.如权利要求24所述的重组逆转录病毒载体,其中所述弗林蛋白酶切割位点包含seqid no:21或seq id no:22中的氨基酸残基682-685、氨基酸残基679-682或氨基酸残基811。
26.如权利要求25所述的重组逆转录病毒载体,其中所述切割位点是丝氨酸蛋白酶切割位点。
27.如权利要求26所述的重组逆转录病毒载体,其中所述丝氨酸蛋白酶切割位点包含seq id no:21或seq id no:22中的氨基酸残基986和987;或983和984。
28.如权利要求24所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个氨基酸突变包含seqid no:21或seq id no:22中在氨基酸残基814、889、896、939、682-685、679-682、811、986、987、983、984或其组合处的氨基酸替换。
29.如权利要求28所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个氨基酸突变包含seqid no:21或seq id no:22中在氨基酸残基814、889、896和939处的氨基酸替换。
30.如权利要求13-29中任一项所述的重组逆转录病毒载体,其中所述刺突蛋白或其片段包含信号肽。
31.如权利要求30所述的重组逆转录病毒载体,其中所述信号肽是分泌肽。
32.如权利要求30所述的重组逆转录病毒载体,其中所述信号肽包含seq id no:13的氨基酸序列:mdamkrglccvlllcgavf vsasqeiharfrr。
33.如权利要求31所述的重组逆转录病毒载体,其中所述分泌肽包含与ige fc受体α至少70%一致的氨基酸序列。
34.如权利要求5所述的重组逆转录病毒载体,其中所述病毒多肽或其片段包含流感多肽或其片段。
35.如权利要求34所述的重组逆转录病毒载体,其中所述流感多肽或其片段包含a型流感多肽或其片段、b型流感多肽或其片段、c型流感多肽或其片段、或d型流感多肽或其片段。
36.如权利要求35所述的重组逆转录病毒载体,其中所述流感多肽或其片段是所述a型流感多肽或其片段。
37.如权利要求36所述的重组逆转录病毒载体,其中所述a型流感多肽或其片段包含神经氨酸酶(na)或其片段或者血凝素(ha)或其片段。
38.如权利要求37所述的重组逆转录病毒载体,其中所述a型流感多肽或其片段包含所述血凝素(ha)或其片段。
39.如权利要求37所述的重组逆转录病毒载体,其中所述血凝素(ha)或其片段是全长血凝素(ha)。
40.如权利要求37所述的重组逆转录病毒载体,其中所述血凝素(ha)或其片段是截短血凝素(ha)。
41.如权利要求40所述的重组逆转录病毒载体,其中所述截短血凝素(ha)包含茎结构域。
42.如权利要求37所述的重组逆转录病毒载体,其中所述血凝素(ha)或其片段是重组血凝素(ha)。
43.如权利要求38-42中任一项所述的重组逆转录病毒载体,其中所述血凝素(ha)或其片段包含至少一个修饰。
44.如权利要求43所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个修饰包含密码子优化。
45.如权利要求44所述的重组逆转录病毒载体,其中所述密码子优化优化或增加所述至少一个有效载荷在人细胞中的表达。
46.如权利要求43所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个修饰包含至少一个氨基酸突变。
47.如权利要求43所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个修饰包含所述血凝素(ha)或其片段,所述血凝素(ha)或其片段包含a型流感的m2蛋白胞外结构域(m2e)的氨基酸序列:seq id no:14:mslltevetpirnewgcrcndssd。
48.如前述权利要求中任一项所述的重组逆转录病毒载体,其中所述重组逆转录病毒载体编码至少一个包膜蛋白。
49.如权利要求48所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个包膜蛋白包含至少一个α-病毒包膜蛋白。
50.如权利要求49所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个α-病毒包膜蛋白包含至少一个辛德比斯病毒包膜蛋白。
51.如权利要求50所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个辛德比斯病毒包膜蛋白包含e3蛋白、e2蛋白、6k蛋白、e1蛋白或其组合。
52.如权利要求51所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个辛德比斯病毒包膜蛋白包含至少一个突变。
53.如权利要求52所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个突变增加所述至少一个辛德比斯病毒包膜蛋白与人细胞之间的结合亲和力。
54.如权利要求53所述的重组逆转录病毒载体,其中所述人细胞是树突细胞。
55.如权利要求53或54所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个突变是所述e2蛋白的e160g。
56.如前述权利要求中任一项所述的重组逆转录病毒载体,其中所述催化核心结构域的所述mg2+结合基序中的至少一个突变包含d125a、d184a或其组合。
57.如前述权利要求中任一项所述的重组逆转录病毒载体,其中所述重组逆转录病毒载体包含至少一个经修饰的非翻译区域(utr)。
58.如权利要求57所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个经修饰的utr包含5’-utr。
59.如权利要求57所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个经修饰的utr包含3’-utr。
60.如权利要求57所述的重组逆转录病毒载体,其中所述至少一个经修饰的utr包含5’-utr和3’-utr。
61.一种重组病毒,其包含如前述权利要求中任一项所述的重组逆转录病毒载体。
62.如权利要求61所述的重组病毒,其中所述重组病毒是重组辛德比斯病毒。
63.如权利要求62所述的重组病毒,其中所述重组辛德比斯病毒包含所述e2蛋白的e160g突变。
64.一种细胞,其包含如权利要求1-60中任一项所述的重组逆转录病毒载体或如权利要求61-63中任一项所述的重组病毒。
65.如权利要求64所述的细胞,其中所述细胞表达所述至少一个有效载荷。
66.如权利要求64所述的细胞,其中所述细胞分泌所述至少一个有效载荷。
67.如权利要求64所述的细胞,其中所述细胞表达且分泌所述至少一个有效载荷。
68.如权利要求64所述的细胞,其中所述细胞表达所述至少一个有效载荷至少一天、至少三天、至少五天或至少九天。
69.如权利要求64所述的细胞,其中所述细胞分泌所述至少一个有效载荷至少一天、至少三天、至少五天或至少九天。
70.如权利要求64所述的细胞,其中所述细胞表达且分泌所述至少一个有效载荷至少一天、至少三天、至少五天或至少九天。
71.一种药物组合物,其包含如权利要求1-60中任一项所述的重组逆转录病毒载体、如权利要求61-63中任一项所述的重组病毒或如权利要求64-70中任一项所述的细胞。
72.如权利要求71所述的药物组合物,包含至少一种附加活性成分。
73.如权利要求72所述的药物组合物,其中所述至少一种附加活性成分包含佐剂。
74.如权利要求71所述的药物组合物,包含至少一种药学上可接受的赋形剂。
75.一种治疗或预防对象中疾病或病况的方法,其包括向所述对象施用如权利要求1-60中任一项所述的重组逆转录病毒载体、如权利要求61-63中任一项所述的重组病毒、如权利要求64-70中任一项所述的细胞、或如权利要求71-74中任一项所述的药物组合物,其中包含所述抗原的所述至少一个有效载荷诱导所述对象中的免疫应答,从而治疗或预防所述对象中的所述疾病或病况。
76.如权利要求75所述的方法,其中所述免疫应答包含靶向所述抗原的中和抗体的诱导,从而在所述对象中产生针对所述抗原的免疫。
77.如权利要求75所述的方法,其中所述免疫应答包含靶向所述抗原的免疫球蛋白抗体的诱导,从而在所述对象中产生针对所述抗原的免疫。
78.如权利要求77所述的方法,其中所述免疫球蛋白抗体包含igg抗体、igm抗体、iga抗体、igd抗体、ige抗体或其组合。
79.如权利要求78所述的方法,其中所述免疫球蛋白抗体包含igg抗体。
80.如权利要求75所述的方法,其中所述至少一个有效载荷在所述对象中表达至少一天、至少三天、至少五天或至少九天。
81.如权利要求75所述的方法,其中所述至少一个有效载荷在所述对象中分泌至少一天、至少三天、至少五天或至少九天。
82.如权利要求80所述的方法,其中相比于由表达少于一天、三天、五天或九天的可比的有效载荷诱导的免疫应答的持续时间,由表达至少一天、至少三天、至少五天或至少九天的所述至少一个有效载荷诱导的所述免疫应答的持续时间增加至少10%、至少20%、至少50%、至少100%、至少到5倍、至少到10倍或更多。
83.如权利要求81所述的方法,其中相比于由表达少于一天、三天、五天或九天的可比的有效载荷诱导的免疫应答的持续时间,由分泌至少一天、至少三天、至少五天或至少九天的所述至少一个有效载荷诱导的所述免疫应答的持续时间增加至少10%、至少20%、至少50%、至少100%、至少到5倍、至少到10倍或更多。
84.如权利要求75-83中任一项所述的方法,其中所述免疫应答在所述对象中持续至少三个月、至少四个月、至少五个月、至少六个月、至少12个月或更长。