1.一种诱导原代输卵管上皮细胞定向分化为纤毛细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述获取原代输卵管上皮细胞的方法包括:刮取输卵管内腔上皮细胞层,依次置于含胶原酶和dnaseⅰ的dmem/f12培养基中消化处理,然后收集细胞悬液,离心,得到原代输卵管上皮细胞。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述胶原酶选自胶原酶ⅰ、胶原酶ⅱ和胶原酶ⅳ中的至少一种,
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述细胞悬浮液中所述原代输卵管上皮细胞的细胞密度为6×102~8×102个细胞每微升。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养的温度均为37±2℃,所述培养过程中co2体积含量为4~6%。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤s2中,所述含血清的5mix培养基中所述血清为胎牛血清;
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤s4中,所述含雌激素的5mix培养基中所述雌激素的浓度为1~3ng/ml;
8.根据权利要求1~7任一项所述的方法,其特征在于,所述原代输卵管上皮细胞与所述卵泡液来源于同一种属。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤s4中,所述培养的过程中每2~3天更换一次新鲜培养基。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述5mix培养基中,所述b27添加剂的体积含量为1~3%;