一种芒草VIGS沉默体系及其应用

文档序号:34927684发布日期:2023-07-28 05:40阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种芒草vigs沉默体系及其应用,其特征在于,所述沉默体系包含如seq id no.1所示的基因序列。

2.根据权利要求1所述的一种芒草vigs沉默体系及其应用,其特征在于,所述沉默体系的构建方法按以下步骤进行:

3.根据权利要求1所述的一种芒草vigs沉默体系及其应用,其特征在于,所述vigs沉默体系的应用包含如下步骤:

4.根据权利要求3所述,其特征在于所述步骤(4)的种子为萌发的种子,芽长度为0-2mm。

5.根据权利要求3所述,其特征在于所述步骤(2)的混合液中添加了400μmol/l乙酰丁香酮、400mg/l半胱氨酸、5ml/l吐温20。

6.根据权利要求3所述,其特征在于步骤(5)中所述真空渗透法,抽真空时间为0-2小时,压力为-0.095mpa。

7.根据权利要求3所述,其特征在于所述种子无需灭菌操作,可直接进行侵染。

8.根据权利要求3所述,其特征在于步骤(7)所述幼苗的叶绿素含量显著降低。

9.根据权利要求3所述,其特征在于步骤(7)所述幼苗的mspds基因的表达量显著降低。

10.一种芒草vigs沉默体系及其应用,其特征在于,所述vigs沉默体系包含如下步骤:


技术总结
本发明的目的是为了提供一种沉默效率高的芒草VIGS基因沉默体系及其应用方法。本发明通过真空渗透法侵染萌发的芒草种子,经过共培养后,移入培养皿或土中光照培养,侵染后的种子产生的幼苗出现不同程度的白化现象,后期通过检测叶绿素含量,发现采用以上方法侵染的植株,其叶绿素含量显著降低,同时qPCR检测MsPDS基因的表达量,相比于对照,侵染后的芒草MsPDS基因表达量显著降低。本发明优化了影响VIGS基因沉默的效率的因素,建立了一套高效的芒草基因沉默体系,该体系沉默效率高,稳定性好,且可实现全株的基因沉默。

技术研发人员:李胜军,贺郭,胡瑞波,徐艳,赵旭红,王宇,代璐璐
受保护的技术使用者:中国科学院青岛生物能源与过程研究所
技术研发日:
技术公布日:2024/1/13
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