一种耐盐对硝基苯酚矿化菌株及其构建方法和应用

文档序号:35425018发布日期:2023-09-13 14:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种耐盐对硝基苯酚矿化菌株,其特征在于,所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株为基因组中upp基因缺失且插入强启动子和pnp矿化途径基因的渴望盐单胞菌(halomonascupida)j9菌株。

2.根据权利要求1所述的耐盐对硝基苯酚矿化菌株,其特征在于,所述强启动子包括p15或p8kt;所述p15的核苷酸序列如seq id no.1所示;所述p8kt的核苷酸序列如seq idno.2所示。

3.根据权利要求1所述的耐盐对硝基苯酚矿化菌株,其特征在于,所述pnp矿化途径基因包括pnpa、pnpb、pnpc、pnpd、pnpe和pnpf基因。

4.根据权利要求1所述的耐盐对硝基苯酚矿化菌株,其特征在于,所述渴望盐单胞菌j9菌株的基因组中还插入gfp基因。

5.权利要求1~4任一项所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株的构建方法,包括以下步骤:

6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,还包括利用所述pkju质粒载体,将gfp基因通过无痕基因编辑方法整合至h.cupidaj9u无痕基因编辑菌株的基因组中。

7.一种耐盐对硝基苯酚矿化菌株j9u-p8ktpnp或j9u-p15pnp,其特征在于,所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株j9u-p8ktpnp为基因组中upp基因缺失且插入强启动子p8kt和pnp矿化途径基因pnpa、pnpb、pnpc、pnpd、pnpe和pnpf以及插入启动子plac和gfp基因的渴望盐单胞菌j9菌株;

8.权利要求7所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株j9u-p8ktpnp或j9u-p15pnp的构建方法,所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株j9u-p8ktpnp的构建方法包括以下步骤:

9.权利要求1~4任一项所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株或权利要求5或6所述构建方法构建得到的耐盐对硝基苯酚矿化菌株或权利要求7所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株j9u-p8ktpnp或j9u-p15pnp或权利要求8所述构建方法构建得到的耐盐对硝基苯酚矿化菌株j9u-p8ktpnp或j9u-p15pnp在制备高盐浓度下降解pnp的产品中的应用。

10.内源性强启动子p15或外源性强启动子p8kt在构建耐盐对硝基苯酚矿化菌株中的应用;所述p15的核苷酸序列如seq id no.1所示,所述p8kt的核苷酸序列如seq id no.2所示。


技术总结
本发明属于基因工程菌构建技术领域,涉及一种耐盐对硝基苯酚矿化菌株及其构建方法和应用。本发明提供了一种耐盐对硝基苯酚矿化菌株,所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株为基因组中upp基因缺失且插入强启动子和PNP矿化途径基因的渴望盐单胞菌(Halomonascupida)J9菌株。本发明所述耐盐对硝基苯酚矿化菌株不仅能够高效修复PNP环境污染,而且对高盐极端环境胁迫有很好的耐受能力。

技术研发人员:刘瑞华,杨超,赵婉婉
受保护的技术使用者:南开大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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