一种生物合成人体结构性材料的制备方法与流程

文档序号:35577351发布日期:2023-09-24 19:44阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种重组iii型胶原蛋白,其特征在于,所述重组iii型胶原蛋白的氨基酸序列包含n个重复序列,n为大于等于1的整数;其中,所述重复序列为人天然iii型胶原蛋白的功能区序列;

2.根据权利要求1所述的重组iii型胶原蛋白,其特征在于,所述重组iii型胶原蛋白的氨基酸序列中包含能够通过tev蛋白酶切除的氨基酸序列,所述能够通过tev蛋白酶切除的氨基酸序列如seq id no.23所示;

3.一种编码权利要求2所述的重组iii型胶原蛋白的多核苷酸;

4.一种重组表达载体,其特征在于,所述重组表达载体包含如权利要求3所述的多核苷酸;

5.一种重组宿主细胞,其特征在于,所述重组宿主细胞包含权利要求4所述的重组表达载体;

6.权利要求1或2所述的重组iii型胶原蛋白的制备方法,其包括以下步骤:

7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,在所述s1步骤中,所述发酵培养在转速为200~240rpm、温度为35~38℃的摇床中进行;优选的,所述发酵培养在转速为220rpm、温度为37℃的摇床中进行。

8.根据权利要求6或7所述的制备方法,其特征在于,在所述s1步骤中,所述诱导蛋白表达的具体操作为:在放大培养的菌液中添加iptg并降温至16℃;优选的,所述iptg的终浓度为0.3~0.7mm;更优选的,所述iptg的终浓度为0.5mm。

9.根据权利要求6~8中任一项所述的制备方法,在所述s2步骤中,所述收集所述蛋白的具体操作为:将s1步骤所得到的菌体用含有20-30mm tris、150~250mm氯化钠和15~25mm咪唑的平衡工作液重悬,将菌液温度降温至4~15℃,高压均质后于4℃环境下15000~18000rpm离心20~40min。

10.权利要求1或2所述的重组iii型胶原蛋白在制备产品中的用途,所述产品包括医疗器械、化妆品、保健品或药物。


技术总结
本发明涉及一种生物合成人体结构性材料的制备方法。本发明提供了一种重组III型胶原蛋白,其特征在于,所述重组III型胶原蛋白的氨基酸序列包含n个重复序列,n为大于等于1的整数;其中,所述重复序列为人天然III型胶原蛋白的功能区序列。本发明提供的重组III型胶原蛋白具有更高的细胞黏附效果。同时,本发明提供的重组III型胶原蛋白制备方法简单,在低成本下即可获得较高产量的重组III型胶原蛋白。

技术研发人员:王玲玲,何振瑞,张永健,张国梁,赵雪
受保护的技术使用者:山西锦波生物医药股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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