一种胞内蛋白递送和核酸转染的通用型聚合物载体

文档序号:35916554发布日期:2023-10-30 09:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种胞内蛋白递送和核酸转染的通用型聚合物载体,其特征在于,所述通用型聚合物载体包括两种结构,其一由中性聚合物、阳离子聚电解质和苯硼酸功能基团组成,如式ⅰ所示,所述阳离子聚电解质和苯硼酸功能基团通过可逆加成-断裂链转移连接在中性聚合物上;其二由阳离子聚电解质和苯硼酸功能基团组成,如式ⅱ所示:

2.根据权利要求1所述的通用型聚合物载体,其特征在于,所述中性聚合物选自聚乙二醇、聚乙二醇单甲醚、聚乙烯、聚四氟乙烯、聚2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱、聚甲基丙烯酰乙基磺基甜菜碱、聚3-[[2-(甲基丙烯酰氧)乙基]二甲基铵]丙酸酯和聚3-[(3-丙烯酰胺基丙基)二甲基铵]丙酸盐中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的通用型聚合物载体,其特征在于,所述阳离子聚电解质结构如式ⅲ所示:

4.根据权利要求1所述的通用型聚合物载体,其特征在于,所述苯硼酸功能基团的结构如式ⅳ-ⅵ所示:

5.根据权利要求1所述的通用型聚合物载体,其特征在于,所述通用型聚合物载体的链长范围在20-267之间。

6.一种胞内蛋白递送和核酸转染的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:

7.根据权利要求6所述的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中的中性聚合物-链转移剂的制备步骤如下:称取一定量的中性聚合物、链转移剂和4-二甲基氨基吡啶搅拌溶解,再加入n,n-二环己基碳二亚胺,充分混合搅拌,反应后得到粗产物,经过滤、沉淀和烘干后,得到中性聚合物-链转移剂。

8.根据权利要求6所述的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,所述链转移剂选自甲基(苯基)氨基二硫代甲酸氰甲酯、s-氰甲基-s-十二基三硫代碳酸盐、二硫代苯甲酸氰基异丙酯、4-氰基-4-(硫代苯甲酰)戊酸、s-(2-氰基-2-丙基)-s-十二烷基三硫代羰基酯、4-氰基-4-[[(十二烷硫基)硫酮甲基]硫基]戊酸和2-(十二烷基三硫代碳酸酯基)-2-甲基丙酸中的一种或多种。

9.根据权利要求6所述的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,所述阳离子聚电解质的物质的量为0.001-100mmol;所述苯硼酸功能基团的物质的量为0.001-100mmol;所述引发剂的添加量为阳离子聚电解质与苯硼酸功能基团的质量之和的0.1-10wt%。

10.根据权利要求6所述的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,所述引发剂为光引发剂或热引发剂,所述热引发剂选自偶氮二异丁腈和过硫酸盐中的一种;所述光引发剂选自2-羟基-2-甲基-1-苯基-1-丙酮、2-羟基-4'-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮、苯基-2,4,6-三甲基苯甲酰基次膦酸锂中的一种。

11.根据权利要求10所述的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)为光引发剂在紫外灯光照下引发聚合1-12小时。

12.根据权利要求10所述的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)为热引发剂在60-80℃下引发聚合1-24小时。

13.根据权利要求6所述的通用型聚合物载体的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中使用去离子水超滤、离心或透析除去粗产物中的引发剂、未反应的阳离子聚电解质和苯硼酸功能基团。

14.权利要求1-6中任一通用型聚合物载体的应用,其特征在于,用于向细胞中递送蛋白和转染核酸。

15.根据权利要求14所述的通用型聚合物载体的应用,其特征在于,所述细胞选自hela细胞、人脐静脉内皮细胞、人肝癌细胞、非洲绿猴肾成纤维细胞、人肺癌细胞、小鼠胚胎成纤维细胞和人乳腺癌细胞中的一种。

16.根据权利要求14所述的通用型聚合物载体的应用,其特征在于,所述蛋白选自胃蛋白酶、牛血清白蛋白、β-半乳糖苷酶、辣根过氧化物酶、细胞色素c和溶菌酶中的一种;所述核酸选自小干扰rna、信使rna、和质粒中的一种。


技术总结
本发明公开了一种胞内蛋白递送和核酸转染的通用型聚合物载体,所述通用型聚合物载体包括两种结构,其一由中性聚合物、阳离子聚电解质和苯硼酸功能基团组成,所述阳离子聚电解质和苯硼酸功能基团通过可逆加成‑断裂链转移连接在中性聚合物上;其二由阳离子聚电解质和苯硼酸功能基团组成。所述通用型聚合物载体可以高效负载多种蛋白质药物分子和核酸分子,通用性好,同时能有效保持蛋白质和核酸的结构和生物活性,递送效率高、细胞毒性低、操作便捷,性能明显优于市售转染试剂。

技术研发人员:王俊有,田畅,赵洪阳,李灵姝,马丁·A·科恩·斯图尔特
受保护的技术使用者:华东理工大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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