1.一种edar基因pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育预测评价试剂盒中的应用,其特征在于,包括以下工作步骤:
2.根据权利要求1所述的edar基因pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育预测评价试剂盒中的应用,其特征在于,所述第一步中还包括:
3.根据权利要求2所述的edar基因pva1370ala突变检测试剂在胸腺发育预测评价试剂盒中的应用方法,其特征在于,所述第一步中还包括:所述试剂盒包括微滴式数字pcr用反应预混液、热启动taq酶、sdh2o;其中,反应混合物包括:mgcl2 7.5mm,tris-hcl buffer125mm,kcl 125mm,dntps 7.5mm,bsa 2mg/ml。
4.根据权利要求2所述的edar基因pva1370ala突变检测试剂在胸腺发育预测评价试剂盒中的应用方法,其特征在于,所述dna用qubit3.0定量,按照测试信息用无核酶水稀释至指定浓度;取出反应预混液(微滴式数字pcr用反应预混液),室温放置2分钟;准备样本制备通用耗材,可穿刺热封膜,在8连管中配制pcr反应体系,反应终浓度引物/探针900nm/500nm;通过旋涡振荡混匀pcr反应混合液,用离心机快速离心,以确保所有成分都在反应管的底部,让反应管在室温下静置3分钟。
5.根据权利要求1所述的edar基因pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育预测评价试剂盒中的应用,其特征在于,所述第二步还具体的包括:
6.根据权利要求5所述的edar pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育预测评价试剂盒中的应用,其特征在于,所述c中,微滴为45-55μl。
7.根据权利要求5所述的edar pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育评价试剂盒中的应用方法,其特征在于,所述a中,在各样本孔水相上方加入5μl密封剂。
8.根据权利要求5所述的edar pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育预测评价试剂盒中的应用方法,其特征在于,所述f中,pcr结束前10min打开微滴检测仪。
9.根据权利要求5所述的edar pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育预测评价试剂盒中的应用方法,其特征在于,所述d中,封好膜之后应于30分钟内进行pcr扩增。
10.根据权利要求5所述的edar pva1370ala突变检测试剂在制备胸腺发育预测评价试剂盒中的应用方法,其特征在于,所述d中,设置封膜仪温度为190℃,封膜时间为5s。