1.一种利用呼吸作用相关基因表达量评估不同酵母高代数应用能力的方法,其特征在于,通过对选育过程中的啤酒酵母在发酵特定时间点的呼吸作用相关基因表达量及其上游调控基因的表达量进行计算并进行差异显著性分析,以从基因表达层面评估酵母高代数应用能力。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述呼吸作用相关基因选自qcr7、cyc1和cox1,所述上游调控基因为rox1。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,分别设计呼吸作用相关基因及其上游调控基因的特异性引物,具体为:qcr7-f如seq id no.1所示,qcr7-r如seq id no.2所示,cyc1-f如seq id no.3所示,cyc1-r如seq id no.4所示,cox1-f如seq id no.5所示,cox1-r如seq id no.6所示,rox1-f如seq id no.7所示,rox1-r如seq id no.8所示。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述特异性引物本身为20bp±3bp,pcr产物长度为100-200bp,tm值为50-65℃,且上下游引物tm值相差不超过1℃。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,通过对选育过程中的啤酒酵母在发酵特定时间点的呼吸作用相关基因表达量及其上游调控基因的表达量进行计算并进行差异显著性分析具体为:
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,发酵时间为4天。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,qpcr反应体系包括:10μl tb greenpremix taq 2x、0.4μl forward primer 10μm、0.4μl reverse primer 10μm、2μl dna模板(<100ng)、7.2μl灭菌水,共计20μl;
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所用酵母样品采用的发酵与传代方法具体为:
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,ypd培养基包括酵母提取物1%、蛋白胨2%、葡萄糖2%。