一种利用呼吸作用相关基因表达量评估不同酵母高代数应用能力的方法与流程

文档序号:37011015发布日期:2024-02-09 12:59阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种利用呼吸作用相关基因表达量评估不同酵母高代数应用能力的方法,其特征在于,通过对选育过程中的啤酒酵母在发酵特定时间点的呼吸作用相关基因表达量及其上游调控基因的表达量进行计算并进行差异显著性分析,以从基因表达层面评估酵母高代数应用能力。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述呼吸作用相关基因选自qcr7、cyc1和cox1,所述上游调控基因为rox1。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,分别设计呼吸作用相关基因及其上游调控基因的特异性引物,具体为:qcr7-f如seq id no.1所示,qcr7-r如seq id no.2所示,cyc1-f如seq id no.3所示,cyc1-r如seq id no.4所示,cox1-f如seq id no.5所示,cox1-r如seq id no.6所示,rox1-f如seq id no.7所示,rox1-r如seq id no.8所示。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述特异性引物本身为20bp±3bp,pcr产物长度为100-200bp,tm值为50-65℃,且上下游引物tm值相差不超过1℃。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法,其特征在于,通过对选育过程中的啤酒酵母在发酵特定时间点的呼吸作用相关基因表达量及其上游调控基因的表达量进行计算并进行差异显著性分析具体为:

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,发酵时间为4天。

7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,qpcr反应体系包括:10μl tb greenpremix taq 2x、0.4μl forward primer 10μm、0.4μl reverse primer 10μm、2μl dna模板(<100ng)、7.2μl灭菌水,共计20μl;

8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所用酵母样品采用的发酵与传代方法具体为:

9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,ypd培养基包括酵母提取物1%、蛋白胨2%、葡萄糖2%。


技术总结
本发明提供了一种利用呼吸作用相关基因表达量评估不同酵母高代数应用能力的方法,属于啤酒酵母性能评估技术领域。本发明通过对选育过程中的啤酒酵母在发酵特定时间点的呼吸作用相关基因表达量及其上游调控基因的表达量的对比及差异显著性分析,可实现在选育阶段提前评估酵母高代数应用能力,而不是在生产中进行高代数生产实验,提升选育效率,节约时间和成本,有效解决了从基因表达层面评估酵母高代数基因组稳定性乃至高代数应用的问题。

技术研发人员:徐楠,侯晓平,贺扬,余俊红,赵玉祥,万秀娟,陈嵘,吴杰
受保护的技术使用者:青岛啤酒股份有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/2/8
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