一种从头合成羟基酪醇的菌株及其应用

文档序号:41375502发布日期:2025-03-21 15:30阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种重组大肠杆菌,其特征在于,以大肠杆菌ymgrh1d1为宿主细胞,敲除基因ptsg后表达了来源于大肠杆菌的葡糖激酶glk,所述大肠杆菌ymgrh1d1的菌种保藏号为cctcc no:m2019390。

2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌,其特征在于,所述葡糖激酶的氨基酸序列如seq id no.1所示。

3.一种构建权利要求1或2所述重组大肠杆菌的方法,其特征在于,所述方法是将葡糖激酶基因glk插入表达载体中,并转化至敲除了基因ptsg的大肠杆菌ymgrh1d1中,获得所述重组大肠杆菌。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述glk基因的gene id为946858。

6.一种生产羟基酪醇的方法,其特征在于,所述方法为采用权利要求1或2所述的重组大肠杆菌发酵生产羟基酪醇。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述方法为将所述重组大肠杆菌接种至种子培养基中培养,制备得到种子液;将种子液接种至发酵培养基中,发酵制备羟基酪醇。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,将所述重组大肠杆菌接种至lb固体培养基上培养,得到单菌落,挑取单菌落接种于lb液体培养基中,于36~38℃、180-220r/min条件下培养10~12h,制备得到种子液。

9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于,将种子液接种至lb液体培养基中,在36~38℃、180-220r/min条件下培养8~10h后收集菌体;将收集得到的菌体接种至m9y液体培养基中进行发酵培养,制备得到羟基酪醇。

10.权利要求1或2所述的重组大肠杆菌、权利要求3~5任一项所述的方法或权利要求6~9任一项所述的方法在制备羟基酪醇及含有羟基酪醇的产品中的应用。


技术总结
本发明公开了一种从头合成羟基酪醇的菌株及其应用,属于生物技术领域。本发明提供的重组大肠杆菌E.coli HTΔ‑glk能够实现将葡萄糖和甘油转化为羟基酪醇,生产羟基酪醇的产量可高达4.27g/L,是采用YMGRH1D1发酵生产羟基酪醇的产量的3.62倍,并且在发酵过程中无需添加诱导剂;因此本发明的原材料廉价易得,无危害人体健康的添加剂、重金属和抗生素,为后期的产物提纯奠定良好的基础,更能够达到商业应用的要求。

技术研发人员:陈献忠,是徐蕾,夏媛媛,李彩美,华月婷,沈微,杨海泉,周丽
受保护的技术使用者:江南大学
技术研发日:
技术公布日:2025/3/20
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