到混合物M5 ;
[0042] (6)将所述混合物M5第二冷却至25°C，过滤制得制霉菌素Al。该制霉菌素的纯度 (w)如表1所示。
[0043] 实施例2
[0044](1)在25°C下，将异丙醇加入诺尔斯链霉菌发酵液中（体积比为100 :45)，萃取3h 后取上层液体得到萃取液Ml;
[0045] (2)在100°C下，蒸发萃取液Mllh以制得沉淀物M2 ;
[0046] (3)在35°C下，将沉淀物M2置于33重量％的丙酮溶液（质量比为100 :250)中热 处理60min制得混合物M3 ;
[0047] (4)将混合物M3在15°C下第一冷却30min，取上清液并过滤得到沉淀物M4 ;
[0048] (5)在50°C下，将沉淀物M4置于5重量％的焦磷酸钾的异丁醇溶液（质量比为 100 :150)中加热80min制浆得到混合物M5 ;
[0049] (6)将所述混合物M5第二冷却至25°C，过滤制得制霉菌素A2。该制霉菌素的纯度 (w)如表1所示。
[0050] 实施例3
[0051] (1)在40°C下，将异丙醇加入诺尔斯链霉菌发酵液中（体积比为100 :55)，萃取Ih 后取上层液体得到萃取液Ml;
[0052] (2)在120°C下，蒸发萃取液M12h以制得沉淀物M2 ;
[0053] (3)在45°C下，将沉淀物M2置于55重量％的丙酮溶液（质量比为100 :350)中热 处理30min制得混合物M3 ;
[0054] (4)将混合物M3在25°C下第一冷却60min，取上清液并过滤得到沉淀物M4 ;
[0055] (5)在70°C下，将沉淀物M4置于15重量％的焦磷酸钾的异丁醇溶液（质量比为 100 :250)中加热40min制浆得到混合物M5 ;
[0056](6)将所述混合物M5第二冷却至25°C，过滤制得制霉菌素A3。该制霉菌素的纯度 (w)如表1所示。
[0057] 对比例1
[0058] 按照实施例1的方法进行制得制霉菌素B1，不同的是，未进行步骤（1)中的萃取。 该制霉菌素的纯度（w)如表1所示。
[0059] 对比例2
[0060] 按照实施例1的方法进行制得制霉菌素B2,不同的是，在步骤（3)中未使用丙酮溶 液处理。该制霉菌素的纯度（W)如表1所示。
[0061] 对比例3
[0062] 按照实施例1的方法进行制得制霉菌素B3,不同的是，在步骤（5)中未使用焦磷酸 钾的异丁醇溶液处理。该制霉菌素的纯度（w)如表1所示。
[0063] 对比例4
[0064] 按照实施例1的方法进行制得制霉菌素B4,不同的是，步骤（5)中加热的温度改为 40°C。该制霉菌素的纯度（w)如表1所示。
[0065] 对比例5
[0066] 按照实施例1的方法进行制得制霉菌素B5,不同的是，步骤（5)中加热的温度改为 100°C。该制霉菌素的纯度（w)如表1所示。
[0067] 表 1
[0068]
[0069] 由表1可知，本发明提供的制霉菌素具有很高的浓度，相对于A1-A3，B1_B5中制备 菌素纯度（w)显著减少，说明了在制备过程中，萃取过程，丙酮和焦磷酸钾的异丁醇溶液的 处理过程之间发生协同作用，使制得的制霉菌素纯度（w)均超过了 95%，极大的提高了制 霉菌素的药效。
[0070] 以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中 的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这 些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0071] 另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛 盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可 能的组合方式不再另行说明。
[0072] 此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本 发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【主权项】
1. 一种制霉菌素的提纯方法，其特征在于，所述提纯方法包括： (1) 将醇加入诺尔斯链霉菌发酵液中进行萃取取上层液体得到萃取液Ml ; (2) 将所述萃取液Ml蒸发制得沉淀物M2 ; (3) 将所述沉淀物M2置于丙酮溶液中热处理制得混合物M3 ; (4) 将所述混合物M3第一冷却后取上清液并过滤得到沉淀物M4 ; (5) 将所述沉淀物M4置于焦磷酸盐的异丁醇溶液中加热制浆得到混合物M5 ; (6) 将所述混合物M5第二冷却至25°C、过滤制得制霉菌素。2. 根据权利要求1所述的提纯方法，其中，所述醇为C1-C6的醇，优选为正丙醇、异丙醇 和甲醇中的一种或多种。3. 根据权利要求1所述的提纯方法，其中，相对于100体积份的醇，所述诺尔斯链霉菌 发酵液的用量为45-55体积份。4. 根据权利要求3所述的提纯方法，其中，所述萃取至少满足以下条件：萃取温度为 25-40°C，萃取时间为l_3h。5. 根据权利要求3所述的提纯方法，其中，所述蒸发满足以下条件：蒸发温度为 100-120°C，蒸发时间为l_2h。6. 根据权利要求1所述的提纯方法，其中，相对于100重量份的沉淀物M2,所述丙酮溶 液的用量为250-350重量份。7. 根据权利要求6所述的提纯方法，其中，所述丙酮溶液为丙酮水溶液，并且含有 33-55重量％的丙酮。8. 根据权利要求6所述的提纯方法，其中，步骤（3)中所述热处理的条件为：热处理温 度为35-45°C，热处理时间为30-60min。9. 根据权利要求6所述的提纯方法，其中，步骤（4)中所述第一冷却的条件为：冷却温 度为15-25°C，冷却时间为30-60min。10. 根据权利要求1所述的提纯方法，其中，相对于100重量份的所述沉淀物M4,所述 焦磷酸盐的异丁醇溶液的用量为150-250重量份； 优选地，所述焦磷酸盐选自焦磷酸钾、焦磷酸钠和焦磷酸钙中的一种或多种； 更优选地，焦磷酸盐的异丁醇溶液中焦磷酸盐的浓度为5-15重量％ ; 进一步优选地，步骤（5)中所述加热的条件为：加热温度为50-70°C，加热时间为 40-80min〇
【专利摘要】本发明公开了一种制霉菌素的提纯方法，该提纯方法包括：(1)将醇加入诺尔斯链霉菌发酵液中进行萃取取上层液体得到萃取液M1；(2)将所述萃取液M1蒸发制得沉淀物M2；(3)将所述沉淀物M2置于丙酮溶液中热处理制得混合物M3；(4)将所述混合物M3第一冷却后取上清液并过滤得到沉淀物M4；(5)将所述沉淀物M4置于焦磷酸盐的异丁醇溶液中加热制浆得到混合物M5；(6)将所述混合物M5第二冷却至25℃、过滤制得制霉菌素。通过该方法提纯的制霉菌素具有优异的纯度，且提纯过程简便易行，成本低廉。
【IPC分类】C07H1/06, C07H17/08
【公开号】CN105001288
【申请号】CN201510416602
【发明人】苏福男
【申请人】芜湖福民生物药业有限公司
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年7月14日