索非布韦的制备方法及其中间体的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药领域，具体涉及一类核苷氨基磷酸酯索非布韦的新型制备方法， 及合成该药物的中间体及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 丙型病毒性肝炎，简称为丙型肝炎、丙肝，是一种由丙型肝炎病毒（HCV)感染引起 的病毒性肝炎，主要经输血、针刺、吸毒等传播，据世界卫生组织统计，全球HCV的感染率约 为3 %，估计约1. 8亿人感染了HCV，每年新发丙型肝炎病例约3. 5万例。丙型肝炎呈全球性 流行，可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌（HCC)。 未来20年内与HCV感染相关的死亡率（肝衰竭及肝细胞癌导致的死亡）将继续增加，对患 者的健康和生命危害极大，已成为严重的社会和公共卫生问题。
[0003]HCV病毒体呈球形，直径小于80nm(在肝细胞中为36~40nm，在血液中为 36-62nm)，为单股正链RNA病毒，在核衣壳外包绕含脂质的囊膜，囊膜上有刺突。HCV仅有 Huh7,Huh7. 5,Huh7. 5. 1三种体外细胞培养系统，黑猩猩可感染HCV，但症状较轻。HCV-RNA 大约有9500 -lOOOObp组成，5'和3'非编码区（NCR)分别有319-341bp，和27-55bp，含 有几个顺向和反向重复序列，可能与基因复制有关。在5'非编码区下游紧接一开放的阅 读框（0RF)，其中基因组排列顺序为5' -C-El-E2-p7-NS2-NS3-NS4-NS5-3'，能编码一长度 大约为3014个氨基酸的多聚蛋白前体，后者可经宿主细胞和病毒自身蛋白酶作用后，裂解 成10种病毒蛋白，包括三种结构蛋白，即分子量19KD的核衣壳蛋白（或称核心蛋白，Core) 和两种糖蛋白（分子量为33KD的El蛋白，分子量72Kd的E2蛋白），p7编码一种膜内在蛋 白，其功能可能是一种离子通道。非结构蛋白部分则包括NS2,NS3，NS4A，NS5A和NS5B，非 结构蛋白对比病毒的生活周期非常重要。NS2和NS3具有蛋白酶活性，参与病毒多聚蛋白 前体的切割。此外，NS3蛋白还具有螺旋酶活性，参与解旋HCV-RNA分子，以协助RNA复制， NS4的功能尚不清楚。NS5A是一种磷酸蛋白，可以与多种宿主细胞蛋白相互作用，对于病毒 的复制起重要作用。而NS5B则具有RNA依赖的RNA聚合酶活性，参与HCV基因组复制。
[0004] 在治疗前应明确患者的肝脏疾病是否由HCV感染引起，只有确诊为血清HCVRNA阳 性的丙型病毒性肝炎患者才需要抗病毒治疗。抗病毒治疗目前得到公认的最有效的方案 是：长效干扰素PEG-IFNa联合应用利巴韦林，也是现在EASL已批准的慢性丙型病毒性肝 炎治疗的标准方案（S0C)，其次是普通IFNα或复合IFN与利巴韦林联合疗法，均优于单用 IFNa。聚乙二醇（PEG)干扰素a(PEG-IFNa)是在IFNa分子上交联无活性、无毒性的 PEG分子，延缓IFNa注射后的吸收和体内清除过程，其半衰期较长，每周1次给药即可维持 有效血药浓度。
[0005] 直接作用抗病毒药物（DAA)蛋白酶抑制剂博赛匹韦（B0C)或特拉匹韦（TVR)，与干 扰素联合利巴韦林的三联治疗，2011年5月在美国开始批准用于临床，推荐用于基因型为1 型的HCV感染者，可提高治愈率。博赛匹韦（B0C)饭后，每天三次（每7-9小时），或特拉匹 韦（TVR)饭后（非低脂饮食），每日三次（每7-9小时）。期间应密切监测HCVRNA，若发生 病毒学突破（血清HCVRNA在最低值后上升>1log)，应停用蛋白酶抑制剂。
[0006] 2013年FDA批准吉利德公司Sofosbuvir作为联合抗病毒治疗方案的一部分，用于 治疗慢性丙肝感染。索非布韦（Sofosbuvir) (S)-异丙基-2- ((S) - (((2R，3R，4R，5R) -5- (2 ，4-二氧-3, 4-二氢嘧啶-1 (2H)-基）-4-氟-3-羟基-4-甲基四氢呋喃-2-基）甲氧基） (苯氧基）膦酰基）氨基）丙酸酯是一种丙型肝炎病毒复制所必需的HCVNS5BRNA-依赖 RNA聚合酶的抑制剂。该药是一种核苷酸前药在细胞内进行代谢形成药理学活性尿嘧啶类 似物三磷酸（GS-461203)，通过NS5B聚合酶可掺入至HCVRNA和作用如同链终止物。在一 个生化分析中，GS-461203抑制来自HCV基因lb，2a，3a和4a型重组NS5B的聚合酶活性， 有IC50值范围从0. 7至2. 6μΜ。GS-461203不是人类DNA和RNA聚合酶的抑制剂也不是 线粒体RNA聚合酶的抑制剂。
[0007] 吉利德公司表示，Sovaldi可以单用也可与利巴韦林联合使用。作为一种传统的 抗感染药，利巴韦林适用于伴有2型和3型基因感染的患者治疗，属于这两种基因型的感染 者约占美国丙肝患者的近30%，而70%则归于1型基因感染者，在美国占比最大，且干扰 素治疗不适用于该类患者，但对于此次的新型抗感染药而言，Sovaldi联用利巴韦林和干 扰素能起到一定的治疗效果。另外，虽然属于4型基因的感染者占比极小，但上述的三药联 合方案仍可用于该类型感染的治疗。据多项研究结果表明，相较于目前的治疗方案，吉利德 的这种抗感染药在清除率占优的同时，不良反应也较少。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的在于提供一种用于合成治疗哺乳动物丙型肝炎药物（S)_异丙基-2 -((S) - (((2R，3R，4R，5R) -5- (2, 4-二氧-3, 4-二氢嘧啶-1 (2H)-基）-4-氟-3-羟基-4-甲 基四氢呋喃-2-基）甲氧基）（苯氧基）膦酰基）氨基）丙酸酯（索非布韦，Sovaldi)，即 式II化合物的新方法，该方法包括：
[0009]
[0010] 其中，P#表示手性磷原子，该方法包括：
[0011] 将中间体1和2' -脱氧-2' -氟-2' -C-甲基尿苷D在碱和路易斯酸存在的条件 下混旋，
[0012]
[0013] 其中中间体1为混旋的或者单一构型的，X代表卤素；
[0014] 任选的，还包含对所得式II化合物的Rp和Sp构型进行拆分的步骤。
[0015] 优选的，所述方法所使用的溶剂为四氢呋喃和/或1，4-二氧六环。
[0016] 优选的，所述碱选自N，N-二异丙基乙胺（DIEA)、三乙胺、1，8-二氮杂二环十一 碳-7-烯、N-甲基吗啉或叔丁醇钾。
[0017] 优选的，所述路易斯酸选自氯化锌、氯化镁、氯化铝、氯化铁、溴化锌或溴化镁。
[0018] 优选的，反应温度为45-65 °C。
[0019] 优选的，反应时间为15-40小时。
[0020] 优选的，所述中间体1、2'_脱氧_2'_氟-2'_C-甲基尿苷D、碱及路易斯酸的摩尔 比约为1. 5~2. 5:1. 0:1. 2~2. 0:1. 2~2. 0,优选的，最佳摩尔比例为2. 0:1. 0:1. 5:1. 5。
[0021] 优选的，拆分Rp和Sp两种构型的方法是采用丙酮/二氯甲烷打浆析晶，优选的，两 者体积比为1:8的。
[0022] 本发明的另一目的还在于提供制备式II所示化合物的中间体1，
[0023]
[0024] 其中，P#表示手性磷原子；X为卤素，原子0和X可以在吡啶环上的不同取代位置。
[0025] 优选的，X为C1或Br，更优选为C1。
[0026] 优选的，所述中间体1的结构如下所示：
[0029] 本发明的另一目的还在于提供制备所述中间体1的方法，该方法包括：
[0030] 将式A化合物二-X' -苯基磷酸酯，式B化合物丙氨酸异丙酯和羟基吡啶在碱的作 用下反应既得，
[0032] 其中Μ是酸的缀合碱，η为0或1，XI、X2各自独立地选自卤素，优选的，XI和X2 各自独立地选自氯或溴；
[0033] 任选的，还包括对所述中间体1进行纯化的步骤；
[0034] 任选的，还包括对所述中间体1的Rp和Sρ构型进行拆分的步骤。
[0035] 优选的，所述羟基吡陡选自2-羟基氣吡陡、2-羟基氣吡陡、2-氣轻 基吡啶、3-羟基-5-氯吡啶、2-氯-4-羟基吡啶或3-羟基-5-溴吡啶。
[0036] 优选的，所述碱选自Ν,Ν-二异丙基乙胺、1，8-二氮杂双环[5. 4. 0] ^ 碳稀、 三乙胺、叔丁醇钾或Ν-甲基吗啉中的一种或多种，更优选Ν，Ν-二异丙基乙胺和/或三乙 胺。
[0037] 优选的，所述方法是在二氯甲烷作为溶剂的环境中进行的。
[0038] 优选的，所述方法的温度范围为-50°C~10°C，反应时间为4-10小时，所述碱为 N，N-二异丙基乙胺或三乙胺，式A化合物、式B化合物与羟基吡啶的摩尔比约为1. 0~ 1. 3:1. 0~1. 3:1. 0,优选的，最佳摩尔比例为1. 1:1. 1:1. 0。
[0039] 优选的，所述中间体1的纯化采用甲基叔丁基醚打浆过滤的方法。
[0040] 优选的，所述拆分中间体1的Rp和sp两种构型的方