于 36±1°C的恒温培养箱中培养48h±2h;(4-2)基于下列标准，确定乳酸菌的活力：（a)在发酵 产物中，出现凝固或不发生乳清析出是乳酸菌为正常的指标；（b)发酵产物的pH在3.7~4.4 之间是乳酸菌为正常的指标;或（c)发酵产物不存在异常气味是乳酸菌为正常的指标。由 此，根据本发明实施例的确定乳酸菌活力的方法能够准确地确定乳酸菌的活力，操作简单。
[0021] 下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的 实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条 件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪 器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0022]乳酸菌为乳杆菌和嗜热链球菌，乳酸菌01、02和03为不同批次的菌株。
[0023] 实施例1
[0024]在该实施例中，按照下列步骤确定乳酸菌01的活力：
[0025] (1)称取20g葡萄糖置于装有100ml温度为45°C_60°C无菌水的三角瓶中进行充分 溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中定容至1000ml，得到2 %葡萄糖溶液，将95g脱脂 奶粉置于装有500ml温度为45°C_60°C的2 %葡萄糖溶液的三角瓶中充分溶解，将溶解得到 的混合物转移至容量瓶中并用2%葡萄糖溶液定容至1000ml，得到含有葡萄糖和脱脂奶粉 的混合液，将得到的混合液在121°C高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵培养基；
[0026] (2)称取2g乳酸菌01，置于装有198ml温度为36°C±1°C无菌生理盐水的无菌均质 袋内充分溶解，用均质器拍打lmin~2min，得到种子液；
[0027] (3)吸取lml种子液于200ml发酵培养基中，置于36±1°C的恒温培养箱中培养48h ±2h，得到发酵产物；
[0028] (4)基于下列标准，确定乳酸菌的活力：
[0029] (a)在发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是乳酸菌为正常的指标；
[0030] (b)发酵产物的pH在3.7~4.4之间是乳酸菌为正常的指标;或
[0031] (c)发酵产物不存在异常气味是乳酸菌为正常的指标。
[0032] 每组16个平行样品。
[0033] 实施例2
[0034]按照实施例1的方法确定乳酸菌02的活力。
[0035] 实施例3
[0036]按照实施例1的方法确定乳酸菌03的活力。
[0037] 对比例1
[0038]按照实施例1的方法确定乳酸菌01的活力，区别在于，
[0039]步骤（1):将95g脱脂奶粉置于装有500ml温度为45°C_60°C无菌水的容器中充分溶 解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中并用2%葡萄糖溶液定容至1000ml，将所得到的混 合液在121°C高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵培养基。
[0040] 对比例2
[00411按照对比例1的方法确定乳酸菌02的活力。
[0042] 对比例3
[0043]按照对比例1的方法确定乳酸菌03的活力。
[0044]实施例1~3以及对比例1~3的检测结果如表1所示，可以看出：是否存在葡萄糖对 乳酸菌01的发酵影响不大，说明该菌种自身合成所需碳源的能力较强，可以利用该菌株作 为后续试验菌株。
[0045]乳酸菌02在含有葡萄糖的培养基中能够正常发酵，具有活性，在无葡萄糖的培养 基中不能发酵，表明该菌种自身合成所需碳源能力较弱，只要在后续试验中添加一定量的 碳源，该菌株仍可作为后续试验菌株。
[0046]乳酸菌03在有无葡萄糖的培养基中均不能正常发酵，说明其无活力，不能作为后 续试验菌株。
[0047]表1乳酸菌活力检测结果
[0048]
[0049]
[0050]
[0051] 在本说明书的描述中，参考术语"一个实施例"、"一些实施例"、"示例"、"具体示 例"、或"一些示例"等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特 点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不 必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任 一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技 术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结 合和组合。
[0052] 尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例 性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述 实施例进行变化、修改、替换。
【主权项】
1. 一种确定乳酸菌活力的方法，其特征在于，包括： (1) 将乳酸菌接种在发酵培养基中进行发酵培养，其中，所述发酵培养基含有脱脂奶 粉、葡萄糖和水;以及 (2) 基于所述发酵培养的发酵产物，确定所述乳酸菌的活力。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基含有： 8~10重量份的所述脱脂奶粉；以及 1~3重量份的所述葡萄糖。3. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括： (1-1)将所述水与葡萄糖进行混合，得到葡萄糖溶液，然后将所述葡萄糖溶液与脱脂奶 粉进行混合，得到含有葡萄糖和脱脂奶粉的混合液，接着将所述混合液进行杀菌处理，得到 发酵培养基； (2-1)将乳酸菌置于装有生理盐水的均质袋中，进行混合，得到种子液； (3-1)将所述种子液接入所述发酵培养基中，进行发酵培养，得到发酵产物；以及 (4-1)基于下列标准，确定所述乳酸菌的活力： (a) 在所述发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是所述乳酸菌为正常的指标； (b) 所述发酵产物的pH在3.7~4.4之间是所述乳酸菌为正常的指标;或 (c) 所述发酵产物不存在异常气味是所述乳酸菌为正常的指标。4. 一种确定乳酸菌活力的方法，其特征在于，包括： (1-2)称取20g葡萄糖置于装有100ml温度为45°C_60°C无菌水的容器中进行溶解，并将 溶解得到的混合物定容至l〇〇〇ml，得到葡萄糖溶液，接着将95g脱脂奶粉置于装有500ml温 度为45°C_60°C的葡萄糖溶液的容器中溶解，将溶解得到的混合物转移至容量瓶中并用葡 萄糖溶液定容至l〇〇〇ml，并将得到的混合液在121°C高压灭菌15min，冷却至室温，得到发酵 培养基； (2-2)称取2g乳酸菌，置于装有198ml无菌生理盐水的无菌均质袋内，均质处理lmin~ 2min，得到种子液； (3-2)吸取lml所述种子液于200ml所述发酵培养基中，混匀并置于36±1°C的恒温培养 箱中培养48h±2h; (4-2)基于下列标准，确定所述乳酸菌的活力： (a) 在所述发酵产物中，出现凝固或不发生乳清析出是所述乳酸菌为正常的指标； (b) 所述发酵产物的pH在3.7~4.4之间是所述乳酸菌为正常的指标;或 (c) 所述发酵产物不存在异常气味是所述乳酸菌为正常的指标。
【专利摘要】本发明公开了确定乳酸菌活力的方法。所述方法包括：(1)将乳酸菌接种在发酵培养基中进行发酵培养，其中，所述发酵培养基含有脱脂奶粉、葡萄糖和水；以及(2)基于所述发酵培养的发酵产物，确定所述乳酸菌的活力。本发明确定乳酸菌活力的方法能够准确地确定乳酸菌的活力，且操作简便。
【IPC分类】C12Q1/04
【公开号】CN105483205
【申请号】CN201511001088
【发明人】薛志清, 吴玉秋, 梁春梅, 喻东威, 宋晓东
【申请人】内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年12月28日