1.一种甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC 检测方法的应用,其特征在于:
一种甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC 检测方法在判断甘蔗品种对梢腐病感性和抗性差异方面的应用;
所述甘蔗叶片中苹果酸含量的HPLC 检测方法包括以下步骤:
S1.将待测的甘蔗叶片加入预冷至2~5℃的体积分数为70~90%甲醇水溶液,再加入液氮研磨成浆,定容,2~5℃浸提50~90min,超声提取1.5~3h,离心,取上清液,残渣再加入预冷至2~5℃的体积分数为70~90%甲醇水溶液超声提取20~40min,离心后取出上清液,重复残渣浸提和离心操作0~3次,合并上清液,用70~90%甲醇定容,过滤,作为样品溶液备用;
S2.采用HPLC检测样品溶液中苹果酸的含量,色谱条件为:ARigol L3000高效液相色谱仪;色谱柱:CST C18反相色谱柱,250mm*4.6mm,5μm;流动相:12.5mmol/L的磷酸二氢钠水溶液800mL,加入16mL甲醇,用0.5mol/L的磷酸水溶液调节溶液pH至2.8,混匀;柱温:35℃;流速:0.8 mL/min;检测波长:214nm;进样体积:10μL。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述步骤S1中,所述待测的甘蔗叶片预先从甘蔗上置于冰盒上剪下。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述步骤S1中,待测的甘蔗叶片和残渣浸提采用的是体积分数为80%的甲醇水溶液。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述步骤S1中,待测的甘蔗叶片和残渣浸提的温度为4℃。
5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述步骤S1中,甘蔗叶片研磨成浆后,加入超净水进行定容。
6.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:
所述步骤S1中,过滤采用针头式过滤器进行。