一种检测饲料中多种脂溶性维生素的方法与流程

文档序号:12452855阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,包括以下步骤:

(1)根据检测需要,制备多种维生素标准溶液,包括以下维生素中的至少两种以上:维生素A醋酸酯、维生素D3、维生素E乙酸酯;

采用HPLC-MS/MS检测标准溶液,得到标准曲线方程;

色谱条件如下:

色谱柱:C18柱;

流动相包括流动相A:甲醇水溶液相,和流动相B:甲酸水溶液相;

其中流动相A:甲醇水溶液中甲醇的体积比例大于95%,流动相B:甲酸水溶液中甲酸的含量低于1wt%;

采用梯度洗脱,梯度条件:0~2min,流动相A 50~100%;2~9min,流动相A 100%;9~9.5min,流动相A 100~50%;

(2)称取样品,到棕色容量瓶中,加入提取溶液超声提取10-30min,冷却定容,离心,用0.22μm有机相滤膜,过滤上机,采用与步骤1相同的色谱参数和质谱检测参数进行分析测试;

所述提取溶液是,由提取溶液第一组分和提取溶液第二组分按照25-35:65-75体积比例混合配制而成的溶液;

所述提取溶液第一组分是0.03-0.07% 氨水溶液;

所述提取溶液第二组分是0.1-0.3% BHT甲醇溶液;

(3)根据步骤1和步骤2的检测结果计算得出样品中的多种维生素的含量。

2.如权利要求1所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,标准溶液制备:先用甲醇溶解维生素,配制成质量浓度为1g/L的标准物质储备溶液,然后稀释成分标准工作溶液。

3.如权利要求2所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,标准储备溶液中加入0.2wt% 2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚。

4.如权利要求2所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,稀释过程中应用的是提取溶液进行稀释。

5.如权利要求1所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,所述提取溶液第一组份是:0.05%氨水溶液;所述提取溶液第二组分是:0.2% BHT甲醇。

6.如权利要求5所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,提取溶液第一组份和提取溶液第二组分的体积比为30:70。

7.如权利要求1所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,采用梯度洗脱过程中,流动相有两种,分别是:流动相A:含0.01-0.03%氨水的96-99%甲醇水溶液,流动相B :0.01-0.03%甲酸水溶液。

8.如权利要求7所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,梯度洗脱程序为:流动相A:含0.02%氨水的98%甲醇水溶液,流动相B :0.02%甲酸水溶液,流速为0.3mL/min。

9.如权利要求1所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,色谱条件中,色谱柱为以下之一:C18-MGⅡ(pH 2-10) 3μm 2.0 mm I.D.×150mm柱、C18-MGⅢ(pH 2-10) 3μm 2.0mm I.D.×150mm柱、ADME(pH 2-10)3μm 2.1 mm I.D.×150mm柱、Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18 2.1×50mm柱、Waters ACQUITY UPLC HSS T3 1.8μm 3.0×50mm柱、Waters ACQUITY UPLC BEH 1.7μm 2.1×50mm柱。

10.如权利要求1所述检测饲料中多种脂溶性维生素的方法,其特征在于,质谱条件为,ESI正离子扫描模式:多反应监测(MRM)参数:干燥气温度325℃,干燥气流速11L/min,雾化气压力45psi,鞘气温度300℃,流速9L/min,毛细管电压4000V,喷嘴电压500V。

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