一种OLED材料中间体的检测方法与流程

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种基于hplc的新型oled材料中间体的定性定量检测方法。
背景技术：
：有机发光二极管(organiclight-emittingdiode,oled)又称为有机电激光显示、有机发光半导体，具有自发光性、广视角、高对比、低耗电、高反应速率、全彩化及制程简单等优点，近些年来发展迅速。有机发光材料是一种通过化学合成得到的新型材料，(e)-3-(3,5-二叔丁基苯基)-1-(2-甲氧基苯并[b,d]呋喃-3-基)丙-2-烯-1-酮是一种pt类配合物的有机发光材料重要中间体，结构式如下(i)。其结构准确性直接影响到下一步产物能否成功合成，定量的准确性影响到投料量的计算和最终产率。oled行业对材料的要求很高，整个生产过程中需要一种灵敏度高，专属性好，简单快速的分析方法。采用lc-ms、nmr对经多次结晶、过spe柱纯化的标准品专属性进行确证，用dad确定最佳检测波长，用高效液相色谱仪法(hplc)对该化合物粗品进行定性定量及杂质分析，对控制本中间体的质量提供有效保障。技术实现要素：本发明提供一种式(i)结构的新型oled材料中间体的检测方法，前处理简单方便，能准确检测样品含量。式(i)结构的新型oled材料中间体的检测方法，采用hplc定性定量检测，检测条件为：色谱柱为venusilxbp4.6×150mm,填料粒径5μm，柱温为40℃；流动相为甲醇:水，比例设置见下表，流速1.0ml/min，检测分析时间不低于15分钟。流动相比例设置如下：所述式(i)结构的新型oled材料中间体保留时间为7.02分钟。在hplc定性定量检测前的分析检测，所述检测方法还包括：液相质谱(lc-ms)定性，条件为：离子源：岛津duis-2020的esi+apci双离子源，离子模式：正/负，接口电压：4.5kv(正)，-4.5kv(负)，q阵列射频电压：60v，接口温度：350℃，dl温度：250℃，加热块温度：400℃，干燥气流速：15l/min，雾化气流速：1.5l/min。通过1hnmr定性，varian400mhz超导核磁共振波谱仪，条件：溶剂为cdcl3，溶液浓度为20mg/ml。通过dad检测器对标准样品进行光谱扫描：标准品溶在dcm中，配制浓度为100mg/l,对标准品溶液进行光谱扫描，确定其吸收度最大并且浓度与吸收度呈现正关系即为最佳检测波长，检测波长为325nm。所述检测方法还包括hplc方法的定量检测，(1)绘制标准曲线：称取标准品100mg，精确至0.1mg，于100ml容量瓶中，加入适量的dcm溶解后定容至刻度，摇匀，得到1mg/ml的标准品母液，逐步稀释成100mg/l、80mg/l、60mg/l、40mg/l、20mg/l、10mg/l、5mg/l的系列标准品溶液，过0.45um有机滤膜装瓶上机检测，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，描绘曲线；(2)对样品进行定量：称取样品大约50mg，精确至0.1mg，于25ml容量瓶中，适量dcm溶解后定容并摇匀，用移液管移取1ml于25ml容量瓶中，dcm定容后摇匀，取适量过0.45um有机滤膜，装瓶上机检测，用标准曲线读出含量，根据下列公式计算出实际含量；式中：x——样品含量，％c——曲线读得的样品浓度，mg/lv——总稀释体积，mlm——称样量，mg。具体以下述技术方案来实现：通过液相质谱(lc-ms)、nmr方法对经多次结晶、过spe柱纯化后的标准品进行专属性确证，用dad确定最佳检测波长，选择合适的色谱柱、确定合适的柱温、调整流动相、绘制标准曲线，对普通粗品进行外标法定量。1.1液相质谱(lc-ms)定性，条件为：离子源：岛津duis-2020双离子源(esi+apci)离子模式：正/负接口电压：4.5kv(正)，-4.5kv(负)q阵列射频电压：60v接口温度：350℃dl温度：250℃加热块温度：400℃干燥气流速：15l/min雾化气流速：1.5l/min1.2通过nmr定性，varian400mhz超导核磁共振波谱仪，条件：溶剂为cdcl3溶液浓度为20mg/ml(1h谱)。1.3通过dad检测器进行光谱扫描：标准品溶在dcm中，配制浓度为100mg/l,在200nm～700nm范围内对标准品溶液进行扫描，确定其吸收度最大并且浓度与吸收度呈现正关系的吸收波长即为检测波长，最终选择的检测波长为325nm。1.4选择合适的色谱柱：研究比较了①inertsustainc184.6×250mm5μm，②inertsilods-sp4.6×250mm5μm，③venusilxbp4.6×250mm5μm，④watersxbridgec184.6×150mm3.5μm，⑤inertsustainc184.6×150mm5μm，⑥inertsilods-sp4.6×150mm5μm，⑦venusilxbp4.6×150mm5μm，从总分析时间与对杂质的分离度综合考虑，最终选择的色谱柱为venusilxbp4.6×150mm5μm。1.5确定合适的柱温：分别考察了30℃、35℃、40℃、45℃等4个柱温下对杂质的分离情况，峰型，总分析时间等结果，最终选择的柱温为40℃。1.6调整流动相：1.6.1分别对流动相meoh与acn进行比较，最终选择meoh作为有机相。1.6.2流动相为meoh，流速1.5ml/min：用较低极性流动相与较高流速，确定极性最小的杂质，分析主峰后杂质的情况；1.6.3流动相为meoh-h2o＝7-3(v-v)，流速1.0ml/min：用较高极性的流动相增长主物质的保留时间，确定主峰前杂质的存在情况，并考察主峰里面是否还包裹有未分离的杂质；1.6.4流速：1.0ml/min，通过调整流动相梯度，已达到较好的杂质分离度，较短的分析时间，最终选择的流动相比例设置如下：1.7绘制标准曲线：称取标准品100mg(精确至0.1mg)于100ml容量瓶中，加入适量的dcm溶解后定容至刻度，摇匀，得到1mg/ml的标准品母液，逐步稀释成100mg/l、80mg/l、60mg/l、40mg/l、20mg/l、10mg/l、5mg/l的系列标准溶液，过0.45um有机滤膜装瓶上机检测，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，描绘曲线。1.8对样品进行定量：称取样品大约50mg(精确至0.1mg)于25ml容量瓶中，适量dcm溶解后定容并摇匀，用移液管移取1ml于25ml容量瓶中，dcm定容后摇匀，取适量过0.45um有机滤膜，装瓶上机检测，用标准曲线读出含量，根据公式计算出实际含量。结论：本发明建立了一种基于hplc的新型oled中间体含量检测方法，仅使用普通的c18柱和简单的meoh-h2o流动相体系就达到主物质与杂质分离的目的，前处理简单，结果精密度、准确度高，分析时间较短，为本中间体的质量控制提供有效保障。附图说明：图1为本发明化合物的lc-ms图。图2为本发明化合物的dad光谱图。图3为本发明化合物在不同色谱柱(长柱)下的hplc图。图4为本发明化合物在不同色谱柱(短柱)下的hplc图。图5为本发明化合物在不同柱温下的hplc图。图6为本发明化合物在不同流动相下的hplc图。图7为本发明化合物标准曲线图。图8为本发明化合物标准品与样品的hplc图。具体实施方式：一种基于hplc的新型oled中间体含量检测方法，其原理是利用液相质谱(lc-ms)、nmr对经多次结晶、过spe柱纯化的标准品专属性进行确证，用dad确定最佳检测波长，后续检测用保留时间定性，选择合适的色谱柱、确定合适的柱温、调整流动相、绘制标准曲线，对该化合物粗品进行定性定量及杂质分析。该方法的具体步骤如下：实验仪器与试剂：岛津lc-20ad双泵hplc，配备dad检测器；varian400mhz超导核磁共振波谱仪；岛津lc-ms2020(duis-esi+apci双离子源)；分析天平(梅特勒托利多)；millipore超纯水机；0.45μ有机滤膜；hplc级甲醇、乙腈；其他实验室常用玻璃器皿。1.液相质谱(lc-ms)定性，设置条件为：离子源：岛津duis-2020双离子源(esi+apci)离子模式：正/负接口电压：4.5kv(正)，-4.5kv(负)q阵列射频电压：60v接口温度：350℃dl温度：250℃加热块温度：400℃干燥气流速：15l/min雾化气流速：1.5l/min取浓度为100mg/l的标准溶液进样5μl，基峰为+411(+h)，分析结果与理论值一致。(见附图1)2.通过nmr定性，varian400mhz超导核磁共振波谱仪，条件：溶剂为cdcl3样品浓度为20mg/ml(1h谱)。结果解析：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.98(d,j＝7.7hz,2h),7.81(s,1h),7.62(s,1h),7.58(s,1h),7.51(s,2h),7.44(s,2h),7.38(d,j＝4.3hz,2h),4.01(s,3h),1.35(s,18h)，分析结果与理论值一致。3.通过dad检测器进行光谱扫描：标准品溶在dcm中，配样浓度为100mg/l，在200nm～700nm范围内对标准品溶液进行扫描，吸收峰有两个，分别为210nm与325nm，因210nm接近流动相的紫外截止波长，最终选择的检测波长为325nm。(见附图2)4.选择合适的色谱柱：研究比较了①inertsustainc184.6×250mm5μm，②inertsilods-sp4.6×250mm5μm，③venusilxbp4.6×250mm5μm，④watersxbridgec184.6×150mm3.5μm，⑤inertsustainc184.6×150mm5μm，⑥inertsilods-sp4.6×150mm5μm，⑦venusilxbp4.6×150mm5μm，从结果来看，长柱的分析时间普遍较长，为了提高效率与降低流动相的使用量，减少资源消耗与对环境的污染，后期使用短柱作优化；从4根短柱的结果来看，watersxbridgec184.6×150mm3.5μm的小粒径高效柱虽然在分析时间上有明显的优势，但其柱压过高，对于非超高液相来说，影响到仪器寿命；从总分析时间与对杂质的分离度综合考虑，最终选择的色谱柱为venusilxbp4.6×150mm5μm。(见附图3与附图4)5.确定合适的柱温：分别考察了30℃、35℃、40℃、45℃等4个柱温下对杂质的分离度、峰型、总分析时间等结果，发现4个柱温下杂质与主物质分离度都达到要求，总分析时间45℃最短，但与柱温40℃时相差不大，由于高柱温对色谱柱与仪器有损害，最终选择的柱温为40℃。(见附图5)6.调整流动相：6.1分别对meoh与acn进行比较，实验结果发现acn虽然对杂质的分离有一定的优势，但在总分析时间上相差不大，而甲醇可以通过后期调整流动相中水相比例来达到杂质分离，鉴于acn的价格远比meoh贵，为了节省检测成本，最终选择meoh作为有机相。(见附图6)6.2流动相为meoh，流速1.5ml/min：用较低极性流动相与较高流速，确定极性最小的杂质，分析主峰后杂质的情况。6.3流动相为meoh-h2o＝7-3(v-v)，流速1.0ml/min：用较高极性的流动相增长主物质的保留时间，确定主峰前杂质的存在情况，并考察主峰里面是否还包裹有未分离的杂质。6.4流速：1.0ml/min，流动相比例设置如下：结果：杂质与主峰分离很好，最大保留的杂质是29.3min，总分析时间为35min。6.5流速：1.0ml/min，流动相比例设置如下结果：杂质与主峰分离良好，总分析时间为25min。6.6流速：1.0ml/min，流动相比例设置如下结果：主峰与前后第一个杂质的分离度分别为2.56与2.98，均＞1.5，总分析时间为15min。6.7流速：1.0ml/min，流动相比例设置如下结果：主峰与前后第一个杂质的分离度分别为1.37与1.48，达不到＞1.5的分离度要求。7.最终色谱条件：色谱柱为venusilxbp4.6×150mm5μm，流速为1.0ml/min，柱温为40℃，检测波长为325nm，流动相比例设置如下：8.绘制标准曲线：称取标准品100mg(精确至0.1mg)于100ml容量瓶中，加入适量的dcm溶解后定容至刻度，摇匀，得到1mg/ml的标准品母液，逐步稀释成100mg/l、80mg/l、60mg/l、40mg/l、20mg/l、10mg/l、5mg/l的系列标准溶液，过0.45um有机滤膜装瓶上机检测，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，描绘曲线。(见附图7)9.对样品进行定量：称取样品大约50mg(精确至0.1mg)于25ml容量瓶中，适量dcm溶解后定容并摇匀，用移液管移取1.0ml于25ml容量瓶中，dcm定容后摇匀，取适量过0.45um有机滤膜，装瓶上机检测，用保留时间定性(见附图8)，用标准曲线读出含量，根据如下公式计算出实际含量。式中：x——样品含量，％c——曲线读得的样品浓度，mg/lv——总稀释体积，mlm——称样量，mg10.方法学验证对最终确定的检测方法进行精密度、准确度、线性范围等验证。10.1精密度——6平行称取样品大约50mg(精确至0.1mg)于25ml容量瓶中，适量dcm溶解后定容并摇匀，用移液管移取1.0ml于25ml容量瓶中，dcm定容后摇匀，取适量过0.45um有机滤膜，装瓶上机检测，用标准曲线读出含量，根据含量公式计算出实际含量，平行实验6份，结果见下表：编号1#2#3#4#5#6#平均值rsd,％检测结果，％46.9147.3646.8346.9947.1146.1646.890.86结果：样品6平行的rsd为0.86％，精密度良好。10.2准确度实验——加标回收称取样品大约50mg(精确至0.1mg)于25ml容量瓶中，然后，在容量瓶中分别加入1mg/ml的标准母液5ml(等同加标5mg)、10ml(等同加标10mg)、20ml(等同加标20mg)三个水平标准样品，每个加标点进行3平行实验，适量dcm溶解后定容并摇匀，用移液管移取1.0ml于25ml容量瓶中，dcm定容后摇匀，取适量过0.45um有机滤膜，装瓶上机检测，用标准曲线读出含量，根据含量公式计算出实际含量，根据以下回收率公式计算回收率，结果见下表：结果，三个浓度点的加标回收率在98.57％～99.86％之间，回收率良好。回收率计算公式：式中：p——回收率，％c1——加标样测定值，％c2——试样本底测定值，％c3——加标量，％3.线性与范围称取标准样品100mg(精确至0.1mg)于100ml容量瓶中，加入适量的dcm溶解后定容至刻度，摇匀，得到1mg/ml的标准品母液，逐步稀释成100mg/l、80mg/l、60mg/l、40mg/l、20mg/l、10mg/l、5mg/l的系列标准溶液，过0.45um有机滤膜装瓶上机检测，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，描绘曲线，得到相关系数r＝0.99995，表明在此浓度范围内浓度与峰面积呈现良好的线性关系。(见附图7)综上所述，本专利对一种基于hplc的新型oled中间体含量检测方法开发与验证，利用液相质谱(lc-ms)、nmr方法对经多次结晶、过spe柱纯化的标准品进行专属性确证，用dad确定最佳检测波长，后续本化合物粗品检测用保留时间定性，选择合适的色谱柱、确定合适的柱温、调整流动相、绘制标准曲线，对样品进行定量。本发明后期前处理简单，操作方便，精密度、准确度高，能通过方法学验证，适用于合成反应过程监控，满足企业对本中间体质量控制的要求。当前第1页12