蛋白饲料原料掺加土霉素药渣的鉴别方法与流程

文档序号:19185518发布日期:2019-11-20 01:27阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种蛋白饲料原料掺加土霉素药渣的鉴别方法,其特征在于,其包括:

将蛋白饲料原料经第一溶剂提取,用第二溶剂稀释,过滤,获得待测液;

以土霉素、四环素和脱水四环素作为土霉素药渣的标志物,将待测液经液相色谱分离,质谱检测,鉴别所述蛋白饲料原料是否存在所述标志物;

其中,所述第一溶剂为有机溶剂。

2.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,所述质谱检测中,以质荷比为461.1555m/z作为所述土霉素的特征碎片,以质荷比为445.1606m/z作为所述四环素的特征碎片,以质荷比为443.1450m/z作为所述脱水四环素的特征碎片。

3.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,将所述待测液经液相色谱分离的步骤包括:

以流动相a和流动相b进行梯度洗脱;

其中,所述流动相a为1.5mm~2.5mm醋酸氨水溶液,所述醋酸氨水溶液中含有0.15v/v%~0.25v/v%的甲酸;

所述流动相b为乙腈。

4.根据权利要求3所述的鉴别方法,其特征在于,所述梯度洗脱的步骤中,以体积百分比计,按照以下方式进行:

0~0.5min时,所述流动相a保持为95%,所述流动相b保持为5%;

0.5~3.0min时,所述流动相a由95%减小至85%,所述流动相b由5%增加至15%;

3.0~10.0min时,所述流动相a由85%减小至60%,所述流动相b由15%增加至40%;

10.0~18.0min时,所述流动相a由60%减小至0,所述流动相b由40%增加至100%;

18.0~23.0min时,所述流动相a保持为0,所述流动相b保持为100%;

23.0~25.0min时,所述流动相a保持为95%,所述流动相b保持为5%;

可选地,所述梯度洗脱的流速为0.3~0.5ml/min。

5.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,所述液相色谱分离的步骤中,所用的色谱柱的固定相为十八烷基官能团;

可选地,所述色谱柱为zorbaxeclipseplusc18色谱柱;

可选地,所述色谱柱的柱温为38℃~42℃。

6.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,所述质谱检测包括:采用四级杆飞行时间质谱对经所述液相色谱分离后的产物进行检测;

可选地,所述质谱检测的条件为:

电喷雾电离源;正离子扫描,扫描范围400-500m/z;干燥气温度:250℃;干燥气流量:7l/min;雾化气压力:7psi;鞘气温度:325℃;鞘气流量:11l/min;喷嘴电压200v;毛细管电压:3kv;毛细管出口电压:120v;skimmer电压750v。

7.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,所述第二溶剂包括浓度为1.5mm~2.5mm醋酸氨水溶液,所述醋酸氨水溶液中含有0.15v/v%~0.25v/v%的甲酸。

8.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,所述蛋白饲料原料的粒径≥18目;

可选地,所述蛋白饲料原料的粒径为18~40目。

9.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,所述第一溶剂包括甲醇。

10.根据权利要求1所述的鉴别方法,其特征在于,将所述蛋白饲料原料经第一溶剂提取的步骤包括:

将所述蛋白饲料原料与所述第一溶剂按照1g:(8ml~12ml)混合,振荡提取,获得提取液;

将所述提取液离心后取上清液;

可选地,将所述提取液以5000r/min~7000r/min的速率离心4min~6min;

可选地,所述蛋白饲料原料包括菜籽粕、豆粕和棉粕中的至少一种。


技术总结
一种蛋白饲料原料掺加土霉素药渣的鉴别方法,涉及饲料质量安全检测领域。该鉴别方法包括:将蛋白饲料原料经第一溶剂提取,用第二溶剂稀释,过滤,获得待测液。以土霉素、四环素和脱水四环素作为土霉素药渣的标志物,将待测液经液相色谱分离,质谱检测,鉴别蛋白饲料原料是否存在标志物,其中,第一溶剂为有机溶剂。该鉴别方法样品用量少,前处理过程简单,检测时间短、灵敏度较高,结果准确,能够有效鉴别蛋白饲料原料是否掺加土霉素药渣。

技术研发人员:李阳;樊霞;田静;贾铮;肖志明;索德成;王石
受保护的技术使用者:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
技术研发日:2019.09.12
技术公布日:2019.11.19
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