1.一种肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:包括以下步骤:
s1、fc结合蛋白进行吖啶酯标记:
s2、ctni单抗进行吖啶酯标记;
s3、fc结合蛋白与ctni单抗反应;
s4、分离未结合的bsa。
2.根据权利要求1所述的肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:所述步骤s1,包括以下步骤:
a1、取fc结合蛋白溶解于mes溶液中,充分溶解,配置成0.5-2.0mg/ml的bsa溶液;
a2、向a1的产物中加入偶联剂edc溶液;
a3、向a2的产物中加入吖啶酯溶液;
a4、向a3的产物中加入甘氨酸溶液;
a5、对a4的产物进行超滤,除去未结合的过量的吖啶酯。
3.根据权利要求2所述的肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:
在步骤a1中,所述fc结合蛋白的质量为0.5-2.0mg,所述mes溶液的体积为1ml;
在步骤a2中,所述fc结合蛋白溶液的体积为1ml,所述偶联剂edc的浓度为10-50mg/ml,所述偶联剂edc的体积为50-100ul,于25-37℃温度下,反应0.5-1h;
在步骤a3中,所述吖啶酯溶液的浓度为0.5-2.0mg/ml,所述吖啶酯溶液的体积为50ul,于25-37℃温度下,反应0.5-1h;
在步骤a4中,所述甘氨酸溶液的浓度为5.0-10mg/ml,所述甘氨酸溶液的体积为1ml,于25-37℃温度下,反应20-30min;
在步骤a5中,使用10-30kd超滤管,转速6000-8000rpm,时间15-30min。
4.根据权利要求1所述的肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:所述步骤s2,包括以下步骤:
b1、取ctni单抗溶解于mes溶液中,充分溶解,配置成0.5-1mg/ml的bsa溶液;
b2、向b1的产物中加入偶联剂edc溶液;
b3、向b2的产物中加入吖啶酯溶液;
b4、向b3的产物中加入甘氨酸溶液;
b5、对b4的产物进行超滤,除去未结合的过量的吖啶酯。
5.根据权利要求4所述的肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:
在步骤b1中,所述ctni单抗的质量为0.5-1mg,所述mes溶液的体积为1ml;
在步骤b2中,所述ctni单抗溶液的体积为1ml,所述偶联剂edc的浓度为10-50mg/ml,所述偶联剂edc的体积为50-100ul,于25-37℃温度下,反应0.5-1h;
在步骤b3中,所述吖啶酯溶液的浓度为0.5-1mg/ml,所述吖啶酯溶液的体积为50ul,于25-37℃温度下,反应0.5-1h;
在步骤b4中,所述甘氨酸溶液的浓度为5.0-10mg/ml,所述甘氨酸溶液的体积为1ml,于25-37℃温度下,反应20-30min;
在步骤b5中,使用10-30kd超滤管,转速6000-8000rpm,时间15-30min。
6.根据权利要求1所述的肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:所述步骤s3,包括以下步骤:
c1、将吖啶酯标记的ctni单抗和吖啶酯标记的fc结合蛋白进行混合、反应。
7.根据权利要求6所述的肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:
在步骤c1中,吖啶酯标记的ctni单抗和吖啶酯标记的fc结合蛋白的摩尔比为1:1~1:5,于25-37℃温度下,反应20-30min。
8.根据权利要求1所述的肌钙蛋白i检测试方法,其特征在于:所述步骤s4,包括以下步骤:
d1、使用分子筛层析法,分离纯化ctni-fc结合蛋白复合物。