气相色谱法分离测定美金刚起始物料有关物质的方法与流程

1.本发明属于分析化学领域，具体涉及气相色谱法分离测定盐酸美金刚起始物料及其有关物质的方法。


背景技术：

2.盐酸美金刚是一种电压依赖性、中等程度亲和力的非竞争性谷氨酸受体拮抗剂，可以阻断谷氨酸浓度病理性升高导致的神经元损伤，主要用于中重度阿尔茨海默症患者。盐酸美金刚化学名为1-amino-3,5-dimethyladamantane hydrochloride，分子式为c
12
h
21
n
·
hcl。盐酸美金刚起始物料化学名为1,3-dimethyladamantane，分子式为c
12
h
20
，结构式为：在合成盐酸美金刚的过程中，需要控制一些起始物料的纯度，以减少副反应的发生和杂质的生成，从而提高产物收率和纯度。对于盐酸美金刚起始物料1,3-dimethyladamantane，需要控制的有关物质有4个，即1-methyladamantane，结构式为：1,3,5-trimethyladamantane，结构式为：1-bromoaladamantane，结构式为：1-bromo-3-methyladamantane，结构式为：盐酸美金刚起始物料中的杂质去除不完全，将会影响药物纯度和质量。因此，实现分离
测定盐酸美金刚起始物料及其有关物质，可以保证合成盐酸美金刚过程中反应物的纯度，减少副反应的发生，提高产物收率和纯度，在盐酸美金刚的生产及其质量控制方面具有重要的现实意义。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于提供一种分析盐酸美金刚起始物料1,3-dimethyladamantane的纯度以及分离其有关物质的方法，从而实现盐酸美金刚起始物料与其有关物质的分离和测定，以保证盐酸美金刚起始物料的纯度，减少副反应的发生，提高产物收率。
4.本发明所述的一种测定盐酸美金刚起始物料有关物质的方法，是选用合适的溶剂将样品溶解，采用100%二甲基聚硅氧烷填料的毛细管色谱柱；上述所说的溶剂可以为二甲基亚砜、n,n-二甲基甲酰胺的一种或两种。
5.上述所说的色谱柱选自品牌为agilent、ohio valley或sge的色谱柱。
6.上述所说的色谱柱为100%二甲基聚硅氧烷填料的毛细管色谱柱。
7.本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：1）取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含盐酸美金刚起始物料20～40mg的供试品溶液；另取各有关物质适量，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含各有关物质1.0~2.0mg的有关物质贮备液；另取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，加各有关物质贮备液0.1ml，用溶剂将其溶解，摇匀，配制成每1ml含各有关物质0.02~0.04mg的系统适用性溶液。
8.2）设置进样口温度为200~300℃，载气流速为0.5~2.0ml/min，程序升温法，升温程序为初始温度80
°
c，恒温1~10min，以每分钟1~10
°
c的升温速率至200c，恒温1~10min，检测器温度为220~320℃，分流比为20:1~80:1。
9.3）取1）的供试品溶液、系统适用性溶液各1～3μl，注入气相色谱仪，完成盐酸美金刚起始物料及其有关物质的分离测定。其中：气相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪为agilent 6890n气相色谱仪氢火焰离子化检测器色谱柱：db-1毛细管色谱柱（agilent，30m
´
0.32mm，1.5μm）；进样口温度：250℃；检测器温度：280℃；载气（氮气）流速：1.0ml/min；分流比：50:1；进样体积：1μl柱箱升温程序：升温速率（℃/min）温度（℃）保持时间（min）/80552005本发明利用气相色谱法，采用100%二甲基聚硅氧烷填料的毛细管色谱柱（30m
´
0.32mm，1.5μm），能快速有效地分离测定盐酸美金刚起始物料及其有关物质，本发明解决了盐酸美金刚起始物料及其有关物质的分离测定问题，从而减少了合成盐酸美金刚副反应的发生和
产物的收率，结果见附图1~5。
10.附图说明
11.图1为实施例1时溶剂（二甲基亚砜）的气相色谱图；图2为实施例1时盐酸美金刚起始物料气相色谱图；图3为实施例1时盐酸美金刚起始物料及其有关物质气相色谱图；图4为实施例2时盐酸美金刚起始物料及其有关物质气相色谱图；图5为实施例3时盐酸美金刚起始物料及其有关物质气相色谱图。图6为实施例4时盐酸美金刚起始物料及其有关物质气相色谱图。
12.具体实施方式：以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实施的范围。以下通过实例形式，对本发明涉及的盐酸美金刚起始物料的含量测定及其有关物质检测方法作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
13.实施例1仪器与条件色谱仪：agilent 6890n气相色谱仪；检测器：氢火焰离子化检测器；色谱柱：db-1毛细管色谱柱（agilent，30m
´
0.32mm，1.5μm）；柱温：初始温度80
°
c，恒温5min，以每分钟5
°
c的升温速率至200
°
c，恒温5min；进样口温度：250℃；检测器温度：280℃；载气（氮气）流速：1.0ml/min；分流比：50:1；进样体积：1μl实验步骤取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含盐酸美金刚起始物料20～40mg的供试品溶液；另取各有关物质适量，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含各有关物质1.0~2.0mg的有关物质贮备液；另取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，加各有关物质贮备液0.1ml，用溶剂将其溶解，摇匀，配制成每1ml含各有关物质0.02~0.04mg的系统适用性溶液。另取二甲基亚砜作为空白溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图1~3，图1为空白溶液色谱图；图2为系统适用性溶液色谱图中，图中保留时间20.930min的色谱峰为盐酸美金刚起始物料，其余色谱峰为盐酸美金刚起始物料的有关物质。图3为供试品溶液色谱图，图中保留时间20.931min的色谱峰为盐酸美金刚起始物料。图1~图3表明：本发明的方法，可以有效地将盐酸美金刚起始物料与其有关物质分离，并可以准确进行定量检测，以计算出盐酸美金刚起始物料的纯度。
14.实施例2仪器与条件
色谱柱：db-1毛细管色谱柱（agilent，30m
´
0.32mm，1.5μm）；柱温：初始温度40
°
c，恒温5min，以每分钟10
°
c的升温速率至150
°
c，恒温8min；进样口温度：250℃；检测器温度：280℃；载气（氮气）流速：1.1ml/min；分流比：50:1；进样体积：1μl实验步骤取各有关物质适量，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含各有关物质1.0~2.0mg的有关物质贮备液；另取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，加各有关物质贮备液0.1ml，用溶剂将其溶解，摇匀，配制成每1ml含各有关物质0.02~0.04mg的系统适用性溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图4，图中保留时间20.333min的色谱峰为盐酸美金刚起始物料。
15.实施例3仪器与条件色谱柱：db-1毛细管色谱柱（agilent，30m
´
0.32mm，1.5μm）；柱温：初始温度40
°
c，恒温5min，以每分钟10
°
c的升温速率至150
°
c，恒温8min；进样口温度：250℃；检测器温度：280℃；载气（氮气）流速：0.9ml/min；分流比：50:1；进样体积：1μl实验步骤取各有关物质适量，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含各有关物质1.0~2.0mg的有关物质贮备液；另取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，加各有关物质贮备液0.1ml，用溶剂将其溶解，摇匀，配制成每1ml含各有关物质0.02~0.04mg的系统适用性溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图5，图中保留时间21.625min的色谱峰为盐酸美金刚起始物料。
16.实施例4仪器与条件色谱柱：zb-50毛细管色谱柱（phenomenex，60m
´
0.32mm，0.25μm）；柱温：初始温度120
°
c，恒温5min，以每分钟5
°
c的升温速率至230
°
c，恒温3min；进样口温度：250℃；检测器温度：280℃；载气（氮气）流速：0.9ml/min；分流比：50:1；进样体积：1μl实验步骤取各有关物质适量，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含各有关物质1.0~2.0mg的有
关物质贮备液；另取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，加各有关物质贮备液0.1ml，用溶剂将其溶解，摇匀，配制成每1ml含各有关物质0.02~0.04mg的系统适用性溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。结果见附图6，图中保留时间9.300min的色谱峰为盐酸美金刚起始物料。
17.本发明对所述盐酸美金刚起始物料及其有关物质分析方法的以下项目进行了验证：专属性取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含盐酸美金刚起始物料20～40mg的供试品溶液；另取各有关物质适量，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含各有关物质1.0~2.0mg的有关物质贮备液；另取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，加各有关物质贮备液0.1ml，用溶剂将其溶解，摇匀，配制成每1ml含各有关物质0.02~0.04mg的系统适用性溶液。另取二甲基亚砜作为空白溶液。按上述色谱条件进行分析，记录色谱图。按照实施例1的色谱条件进行气相色谱分析，记录色谱图。结果见附图1~4，在此色谱条件下，有关物质与主峰之间分离度符合要求，溶剂和样品中其他杂质不干扰检测，理论塔板数满足检测要求，该方法专属性良好。
18.进样重复性试验取系统适用性溶液，按实施例1色谱条件，重复进样6次，考察方法的重复性。由结果可知，该方法进样重复性良好。
进样次数123456平均值rsd%主峰(a)698857916958009969517510697348766993875870241437698164120.38
19.耐用性通过微调进样口温度、载气流速、检测器温度和色谱柱品牌等色谱条件，我们进一步考察了方法的耐用性。结果发现，该方法对不同品牌的色谱柱、进样口温度变化
±
5℃、载气流速变化
±
0.1ml/min、检测器温度变化
±
5℃等条件下耐用性良好。在不同品牌色谱柱、不同进样口温度、载气流速及检测器温度条件下盐酸美金刚中间体及其有关物质保留时间无显著变化，且均能达到有效分离。
20.检测限取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含盐酸美金刚起始物料20～40mg的供试品溶液；另取各有关物质适量，用溶剂将其溶解，配制成每1ml含各有关物质1.0~2.0mg的有关物质贮备液；另取盐酸美金刚起始物料100mg~200mg，加各有关物质贮备液0.1ml，用溶剂将其溶解，摇匀，配制成每1ml含各有关物质0.02~0.04mg的系统适用性溶液。再精密量取系统适用性溶液适量，逐级稀释，按实施例1的色谱条件进样考察。盐酸美金刚起始物料及有关物质检测限数据如下表所示：
项目1-甲基金刚烷1,3-二甲基金刚烷1,3,5-三甲基金刚烷1-溴金刚烷1-溴-3-甲基金刚烷检测限(ng)2.552.523.054.204.27