技术特征：
1.具有以下结构的嵌合gpcr：[n末端序列]-[tm1]-[ic1]-[tm2]-[ec1]-[tm3]-[ic2]-[tm4]-[ec2]-[tm5]-[ic3]-[tm6]-[ec3]-[tm7]-[c末端序列]其中细胞外环源自第一gpcr，并且细胞内环源自(不同于第一gpcr)的第二gpcr。2.根据权利要求1所述的嵌合gcpr，其中所述嵌合gpcr的细胞外结合结构域源自所述第一gpcr。3.根据权利要求1或2所述的嵌合gcpr，其中所述tm源自所述第一gpcr。4.根据权利要求1至3中任一项所述的嵌合gcpr，其中所述第一gpcr和所述第二gpcr均属于a类。5.包含根据权利要求1至4中任一项所述的嵌合gpcr和结合结构域或结合单元的组合物，其中所述结合结构域或结合单元能够结合源自所述第二gpcr的细胞内环中的至少一个。6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述结合结构域或结合单元是在与所述嵌合gpcr结合时能够稳定和/或诱导所述嵌合gpcr的功能性和/或活性构象状态的配体。7.根据权利要求5或6所述的组合物，其中所述结合结构域或结合单元是免疫球蛋白单可变结构域。8.根据权利要求4至6中任一项所述的组合物，其为细胞组合物。9.形成嵌合gpcr、结合结构域或结合单元、以及能够结合至所述嵌合gpcr上的细胞外结合位点(如本文所定义)的化合物或配体的复合体的方法，所述方法包括以下步骤：c)提供根据权利要求6至8中任一项所述的组合物；和d)在以下条件下使所述组合物与一种或多种测试化合物或配体接触：(i)允许所述结合结构域或结合单元结合至包含至少一个所述细胞内环的嵌合gpcr上的所述结合位点；和(ii)允许所述测试化合物结合至所述嵌合gpcr的细胞外结合位点。10.鉴定和/或产生能够结合至gpcr的细胞外结合位点(如本文所定义)的化合物或配体的方法，所述方法包括以下步骤：a)提供根据权利要求6至8中任一项所述的组合物，其中所述嵌合gpcr至少包含所述gpcr的细胞外环；b)在以下条件下使所述组合物与一种或多种测试化合物或配体接触：(i)允许所述结合结构域或结合单元结合至包含至少一个所述细胞内环的嵌合gpcr上的所述结合位点；和(ii)允许所述测试化合物结合至所述嵌合gpcr的细胞外结合位点；c)评估每种测试化合物或配体是否(和/或所述测试化合物或配体中的哪一种)与嵌合gpcr结合；在所述组合物中；和任选地d)选择与所述组合物中的嵌合gpcr结合的测试化合物或配体。11.鉴定和/或产生能够结合至gpcr的活性构象的化合物或配体的方法，所述方法包括以下步骤：a)提供根据权利要求6至8中任一项所述的组合物，其中所述嵌合gpcr至少包含所述gpcr的细胞外环，并且其中所述结合结构域或结合单元是在与所述嵌合gpcr结合时能够稳定和/或诱导所述嵌合gpcr的活性构象状态的配体；b)在以下条件下使所述组合物与一种或多种测试化合物或配体接触：(i)允许所述结
合结构域或结合单元结合至包含至少一个所述细胞内环的嵌合gpcr上的所述结合位点；和(ii)允许所述测试化合物结合至所述嵌合gpcr的细胞外结合位点；c)评估每种测试化合物或配体是否(和/或所述测试化合物或配体中的哪一种)与嵌合gpcr结合；在所述组合物中；和任选地d)选择与所述组合物中的嵌合gpcr结合的测试化合物或配体。12.至少包括以下元件的装置：-分隔第一环境和第二环境的边界层；-根据权利要求1至4中任一项所述的嵌合gpcr；-存在于第一环境中的嵌合gpcr的第一配体；-存在于第二环境中的嵌合gpcr的第二配体，该第二配体是能够结合所述嵌合gpcr上的至少一个细胞内环的结合结构域或结合单元；和-至少由第一结合成员和第二结合成员组成的结合对，该结合对能够产生可检测的信号。13.根据权利要求12所述的装置，其中所述嵌合gpcr直接或通过合适的间隔物或接头与所述结合对的第一结合成员融合或连接，并且其中所述第二配体直接或通过合适的间隔物或接头与所述结合对的第一结合成员融合或连接。14.包含根据权利要求1至4中任一项所述的嵌合gpcr的融合蛋白，其中所述嵌合gpcr直接或通过合适的间隔物或接头融合或连接至能够与所述嵌合gpcr的至少一个细胞内环结合的结合结构域或结合单元。15.根据权利要求14所述的融合蛋白，其中所述结合结构域或结合单元是在与所述嵌合gpcr结合时能够稳定和/或诱导所述嵌合gpcr的功能性和/或活性构象状态的配体。
技术总结
本发明涉及具有来自第一GPCR的细胞外环和来自第二GPCR的细胞内环的嵌合GPCR，并且涉及用于鉴定与GPCR的活性构象结合的化合物或配体的筛选方法，其中使用这种嵌合GPCR。其中使用这种嵌合GPCR。
技术研发人员：安
受保护的技术使用者：康福治疗有限公司
技术研发日：2020.04.28
技术公布日：2022/2/10