1.用于分析细胞因子实验对象组的试剂盒,其包含:
(a)选自以下的多孔测定板:
(i)包含多个孔的多孔测定板,每个孔包含十个离散的结合域,针对人分析物的捕获抗体结合至所述结合域:ifn-γ、il-1β、il-2、il-4、il-6、il-8、il-10、il-12p70、il-13、tnfα;
(ii)包含多个孔的多孔测定板,每个孔包含十个离散的结合域,针对以下人分析物的捕获抗体结合至所述结合域:gm-csf、il-1α、il-5、il-7、il-12/il-23p40、il-15、il-16、il-17a、tnf-β、vegf-a;
(iii)包含多个孔的多孔测定板,每个孔包含十个离散的结合域,针对以下人分析物的捕获抗体结合至所述结合域:嗜酸细胞活化趋化因子、mip-1α、嗜酸细胞活化趋化因子-3、tarc、ip-10、mip-1β、il-8、mcp-1、mdc、mcp-4;
(iv)包含多个孔的多孔测定板,每个孔包含十个离散的结合域,针对以下大鼠分析物的捕获抗体结合至所述结合域:ifn-γ、il-2、il-4、il-1β、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-13、tnf-α;或
(v)包含多个孔的多孔测定板,每个孔包含十个离散的结合域,针对以下小鼠分析物的捕获抗体结合至所述结合域:ifn-γ、il-1-β、il-2、il-4、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-12p70、tnf-α;
(b)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,对于所述人分析物特异性的标记的检测抗体的集合;和
(c)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,校准蛋白的集合。
2.权利要求1的试剂盒,其中所述试剂盒进一步包含:
(a)一种或多种稀释液;和/或
(b)ecl阅读缓冲液。
3.权利要求2的试剂盒,其中所述检测抗体用电化学发光(ecl)标记进行标记。
4.权利要求3的试剂盒,其中所述离散的结合域位于所述孔内的电极上。
5.权利要求1的试剂盒,其中所述校准蛋白的集合包含校准蛋白的冻干掺合物或校准蛋白的液体制剂。
6.10点96孔多孔板,其中每个板包含板顶部、板底部,且每个孔包含斑点图案,其中所述板满足或超过以下规格:(a)3.8904-3.9004英寸的长度范围;(b)2.4736-2.4836英寸的宽度范围;和(c)0.3513-0.3573英寸的孔与孔间距。
7.包含权利要求6的板的试剂盒,其中所述斑点图案包含十个离散的结合域,针对以下分析物的集合之一的捕获抗体结合至所述结合域:
(a)人分析物:ifn-γ、il-1β、il-2、il-4、il-6、il-8、il-10、il-12p70、il-13、tnfα;
(b)人分析物:gm-csf、il-1α、il-5、il-7、il-12/il-23p40、il-15、il-16、il-17a、tnf-β、vegf-a;
(c)人分析物:嗜酸细胞活化趋化因子、mip-1α、嗜酸细胞活化趋化因子-3、tarc、ip-10、mip-1β、il-8、mcp-1、mdc、mcp-4;
(d)大鼠分析物:ifn-γ、il-2、il-4、il-1β、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-13、tnf-α;
(e)小鼠分析物:ifn-γ、il-1-β、il-2、il-4、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-12p70、tnf-α;
所述试剂盒进一步包含:(i)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,对于所述人分析物特异性的标记的检测抗体的集合;和(ii)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,校准蛋白的集合。
8.权利要求6的板,其中(a)和(b)从所述板的第一孔a1中的斑点图案的中心至最外孔a12的斑点图案的中心进行测量。
9.10点96孔多孔板,其中每个板包含板顶部、板底部、所述板顶部和底部的x和y轴,且每个孔包含斑点图案,其中所述板满足或超过以下规格:δx≤0.2mm,δy≤0.2mm,且α≤0.1°,其中(a)δx是沿着所述板的x轴的斑点图案的中心和孔的中心之间的差值;(b)δy是沿着所述板的y轴的斑点图案的中心和孔的中心之间的差值;和(c)α是所述板底部的x轴和所述板顶部的x轴之间的逆时针角。
10.一批权利要求6或9的板。
11.包含权利要求9的板的试剂盒,其中所述斑点图案包含十个离散的结合域,针对以下分析物的集合之一的捕获抗体结合至所述结合域:
(a)人分析物:ifn-γ、il-1β、il-2、il-4、il-6、il-8、il-10、il-12p70、il-13、tnfα;
(b)人分析物:gm-csf、il-1α、il-5、il-7、il-12/il-23p40、il-15、il-16、il-17a、tnf-β、vegf-a;
(c)人分析物:嗜酸细胞活化趋化因子、mip-1α、嗜酸细胞活化趋化因子-3、tarc、ip-10、mip-1β、il-8、mcp-1、mdc、mcp-4;
(d)大鼠分析物:ifn-γ、il-2、il-4、il-1β、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-13、tnf-α;
(e)小鼠分析物:ifn-γ、il-1-β、il-2、il-4、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-12p70、tnf-α;
所述试剂盒进一步包含:(i)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,对于所述人分析物特异性的标记的检测抗体的集合;和(ii)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,校准蛋白的集合。
12.用于分析两个或更多个细胞因子实验对象组的试剂盒,其包含:
(a)两个或更多个多孔测定板,每个包含多个孔,每个孔包含十个离散的结合域,针对分析物的集合的捕获抗体结合至所述结合域,其中所述分析物的集合选自:
(i)人分析物:ifn-γ、il-1β、il-2、il-4、il-6、il-8、il-10、il-12p70、il-13和tnfα;
(ii)人分析物:gm-csf、il-1α、il-5、il-7、il-12/il-23p40、il-15、il-16、il-17a、tnf-β和vegf-a;
(iii)人分析物:嗜酸细胞活化趋化因子、mip-1α、嗜酸细胞活化趋化因子-3、tarc、ip-10、mip-1β、il-8、mcp-1、mdc和mcp-4;
(iv)大鼠分析物:ifn-γ、il-2、il-4、il-1β、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-13和tnf-α;或
(v)小鼠分析物:ifn-γ、il-1-β、il-2、il-4、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-12p70和tnf-α;
(b)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,对于所述分析物特异性的标记的检测抗体的集合;和
(c)在一个或多个小瓶、容器或隔室中,校准蛋白的集合。
13.权利要求12的试剂盒,其中所述检测抗体用电化学发光(ecl)标记进行标记。
14.权利要求13的试剂盒,其中所述离散的结合域位于所述孔内的电极上。
15.权利要求13的试剂盒,其中所述捕获抗体和/或检测抗体已经进行选自cief、sec-mals、dls、变性/非变性凝胶和experion的分析测试方法。
16.制造用于分析细胞因子实验对象组的一批试剂盒的方法,其中所述试剂盒包含对于以下分析物的集合之一特异性的合格的检测和捕获抗体:
(i)人分析物:ifn-γ、il-1β、il-2、il-4、il-6、il-8、il-10、il-12p70、il-13和tnfα;
(ii)人分析物:gm-csf、il-1α、il-5、il-7、il-12/il-23p40、il-15、il-16、il-17a、tnf-β和vegf-a;
(iii)人分析物:嗜酸细胞活化趋化因子、mip-1α、嗜酸细胞活化趋化因子-3、tarc、ip-10、mip-1β、il-8、mcp-1、mdc和mcp-4;
(iv)大鼠分析物:ifn-γ、il-2、il-4、il-1β、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-13和tnf-α;或
(v)小鼠分析物:ifn-γ、il-1-β、il-2、il-4、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-12p70和tnf-α;
所述方法包括使所述批次中的试剂盒的子集进行板涂层均匀度测试和基于所述均匀度测试的结果通过所述批次的步骤。
17.权利要求16的方法,其中所述批次满足选自以下的规格:(a)≤10%的平均板内cv;(b)≤13%的最大板内cv;(c)≤25%的平均均匀度度量;(d)≤37%的最大均匀度度量;(e)≤18%的板内平均值的cv;(f)>1500的信号下限;(g)<106的信号上限,及其组合。
18.制造用于分析细胞因子实验对象组的试剂盒的方法,其中所述试剂盒包含对于以下分析物的集合之一特异性的合格的检测和捕获抗体:
(i)人分析物:ifn-γ、il-1β、il-2、il-4、il-6、il-8、il-10、il-12p70、il-13和tnfα;
(ii)人分析物:gm-csf、il-1α、il-5、il-7、il-12/il-23p40、il-15、il-16、il-17a、tnf-β和vegf-a;
(iii)人分析物:嗜酸细胞活化趋化因子、mip-1α、嗜酸细胞活化趋化因子-3、tarc、ip-10、mip-1β、il-8、mcp-1、mdc和mcp-4;
(iv)大鼠分析物:ifn-γ、il-2、il-4、il-1β、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-13和tnf-α;或
(v)小鼠分析物:ifn-γ、il-1-β、il-2、il-4、il-5、il-6、kc/gro、il-10、il-12p70和tnf-α;
所述方法包括以下步骤:
(a)使对于所述小鼠分析物特异性的检测抗体的初步集合进行cief、dls和experion;
(b)基于所述cief、dls和experion测试从所述检测抗体的初步集合选择合格的检测抗体;
(c)使对于所述小鼠分析物特异性的捕获抗体的初步集合进行cief、dls和experion;和
(d)基于所述cief、dls和experion测试从所述捕获抗体的初步集合选择合格的捕获抗体。
19.权利要求18的方法,其中所述方法进一步包括:
(a)使所述检测抗体的初步集合进行选自变性sds-page、非变性sds-page、sec-mals及其组合的额外分析方法;
(b)使所述检测抗体的初步集合进行由变性sds-page、非变性sds-page和sec-mals组成的额外分析方法;
(c)使所述检测抗体的初步集合进行选自变性sds-page、非变性sds-page、sec-mals及其组合的额外分析方法;
(d)使所述捕获抗体的初步集合进行由变性sds-page、非变性sds-page和sec-mals组成的额外分析方法;或
(e)使所述检测和捕获抗体的初步集合的每一个进行由变性sds-page、非变性sds-page和sec-mals组成的额外分析方法。