技术特征：
1.一种外泌体检测方法，其特征在于，包括如下步骤：磁珠活化步骤：对羧基化磁珠进行活化；适配体探针生成步骤：采用携带氨基的核酸适配体以及携带生物素的互补探针进行结合；从而得到适配体探针；磁珠与适配体探针结合步骤：将所述羧基化磁珠和适配体探针结合，得到磁珠-适配体探针；辅助剂结合步骤：采用辅助剂与磁珠-适配体探针结合，得到磁珠-适配体探针-辅助剂；外泌体结合步骤：将外泌体与磁珠-适配体探针-辅助剂结合，得到磁珠-适配体-外泌体和探针-辅助剂；显色剂参与步骤：采用显色剂，所述探针-辅助剂与显色剂反应生成荧光物质；荧光检测步骤：对所述显色剂参与步骤中获得的荧光物质进行荧光检测。2.根据权利要求1所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述磁珠活化步骤中采用缓冲液对所述羧基化磁珠进行洗涤，调节ph值为6.5-8.5，加入nhs和edc活化羧基化磁珠。3.根据权利要求2所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：将非离子型表面活性剂加入所述缓冲液中，所述非离子型表面活性剂的添加量为缓冲液含量的0.01％-0.03％。4.根据权利要求1所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述适配体探针生成步骤中核酸适配体的靶标选自pd-l1、cn63、cea、ca125、epcam中的至少一种。5.根据权利要求1所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述磁珠与适配体探针结合步骤中羧基化磁珠和适配体探针结合时，采用缓冲液进行洗涤。6.根据权利要求5所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述磁珠与适配体探针结合步骤中，在所述磁珠-适配体探针中加入磁珠封闭液和磁珠保存液以维持磁珠活性。7.根据权利要求1所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述辅助剂结合步骤中辅助剂为链霉亲和素-辣根过氧化物酶。8.根据权利要求1所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述外泌体结合步骤中外泌体通过离心式微流控芯片富集得到，所述外泌体结合步骤的反应时间为25min-35min。9.根据权利要求1所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述显色剂参与步骤中显色剂为过氧化氢和荧光红染料。10.根据权利要求1所述的一种外泌体检测方法，其特征在于：所述荧光检测步骤中激发波长为535nm。
技术总结
本申请涉及一种外泌体检测方法，其包括对羧基化磁珠进行活化以及生成适配体探针，之后将适配体探针共价结合至羧基化磁珠表面，得到磁珠-适配体探针，在磁珠-适配体探针加入辅助剂，结合得到磁珠-适配体探针-辅助剂，将外泌体与磁珠-适配体探针-辅助剂相结合，通过离心得到磁珠-适配体-外泌体和探针-辅助剂，利用显色剂与探针-辅助剂进行显色反应生成荧光物质，最终对荧光物质进行检测。本申请具有反应步骤简单、原料不易受到环境因素影响的优点。原料不易受到环境因素影响的优点。原料不易受到环境因素影响的优点。
技术研发人员：林晓东 徐震宇
受保护的技术使用者：广州兆瑞医学生物科技有限公司
技术研发日：2021.12.07
技术公布日：2022/4/5