技术特征：
1.一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）使检测样本流经喷涂有荧光标记混合物的结合垫，在所述结合垫上形成样本-荧光标记混合物，所述荧光标记混合物由铕荧光微球标记的rbd重组蛋白和铕荧光微球标记的羊抗鸡igy组成；（2）使样本-荧光标记混合物依次流经包被有rbd重组蛋白的检测线和包被有鸡igy的质控线；（3）使激发光射向检测线和质控线，若检测线和质控线均发出荧光信号，则判断为含有新型冠状病毒中和抗体，若检测线无荧光信号而质控线发出荧光信号，则判断为无新型冠状病毒中和抗体；（4）当判断为含有新型冠状病毒中和抗体，则检测检测线的荧光值和质控线的荧光值，计算检测线的荧光值和质控线的荧光值的比值，得到定量结果。2.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，在所述步骤（1）中，所述荧光标记混合物的喷涂量为2-8 μl/cm。3.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，在所述步骤（1）中，所述荧光标记混合物中所述铕荧光微球标记的rbd重组蛋白和所述铕荧光微球标记的羊抗鸡igy的体积比为(5-15)：1。4.根据权利要求1所述的一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，在所述步骤（2）中，所述检测线上包被的rbd重组蛋白的浓度为0.5-2.0 mg/ml，包被量为0.5-2.0 μg/cm。5.根据权利要求4所述的一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，在所述步骤（2）中，所述质控线包被的鸡igy的浓度为0.5-2.0 mg/ml，包被量为0.5-2.0 μg/cm。6.一种新型冠状病毒中和抗体检测试纸条，其特征在于，包括底板和设置在底板上并依次连接的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，所述检测线位于靠近所述结合垫的一侧，所述质控线位于靠近所述吸水垫的一侧；所述结合垫上喷涂有荧光标记混合物，所述荧光标记混合物由铕荧光微球标记的rbd重组蛋白和铕荧光微球标记的羊抗鸡igy组成；所述检测线上包被有rbd重组蛋白，所述质控线上包被有鸡igy。7.根据权利要求6所述的新型冠状病毒中和抗体检测试纸条，其特征在于，在所述结合垫上，所述荧光标记混合物的喷涂量为2-8 μl/cm；所述荧光标记混合物中所述铕荧光微球标记的rbd重组蛋白和所述铕荧光微球标记的羊抗鸡igy的体积比为(5-15)：1。8.根据权利要求7所述的新型冠状病毒中和抗体检测试纸条，其特征在于，所述铕荧光微球标记的rbd重组蛋白的浓度为5-20 μg/ml，所述铕荧光微球标记的羊抗鸡igy的浓度为10-30 μg/ml。9.根据权利要求6所述的新型冠状病毒中和抗体检测试纸条，其特征在于，所述检测线上包被的rbd重组蛋白的浓度为0.5-2.0 mg/ml，包被量为0.5-2.0 μg/cm；所述质控线包被的鸡igy的浓度为0.5-2.0 mg/ml，包被量为0.5-2.0 μg/cm。10.根据权利要求6所述的新型冠状病毒中和抗体检测试纸条，其特征在于，所述铕荧光微球的粒径为100~500 nm。
11.一种新型冠状病毒中和抗体检测试纸条的制备方法，其特征在于，用于制备权利要求6-10任意一项所述的新型冠状病毒中和抗体检测试纸条，包括以下步骤：（1）将铕荧光微球加入到 mes缓冲液中，避光混匀后加入edc和nhs活化铕荧光微球，离心后用mes重悬沉淀，并加入 rbd重组蛋白，避光反应1.5~2.5 h后，加入10% bsa，封闭20~40 min，离心，再用复溶液重悬沉淀，得到铕荧光微球标记的rbd重组蛋白，4 ℃避光保存备用；（2）将铕荧光微球加入到mes缓冲液中，避光混匀后加入edc和nhs活化铕荧光微球，离心后用mes重悬沉淀，并加入羊抗鸡igy，避光反应1.5~2.5 h后，加入10% bsa，封闭20~40 min，离心，再用复溶液重悬沉淀，得到铕荧光微球标记的羊抗鸡igy，4 ℃避光保存备用；（3）按配比，将铕荧光微球标记的rbd重组蛋白和铕荧光微球标记的羊抗鸡igy混合，得到荧光标记混合物，将荧光标记混合物喷涂在结合垫上，干燥后保存待用；（4）将rbd重组蛋白用喷金划膜仪包被到硝酸纤维素膜上，得到检测线；将鸡igy用喷金划膜仪包被到硝酸纤维素膜上，得到质控线，干燥完成后用铝膜袋密封保存待用；（5）按顺序将样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组装在底板上，采用条形切割器将组装好的板条切成 4 mm的宽度，得到新型冠状病毒中和抗体检测试纸条。12.一种新型冠状病毒中和抗体检测试剂盒，其特征在于，包括卡壳下底和盖设于所述卡壳下底外的卡壳上盖，所述卡壳下底的顶面设有权利要求6-8任意一项所述的新型冠状病毒中和抗体检测试纸条；所述卡壳上盖的顶面开设有加样孔和观察区，所述加样孔位于所述样品垫的上方，所述观察区位于所述检测线和质控线所在位置的上方。
技术总结
本发明公开了一种新型冠状病毒中和抗体的检测方法、检测试纸条及试剂盒，涉及生物医学检测技术领域，检测方法包括以下步骤：使检测样本流经喷涂有荧光标记混合物的结合垫，在结合垫上形成样本-荧光标记混合物，荧光标记混合物由铕荧光微球标记的RBD重组蛋白和铕荧光微球标记的羊抗鸡IgY组成；使样本-荧光标记混合物依次流经包被有RBD重组蛋白的检测线和包被有鸡IgY的质控线；通过激发光射向检测线和质控线，得到定性结果，当判断为含有新型冠状病毒中和抗体，通过检测检测线的荧光值和质控线的荧光值，计算检测线的荧光值和质控线的荧光值的比值，便可得到定量结果。本方案的检测方法具有检测方便快捷和灵敏度高的优点。测方法具有检测方便快捷和灵敏度高的优点。测方法具有检测方便快捷和灵敏度高的优点。
技术研发人员：唐勇 章英 张晓丽
受保护的技术使用者：广东忠信生物科技有限公司
技术研发日：2021.12.23
技术公布日：2022/1/28