技术特征：
1.一种用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：s1：提取：避光操作，称取含维生素d3的制剂适量，置棕色锥形瓶中，加入甲醇水溶液适量进行提取，并振摇，得提取液；s2：萃取：在s1所得提取液中精密加入正己烷适量，振摇后转移至分液漏斗，静置待分层，取上层正己烷层，转移至烧瓶中，向下层中继续添加适量正己烷，重复此萃取过程多次，将多次萃取得到的正己烷溶液合并，得正己烷萃取液；s3：浓缩：45℃～60℃水浴条件下，对所述正己烷萃取液进行回收，并在旋转蒸发仪下蒸干；得供试品残渣；s4：配制：加0.5～2ml所述甲醇水溶液使所述供试品残渣溶解，经滤膜过滤，得供试品溶液；其中，所述含维生素d3的制剂中维生素d3的规格≥31.25iu。2.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，所述甲醇水溶液为90％～95％甲醇水溶液。3.根据权利要求2所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述甲醇水溶液的加入量为30～100ml。4.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中，所述正己烷的加入量为10～100ml/次，萃取次数为2～10次。5.根据权利要求4所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述正己烷的加入量为40～60ml/次，萃取次数为3～5次。6.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，称取的样品中含维生素d3的量≥20μg。7.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，所述提取的方式为超声提取或者水浴提取。8.根据权利要求7所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述超声提取的功率为60～100w，超声时间为5～30min；所述水浴提取条件为45
±
5℃水浴提取。9.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，所述振摇的频次为1～2min摇一次，振摇方式为手动或者机械振摇。10.一种含维生素d3的制剂中有关物质的高效液相检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：a)制备供试品溶液：按照权利要求1～9任一项所述的制备方法制备得到供试品溶液；b)制备对照品溶液：精密称取维生素d3对照品适量，用甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含维生素d
3 0.2μg的溶液，作为对照品溶液；c)高效液相色谱检测：精密量取供试品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。11.根据权利要求10所述的含维生素d3的制剂中有关物质的检测方法，其特征在于，所
述步骤c)中，色谱条件：色谱柱固定相填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相a：0.01％～0.5％磷酸溶液；流动相b：乙腈-流动相a(90～99∶1～10)；梯度洗脱；检测波长为265nm；进样体积为50～250μl；柱温为20～30℃；流速为0.5～1.5ml/min。12.根据权利要求11所述的含维生素d3的制剂中有关物质的检测方法，其特征在于，所述流动相a：0.025％～0.05％磷酸溶液；流动相b：乙腈-流动相a(99∶1)；检测波长为265nm；进样体积为100～200μl。13.根据权利要求11所述的含维生素d3的制剂中有关物质的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为thermoaccucore xl、phenomenex utremex
tm c18 80a或phenosphere 80a ods，内径
×
柱长为4.6
×
(150～250)mm，色谱柱的粒径3～5μm；洗脱条件选自以下梯度洗脱程序中的一种：时间(min)流动相a％流动相b％015858015858501001450100145.115851551585或：时间(min)流动相a％流动相b％01090501090609010150901015110901601090或：时间(min)流动相a％流动相b％051.548.516138739109043010057010057.151.548.56551.548.5。14.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法或权利要求10～13任一项所述的含维生素d3的制剂中有关物质的高效液相检测方法，其特征在于，所述含维生素d3的制剂包含碳酸钙和维生素d3，其中维生素d3的规格为31.25～200iu。
15.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法或权利要求10～13任一项所述的含维生素d3的制剂中有关物质的高效液相检测方法，其特征在于，所述制剂中维生素d3的规格为31.25～125iu。16.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法或权利要求10～13任一项所述的含维生素d3的制剂中有关物质的高效液相检测方法，其特征在于，所述制剂为碳酸钙d3咀嚼片、碳酸钙d3咀嚼片(ii)、维d钙咀嚼片、儿童维d钙咀嚼片、碳酸钙d3颗粒、复方碳酸钙颗粒、或复方碳酸钙泡腾颗粒、碳酸钙d3片、碳酸钙维d3元素片或维生素d3片。17.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法或权利要求10～13任一项所述的含维生素d3的制剂中有关物质的高效液相检测方法，其特征在于，所述制剂为碳酸钙d3咀嚼片(ii)，其中维生素d3的规格为60iu。18.根据权利要求1所述的用于检测含维生素d3的制剂中有关物质的供试品溶液的制备方法或权利要求10～13任一项所述的含维生素d3的制剂中有关物质的高效液相检测方法，其特征在于，所述制剂为碳酸钙d3片，其中维生素d3的规格为125iu。
技术总结
本发明公开了含维生素D3的制剂中有关物质的高效液相检测方法及供试品溶液的制备方法，本发明供试品溶液的制备方法提取率高、且重现性好，适于推广应用；且供试品溶液制备方法用到的有机溶剂种类相对较少、毒性相对较低，减少了实验人员的操作风险。本发明首次采用反相高效液相系统对含低剂量维生素D3的制剂中的有关物质进行检测，相比现有技术中的正相检测系统，其专属性更强、重现性更好、灵敏度更高，采用本发明的梯度洗脱方式，各主峰与杂质峰均可被检出并良好分离，并且主峰的响应度高，可有效控制含维生素D3的制剂的质量。的制剂的质量。
技术研发人员：赵芹 吴思思 赵志荣 卢智俊 赵玉姣 袁永玲
受保护的技术使用者：广州朗圣药业有限公司
技术研发日：2021.12.27
技术公布日：2022/4/12