技术特征：
1.一种血红蛋白氧载体中游离fe
3+
含量的检测方法，其包括以下步骤：(1)建立fe
3+
的标准曲线：取硫酸铁铵标准品，加入水和浓硫酸，配制成fe
3+
浓度为80-120μg/ml的标准储备液；其中，水和浓硫酸的体积比为100：(0.15-0.25)；取不同体积的标准储备液，加入水、浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液，配制5-10个含有不同浓度fe
3+
的标准品溶液；其中，所述标准品溶液中fe
3+
的浓度为0.12-5μg/ml；所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的体积比为1：(1.5-2.5)：(15-25)，所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的总体积和所述标准品溶液的体积比为(0.15-0.2)：1；在紫外检测条件下，取各标准品溶液检测，获得各标准品溶液中fe
3+
的吸光度；以各标准品溶液中fe
3+
的吸光度为纵坐标，以各标准品溶液中fe
3+
的浓度为横坐标，建立fe
3+
的标准曲线；(2)获得待测血红蛋白氧载体中游离fe
3+
的吸光度：取待测血红蛋白氧载体，加入水、浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液，配制待测样品溶液；其中，所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的体积比为1：(1.5-2.5)：(15-25)，所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的总体积和所述待测血红蛋白氧载体的体积、所述待测样品溶液的体积比为(0.15-0.2)：(0.005-0.015)：1；在与步骤(1)相同的紫外检测条件下，取所述待测样品溶液检测，获得待测样品溶液中游离fe
3+
的吸光度；(3)确定待测血红蛋白氧载体中游离fe
3+
的含量：根据已建立的fe
3+
的标准曲线，由待测样品溶液中fe
3+
的吸光度，获得待测样品溶液中fe
3+
的浓度c1，按照公式c＝c1
×
n计算待测血红蛋白氧载体中游离fe
3+
的含量；其中，n＝v1/v2，v1为所述待测样品溶液的体积，v2为所述待测血红蛋白氧载体的体积。2.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述标准储备液中fe
3+
浓度为90-110μg/ml。3.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述浓硫酸的质量分数≥70％，所述过硫酸钾溶液的质量分数为0.8-1.2％，所述硫氰化钾溶液的质量分数为8-12％。4.根据权利要求1所述的检测方法，其中，步骤(1)中，所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的体积比为1：(1.8-2.2)：(18-22)；步骤(2)中，所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的体积比为1：(1.8-2.2)：(18-22)。5.根据权利要求1所述的检测方法，其中，步骤(1)中，所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的总体积和所述标准品溶液的体积比为(0.17-0.19)：1；步骤(2)中，所述浓硫酸、过硫酸钾溶液、硫氰化钾溶液的总体积和所述待测血红蛋白氧载体的体积、所述待测样品溶液的体积比为(0.17-0.19)：(0.008-0.012)：1。6.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述标准品溶液经配制后，静置8-12min，离心后检测。7.根据权利要求1所述的检测方法，其中，所述待测样品溶液经配制后，静置8-12min，离心后检测。8.根据权利要求1-7中任一项所述的检测方法，其中，所述紫外检测条件包括：检测波长为460-500nm。9.根据权利要求8所述的检测方法，其中，所述检测波长为470-490nm。
技术总结
本申请提供了一种血红蛋白氧载体中游离Fe
技术研发人员：陈刚 蔡伟江 夏烈文 郑春辉 万章 莫德欢 王瑶曦
受保护的技术使用者：云锦华彰（北京）生物科技有限公司
技术研发日：2022.03.16
技术公布日：2022/6/10