1.一种基于crispr-cas12a体系检测真菌毒素的方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述真菌毒素为霉菌毒素;
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述识别dna和所述单链dna的摩尔比为1:1.25-1.75;
4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在步骤(2)中,相对于1mol的单链dna,所述辅助dna的添加量为1-1.2mol;
5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在步骤(2)中,所述辅助酶能够消化所述单链-辅助dna复合物释放所述激活dna和所述单链dna,优选为exo iii酶。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述反应混合物ii含有所述单链dna时,所述方法还包括:在所述反应混合液ii中,将可能含有的所述单链dna继续重复反应iii。
7.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在步骤(3)中,所述crispr-cas12a体系溶液含有crrna、cas12a蛋白、核糖核酸酶抑制剂和缓冲剂;其中,所述crrna的核苷酸序列如seq id no.5所示,所述激活dna的核酸序列如seq id no.4所示。
8.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,在步骤(3)中,所述活化的条件包括:温度为30-45℃,时间为20-30min。
9.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述电化学生物传感器包括电极和修饰在所述电极上的功能层,所述功能层含有聚丙烯胺盐酸盐、二氧化铈以及二茂铁标记的非特异性单链dna;
10.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:在步骤(4)前,检测电化学生物传感器的初始电化学信号,并计算出所述电化学信号与所述初始电化学信号的差值百分比。