技术特征：
1.一种表面增强拉曼散射及分光光度双模式检测甲基汞及赭曲霉毒素a的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）以巯基-β-环糊精基碳点sh-β-cds、柠檬酸钠为还原剂及稳定剂，制备sh-β-cds改性金纳米aunps；（2）在甲基汞标准溶液中加入sh-β-cds改性金纳米aunps溶液，室温反应3-5min后，加入隐性孔雀石绿溶液及h2o2，生成绿色孔雀石绿；采用紫外-可见分光光度法检测反应产物，在588nm波长处测定吸光度，以甲基汞浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，确定甲基汞浓度与吸光度的线性关系；采用表面增强拉曼散射光谱检测反应产物，确定794cm-1
处的特征峰作为表面增强拉曼散射光谱检测甲基汞的判别依据，并确定甲基汞浓度与特征峰的峰面积的线性关系；先在30μg/l甲基汞溶液中加入赭曲霉毒素a标准溶液反应5-10mim后，再加入sh-β-cds改性金纳米aunps溶液，然后加入隐性孔雀石绿溶液及h2o2，生成绿色孔雀石绿；采用紫外-可见分光光度法检测反应产物，在588nm波长处测定吸光度，以赭曲霉毒素a浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，确定赭曲霉毒素a浓度与吸光度的线性关系；采用表面增强拉曼散射光谱检测反应产物，确定794cm-1
处的特征峰作为表面增强拉曼散射光谱检测赭曲霉毒素a的判别依据，并确定赭曲霉毒素a浓度与特征峰的峰面积的线性关系；（3）取待测甲基汞的样品液与sh-β-cds改性金纳米aunps溶液混合反应后，加入隐性孔雀石绿、h2o2反应，分别进行紫外-可见分光光度及表面增强拉曼光谱检测，根据吸光度和特征峰的峰面积计算待测样品液中甲基汞浓度；取待测赭曲霉毒素a的样品液与甲基汞溶液混合反应后，再加入sh-β-cds改性金纳米aunps、隐性孔雀石绿、h2o2反应，分别进行紫外-可见分光光度及表面增强拉曼光谱检测，根据吸光度和特征峰的峰面积计算待测样品液中赭曲霉毒素a浓度。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，sh-β-cds改性金纳米aunps的制备如下：（1）称取0.05-0.1g巯基-β-环糊精、0.03-0.05g去甲肾上腺素、2.0-2.5g柠檬酸、0.05-0.1g乙二胺溶于40-60ml超纯水中，超声混合均匀，将混合液转移至聚四氟乙烯内衬水热反应罐中，置于微波消解仪中，于180℃消解1h，反应完成后自然冷却至室温，得棕色溶液；将棕色溶液用0.22μm滤膜除去大颗粒杂质，再经高速离心，上清液真空干燥，即得巯基-β-环糊精基碳点sh-β-cds；（2）将1-1.5mgsh-β-cds、20-25mg柠檬酸钠溶于40-60ml超纯水中，再加入haucl4，85-95℃加热搅拌25-30min，即得sh-β-cds改性金纳米aunps，其中haucl4在混合液中的浓度为10-15mg/ml。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：表面增强拉曼散射光谱检测中甲基汞标准溶液的浓度为0.34-50.00μg/l，赭曲霉毒素a标准溶液浓度为0.25-41.78μg/l；紫外-可见分光光度法检测中甲基汞标准溶液的浓度为1.25-46.87μg/l，赭曲霉毒素a标准溶液的浓度为0.75-68.75μg/l；sh-β-cds改性金纳米aunps溶液浓度为0.1mg/ml，添加量为45-55
µ
l；隐性孔雀石绿溶液浓度为5mmol/l，添加量为80-120
µ
l；h2o2的浓度为50mmol/l，添加量为45-55
µ
l。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：离心是在8000-10000r/min下处理10-15min。
技术总结
本发明公开了一种表面增强拉曼散射及分光光度双模式检测甲基汞及赭曲霉毒素A的方法，该方法基于巯基-β-环糊精基碳点改性金纳米具有的模拟酶及拉曼增加的双重活性，在双氧水存在下氧化无色隐性孔雀石绿为有可见光吸收及表面增强拉曼光谱活性的孔雀石绿，而甲基汞的加入增强了金纳米的过氧化酶活性，同时也增加了拉曼活性，当赭曲霉毒素A存在时，由于其能与甲基汞相互作用而抑制纳米酶活性，从而减弱了隐性孔雀石绿的氧化，导致吸光度及SERS信号降低；基于此本发明建立了高灵敏、选择性强甲基汞及赭曲霉毒素A的双模式分光光度及SERS检测方法，本方法具有操作简单、灵敏度高、快速等特点。等特点。等特点。
技术研发人员：杨亚玲 李秋兰 李宏 杨德志
受保护的技术使用者：昆明理工大学
技术研发日：2022.08.04
技术公布日：2022/12/12