一种检测槟榔中特异性N-亚硝基化合物的方法

文档序号:35027881发布日期:2023-08-05 15:41阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:所述n-亚硝基化合物为n-亚硝基去甲槟榔碱、n-亚硝基去甲槟榔次碱、n-亚硝基异丙酸、3-甲基亚硝胺丙腈和3-甲基亚硝胺丙醛。

2.根据权利要求1所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:采用超高效液相色谱质谱联用仪uplc-ms/ms进行检测,检测条件如下:

3.根据权利要求1所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:包括以下步骤:

4.根据权利要求2所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:所述流动相b的配制方法为:取1.0ml色谱级甲酸,加超纯水定容至1000ml,即获得0.1vt.%甲酸水溶液,流动相使用前均需超声处理10min。

5.根据权利要求3所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:所述步骤(1)中2,4-二硝基苯肼反应溶液的配制方法如下:量取20ml纯乙腈,加入0.4ml纯甲酸,制成含2vt.%甲酸的乙腈溶液;称取2,4-二硝基苯肼793mg,加入2ml含2vt.%甲酸的乙腈溶液,制成200mmol/l 2,4-二硝基苯肼反应储备溶液,于4℃、避光、密封保存,使用时再用含2vt.%甲酸的乙腈溶液配制成所需浓度的2,4-二硝基苯肼反应溶液,现配现用。

6.根据权利要求3所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:所述步骤(1)中3-甲基亚硝胺丙醛与2,4-二硝基苯肼反应的环境条件为黑暗环境、25℃,静置时间为1h。

7.根据权利要求3所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:所述步骤(2)中3-甲基亚硝胺丙醛+2,4-二硝基苯肼标准工作曲线的配制方法如下:取0、1、2、5、10、20、50、100μmol/l 3-甲基亚硝胺丙醛标准溶液,分别与同等体积的100μmol/l 2,4-二硝基苯肼反应溶液衍生,充分混匀反应,静置;现配现用,不可贮存。

8.根据权利要求3所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:所述步骤(2)中n-亚硝基去甲槟榔次碱、n-亚硝基去甲槟榔碱、3-甲基亚硝胺丙腈和n-亚硝基异丙酸混合标准溶液的浓度梯度为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μmol/l,-20℃避光、密封可保存一周。

9.根据权利要求3所述的一种检测槟榔中特异性n-亚硝基化合物的方法,其特征在于:所述步骤(3)中拟合优度r2至少达到0.99。


技术总结
本发明提供了一种检测槟榔中特异性N‑亚硝基化合物的方法,通过对样品进行必要的柱前衍生,利用超高效液相色谱质谱联用绘制工作曲线,定性定量检测槟榔中特异性N‑亚硝基化合物。该检测方法具有灵敏度高、分析时间短、定量准确的优点,可以应用于槟榔致癌性的研究,尤其适用于含N‑亚硝基去甲槟榔次碱、N‑亚硝基去甲槟榔碱、3‑甲基亚硝胺丙腈、3‑甲基亚硝胺丙醛和N‑亚硝基异丙酸的槟榔的致癌性研究。

技术研发人员:马玲君,李晓慧,季俊夫,胡小松,陈芳
受保护的技术使用者:中国农业大学
技术研发日:
技术公布日:2024/1/14
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