水平在肝脏中注射后1小时显著上升，并 在随后的24小时内逐渐回归到正常水平。同一时间段内观测血浆、T细胞和肺组织内 anti-MHC- I -SiRNA的变化，anti-MHC- I -SiRNA的表达水平在注射后1小时均显著上 升，并在随后的24小时内逐渐回归到正常水平。
[0045] 图2显示了与对照组注射anti-MHC- I -SiRNA(阳性对照组）和阴性对照组（注 射生理盐水）相比，实验组（注射anti-MHC- I -SiRNA载体）的MHC的表达水平显著降低， 从而说明anti-MHC- I -SiRNA可抑制MHC- I的mRNA表达水平。
[0046] 图3显示了移植术后大鼠注射特异性anti-M肥-I -SiRNA,血清、肝脏、T细胞、肺 组织中anti-MHC- I -SiRNA的表达水平。从图3可W看出，anti-MHC- I -SiRNA的表达 水平在肝脏中注射后1小时显著上升，并在随后的24小时内逐渐回归到正常水平。同一时 间段内观测血浆、T细胞和肺组织内anti-MHC- I -SiRNA的变化，anti-MHC- I -SiRNA的 表达水平在注射后1小时均显著上升，并在随后的24小时内逐渐回归到正常水平。
[0047] 图4显示了与对照组利用注射anti-MHC- I -SiRNA(阳性对照组）和阴性对照组 (注射生理盐水）相比，实验组（注射anti-MHC- I -SiRNA载体）的MHC- I的表达水平显 著降低，从而说明anti-MHC- I -SiRNA可抑制MHC- I的mRNA表达水平。
【具体实施方式】
[0048] 本发明人经过广泛而深入的研究，首次意外地发现，降低离体或在体的移植供体 器官中的非匹配的组织相容性抗原基因，能够有效地降低供体的免疫原性，从而有效地改 善供受体之间的免疫排斥反应。实验证明，组织相容性抗原的SiRNA可W通过血液循环或 预处理，有效地进入待移植供体器官和/或组织中，并高效地抑制组织相容性抗原高表达 的基因，而对移植受体施用含有SiRNA的组合物，也能够同样有效地降低与移植供体的免 疫排斥，因此，本发明打破了现有的仅W非特异性的免疫抑制剂来降低免疫排斥的常规，有 望开发为一种新的、副作用更少的对抗移植免疫排斥问题的新方法。在此基础上，完成了本 发明。
[004引同种移植排斥反应
[0050] 针对同种异体细胞、组织或器官移植通常会引起宿主免疫排斥反应，本质上是一 种针对特异性抑制抗原（主要是HLA抗原）的特异性免疫应答。介导同种移植排斥反应的 抗原包括；主要组织相容性抗原（MHA)，次要组织相容性抗原（mHA)，其他组织相容性抗原。 其中，其他组织相容性抗原包括ABO抗原系统和组织特异性抗原。特异性HLA抗体是引起 同种移植排斥反应的重要原因。
[0051] 主要组织相容性复合物（major histocompatibility complex, M肥）
[0052] 如本文所用，术语"MHC"、"主要组织相容性复合物"、"主要组织相容性抗原"、"MHC 基因或其蛋白"均可互换使用，均指存在于大部分脊椎动物基因组中的与免疫系统密切相 关的主要组织相容性复合物基因或其蛋白。其中，人类的主要组织相容性复合物称为"HLA" 或"HLA基因或其蛋白"。
[0053] 其中，术语"非匹配组织相容性抗原"指的是移植配对的供受体之间不能相匹配的 主要组织相容性复合物，通常，所述非匹配组织相容性抗原的判断与临床上不符合移植标 准的非匹配组织相容性抗原判断原则相同。
[0054] 人的主要组织相容性复合物称为HLA基因复合体。主要组织相容性复合物共分成 两类；第一型：主要组织相容性复合物class I (MHC I)位于一般细胞表面上，可W提供一 般细胞内的一些状况，比如该细胞遭受病毒感染，则相病毒外膜碎片之氨基酸链（peptide) 透过MHC提示在细胞外侧，可W供杀手T细胞等辨化W进行扑杀。第二型；主要组织相容 性复合物class II (MHC II)只位于抗原提呈细胞上，如巨瞻细胞等。送类提供则是细胞 外部的情况，像是组织中有细菌侵入，则巨瞻细胞进行吞食后，把细菌碎片利用MHC提示给 辅助T细胞，启动免疫反应。
[0055] 主要组织相容性复合物抗原最初是作为移植抗原而被发现的，是引起移植排斥的 主要抗原系统。送种抗原不合，即可引起受体的免疫应答，排斥移植的供体组织。主要组织 相容性复合物分子在免疫应答过程中参与抗原识别。I类和II类分子是引起同种异体移植 排斥反应的主要抗原，供者与受者主要组织相容性复合物的相似程度直接反映两者的相容 性；供-受者间的主要组织相容性复合物相似性越高，移植成功的可能性越大。为了降低移 植排斥反应，延长移植物的存活时间，移植前的重要工作就是通过HLA检测的方法进行组 织配型，选择HLA抗原与受者尽量相同的供者；在移植后发生排斥反应时进行恰当的免疫 抑制。
[0056] 人类白细胞抗原化uman Leuko巧te Antigen, HLA)
[0057] 人类的主要组织相容性复合物称为"HLA"或"HLA基因或其蛋白"，即MHC当来源 于人时，所述的主要组织相容性复合物称为人类白细胞抗原（HLA)。
[0058] HLA又称移植抗原。人类白细胞抗原（Human Leuko巧te Antigen, HLA)是位于人 类第6号染色体短臂上组紧密连锁的基因群，是人体中最具有态性的遗传系统，由四类基 因组成，即I类基因、II类基因和III类基因，可W作为遗传单位或单倍型而遗传给下一代， 属共显性等位基因。IV型分子可能是一些分化抗原，只存在于淋己细胞、某些细胞毒性T细 胞和白细胞中。
[0059] 人类白细胞抗原（HLA)系统是机体免疫系统的重要组成部分，在机体的抗原呈递 和免疫应答中发挥重要作用。HLA基因与人类多疾病的发生、发展和预后密切相关。
[0060] 人类的I类基因位点命名为HLA-A、HLA-B、HLA-C，分布于所有的组织细胞上，为 细胞膜上的移植抗原，是引起移植后排斥反应发生的主要抗原。II类基因则命名为HLA-D， HLA-D又分为HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP等亚区，主要分布于免疫细胞上，它们可W作为免疫 细胞间识别标记而诱发免疫应答和调节免疫细胞间的相互作用，在免疫应答反应中发挥重 要作用。III类基因区位于HLA-IJI类基因区之间，由一些与补体和某些炎症因子编码相关 的基因组成。送些基因在机体的免疫及机体对外界环境的适应性方面均有重要作用。
[0061] 临床实践表明，同种异体移植（除同卵双生子外）的排斥是成功率的最大障碍。 HLA配型直接影响器官移植排斥反应；HLA可作为某些疾病的遗传标志；HLA是人体对疾病 易感的主要免疫遗传学成分。HLA作用主要为祀功能和识别功能。HLA I类抗原分布于所 有有核细胞。送些抗原可被外来物质例如某种病毒或化学物质加W改变，当送些基因产物 被改变之后，便成为自身免疫原，成为免疫排除的祀子。抗原经巨瞻细胞处理后，抗原信息 传递给T辅助细胞，后者再将信息传给B细胞，使B细胞进而分化生成专一抗体。在送个过 程中，T辅助细胞不仅识别致敏巨瞻细胞上的抗原，同时也要识别巨瞻细胞是否与其本身的 HLA II类抗原相一致。
[006? 移植物
[0063] 在本发明中，术语"移植物"、"组织和/或器官"、"待移植物"可互换使用，均指在 体或离体的可用于移植的组织和/或器官。可用于本发明的移植物没有特别限制，只要是 符合目前医疗要求、可W进行移植的任何组织和/或器官，例如肝脏、肾脏、肺、必脏等器官 或其他组织。
[0064] 降低组织和/或器官移植免疫排斥的方法
[0065] 本发明提供了对离体或在体的待移植器官进行处理从而降低其免疫原性并改善 移植过程中的免疫排斥问题。
[0066] 通常，在进行移植供受体配对时，需对两者的主要组织相容性抗原的匹配程度进 行检测，当获得了非匹配的主要组织相容性抗原时，筛选出其中表达量较高的抗原并采用 常规方法针对送些抗原（或其编码序列）设计抑制剂。优选地，可针对送些抗原的编码序 列设计降低供体器官和组织的非匹配的主要组织相容性复合物核酸序列，例如siRNA、反义 核酸等，优选地，所述的SiRNA如SEQ ID NO. :4-5(小鼠），9-10、12-13、和15-16(人）中任 一所示。
[0067] 当获得了针对非匹配主要组织相容性复合物的抗原抑制剂（如SiRNA)后，就可将 其按照常规方法制备成药物组合物，并施用于待移植手术的供体或受体。
[0068] 优选地，本发明方法可W在移植供体维持正常血液循环时进行，例如在维持生命 期间的提供移植物对象（即供体）体内施用（例如注射）所述的药物组合物，从而降低供 体体内非匹配主要组织相容性复合物的表达量，一般施用可在术前1周时维持进行，并当 确定MHC表达量降低到与对照组（如移植供体用药前的MHC基础值）体内MHC的表达量相 比，MHC的表达显著降低后，进行移植手术。此外，为了达到更好的抑制免疫排斥的效果，优 选可对接受移植的对象（即受体）施用同样的药物组合物。本发明的实验证明，在手术前对 移植供体或受体施用（如注射）本发明药物组合物，均可W通过血循环有效地将抑制剂输 送到祀器官，并有效降低非匹配组织相容性抗原的免疫原性；而术后继续施用本发明的药 物组合物，也能够有效地维持送种降低免疫排斥反应的效果，且不产生其他额外的副作用。
[0069] 此外，对离体的移植物也可W通过预处理的方法进行对待移植组织和/或器官免 疫原性的降低，例如，可采用本发明药物组合物对待移植物进行浸泡、冲洗、灌注等