重建的肺表面活性剂的制作方法
【专利说明】重建的肺表面活性剂
[0001] 本发明涉及用于治疗或预防早产儿的呼吸窘迫综合征（RDS)和其他呼吸疾病的 合成肺表面活性剂。
[0002] 特别地，本发明涉及包含天然表面活性剂蛋白SP-C的特定类似物与天然表面活 性剂蛋白SP-B的类似物的组合物以及磷脂混合物的重建表面活性剂。
[0003] 发明背景
[0004] 人的肺部由大量小的气囊组成，这些小的气囊称为肺泡，其中气体在血液和肺部 的气隙之间交换。在健康的个体中，这种交换通过含蛋白的表面活性剂复合物的存在来介 导，所述含蛋白的表面活性剂复合物防止呼气末肺部的塌陷。
[0005] 肺表面活性剂复合物主要由脂质组成并且含有少量各种蛋白质。缺少适当水平的 这种复合物导致肺的功能障碍。这种症状被称为呼吸窘迫综合征（RDS)，并且其通常影响早 产儿。
[0006] 用从动物肺部提取的改性天然表面活性剂制备物有效地治疗了所述症状。
[0007] 商业购得的改性表面活性剂制备物例如是poractant a (Curosurf?)，源自猪肺， calfactant (Infasurf?)，从小牛肺灌洗物提取和beractant (Survanta?)，一种化学修饰 的天然牛肺提取物。
[0008] 这些表面活性剂制备物的主要组分是磷脂，如1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷胆 碱（DPPC)、（PG)以及表面活性剂疏水性蛋白B和C(SP-B和SP-C)。
[0009] 由于来自动物组织的表面活性剂制备物的缺陷，如生产和灭菌方法的复杂性以及 可能的免疫反应的诱导，已经研发了设法模仿改性的天然表面活性剂组成的合成表面活性 剂。
[0010] 然而，根据可获得的文献，没有一篇显示出迄今为止研发的合成表面活性剂与从 动物提取的表面活性剂具有相同的功效。
[0011] 一种可能的解释是迄今为止研发的可用重建表面活性剂没有再现改性的天然表 面活性剂的完整蛋白质谱，因为前者只包含了一种蛋白质（肽）组分。
[0012] 出于这些原因，现有技术中已经提出了包含天然表面活性剂蛋白SP-B和SP-C两 种类似物的重建表面活性剂，例如，在W02008/044109、W02008/011559和W02010/139442 中。
[0013] 尽管如此，关于重建表面活性剂就肺部依从性而言可以获得与从动物提取的表面 活性剂相同的功效仍然持有怀疑态度，特别是就呼吸结束时肺气体体积和肺泡开放等级而 言。
[0014] 在这一方面，本申请人发现，除了蛋白质谱以外，磷脂组合物对于稳定呼气末的肺 泡也是十分重要的。
[0015] 特别地，申请人发现了包含W02008/044109中公开的蛋白B和C的代表性类似物 以及从poractant α提取的磷脂级分（其富含不饱和磷脂）的重建表面活性剂关于潮气 量和肺气体体积获得了与poractant α那些可重叠（overlappable)的结果。
[0016] 因此，对于提供能够帮助提高就肺部顺从性而言的性能的包含磷脂混合物的重组 表面活性剂有很大优势。
[0017] 在W02004/105726中，已经公开了为了降低合成表面活性剂粘度的目的而使用包 含多不饱和磷脂的脂质混合物。
[0018] 现在已经发现了，并且是本发明的目的，天然衍生的富含不饱和磷脂的级分可以 有利地与天然SP-C蛋白的特定类似物以及天然蛋白SP-B的特定类似物组合，以提供就潮 气量和肺气体体积而言具有不低于改性天然表面活性剂（如，poractant α )特性的重建 表面活性剂制备物。
[0019] 发明概述
[0020] 本发明涉及一种重建表面活性剂，其包含脂质载体，以及天然表面活性剂蛋白 SP-C的特定多肽类似物与天然表面活性剂蛋白SP-B的特定多肽类似物的组合。
[0021] 特别地，本发明涉及一种重建表面活性剂，其包含：
[0022] 磷脂混合物；
[0023] 天然表面活性剂蛋白SP-B的多肽类似物；和
[0024] 由通式：IPSSPVHLKRLKLLLLLLLLILLLILGALLQpGpLp(I)表示的天然表面活性剂蛋 白SP-C的多肽类似物，
[0025] 其中：
[0026] Ω是选自M或硫原子上氧化的M、I、L和nL的氨基酸；
[0027] p 是 0 或 1
[0028] 所述磷脂混合物由以下组成：
[0029] i)含量为50%重量的DPPC ;
[0030] ii)含量为10%重量的POPG ;和
[0031] iii)含量为40%重量的不饱和磷脂的天然衍生级分，其基本上由以下组成：
[0032] 30%至 50% P0PC，10%至 20% PLPC，4 至 10% P(:1)0PC，5 至 8% SLPC，5 至 8% D0PC，1 至 3% SAPC，5 至 15% S0PC，1 至 2% PAPC，1 至 3% PDPC，0 至 3. 5% S0PE，0 至 8% SAPE，0 至 4% SLPE，0 至 2. 5% PLPE，0 至 3. 5% POPE ;0 至 2. 0% LAPE，0 至 2. % LLPE，0 至 10% PSM ；
[0033] i)、ii)和iii)的全部含量基于磷脂混合物的总重来计算。
[0034] 本发明还提供了包含单独的所述重建表面活性剂或结合一种或多种药物学上可 接受载体的药物组合物。
[0035] 本发明还提供了所述重建表面活性剂作为药物的用途。
[0036] 在进一步的方面中，本发明提供了所述重建表面活性剂用于预防和/或治疗呼吸 窘迫综合征（RDS)和其他呼吸道疾病的用途。
[0037] 此外，本发明提供了所述重建表面活性剂用于制造用于预防和/或治疗呼吸窘迫 综合征（RDS)和其他呼吸道疾病的药物的用途。
[0038] 本发明还提供了一种用于预防和/或治疗呼吸窘迫综合征（RDS)和其他呼吸道疾 病的方法，所述方法包括将治疗有效量的上述重建表面活性剂给药于需要这样的治疗的病 人。
[0039] 本发明还涉及一种试剂盒，其包含：a)第一单位剂型的粉末形式的本发明的重建 表面活性剂；b)第二单位剂型的药物学上可接受的载体；和c)用于包含所述第一和第二剂 型的容器装置。
[0040] 附图
[0041] 图1显示了作为由2%(?]\^11^(1^11)+2%5?-〇33(1^11)+50%0??〇+10% P0PG+40%肝-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的时间/压力函数的潮气量 (ml/kg)的结果。
[0042] 图 2 显示了由 2 % ox Mini-B (Leu) +2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 肝-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的肺气体体积（ml/kg)的结果。
[0043] 图3显示了作为由2%(?]\^11^(1^11)+2%5?-〇33(1^11)+50%0??〇+10% P0PG+40%未纯化蛋黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的时间/压力函数 的潮气量（ml/kg)的结果。
[0044] 图 4 显示了由 2 % ox Mini-B (Leu) +2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 未纯化蛋黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的肺气体体积（ml/kg)的结 果。
[0045] 图5显示了作为由2%(?]\^11^(1^11)+2%5?-〇33(1^11)+50%0??〇+10% P0PG+40%纯蛋黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的时间/压力函数的潮 气量（ml/kg)的结果。
[0046] 图 6 显示了由 2 % ox Mini-B (Leu) +2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 纯蛋黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的肺气体体积（ml/kg)的结果。
[0047] 图 7 显示了作为由 2 % ox Mini-B27+2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 纯蛋黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的时间/压力函数的潮气量（ml/ kg)的结果。
[0048] 图 8 显示了由 2 % ox Mini-B27+2 % SP-C33 (Leu) +50 % DPPC+10 % P0PG+40 % 纯蛋 黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照的肺气体体积（ml/kg)的结果。
[0049] 图9显示了由2%(?]\^11^(1^11)或（《]\^11^27+2%5?-〇33(1^11)+50% DPPC+10% P0PG+40%纯蛋黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照在恒定潮气 量下进行的实验中的潮气量（ml/kg)的结果。
[0050] 图10显示了由2%〇叉]\^11^(1^11)或（《]\^11^27+2%5?-〇33(1^11)+50% DPPC+10% P0PG+40%纯蛋黄-PC制得的重建表面活性剂vs. Curosurf?和对照在恒定潮气 量下进行的实验中的肺气体体积（ml/kg)的结果。
[0051] 定义
[0052] 在本申请中，术语"重建表面活性剂"意思是已经加入了表面活性剂蛋白的多肽类 似物的脂质载体，通过任何方式来制得，包