括重组技术或合成方法。
[0053] 术语"天然表面活性剂蛋白SP-C的多肽类似物"包括具有与天然蛋白相比其中一 个或多个氨基酸缺失或已经被其他氨基酸替代的氨基酸序列的多肽，只要多肽在与脂质载 体（如例如磷脂混合物）的混合物中显示出肺表面活性剂活性。
[0054] 术语"天然表面活性剂蛋白SP-B的多肽类似物"包括具有与天然蛋白相比其中一 个或多个氨基酸缺失或已经被其他氨基酸替代的氨基酸序列的多肽，只要多肽在与脂质载 体（如例如磷脂混合物）的混合物中显示出肺表面活性剂活性。
[0055] 术语"mini-B"意思是基于天然SP-B蛋白的N-端残基8-25和C-端残基63-78 的34个残基多肽，其结构首先概括地公开于获自California NanoSystems Institute网 站的介绍中。随后在RCSB Protein数据库中公开了其全序列。
[0056] 在Waring AJ等J P印tide Res 2005,66,364-374中，记载了更多关于其结构和 活性的信息。
[0057] 术语"变体"表示具有其中一个或多个氨基酸已经被其他氨基酸替代的氨基酸序 列的mini-B肽的多肽类似物，只要肽在与脂质载体的混合物中保持mini-B的活性。
[0058] 本文中确定的所有氨基酸残基是天然的L-构象并且本文中确定的序列根据标准 的氨基酸残基缩写来记载，如以下表1中所示。
[0059] 氨基酸的表1
[0060] 氨基酸 符号
[0061] 单字母 三字母
[0062] 甘氨酸 G Gly
[0063] L-脯氨酸 P Pr
[0064] L-异亮氨酸 I Ile
[0065] L-亮氨酸 L Leu
[0066] L-酪氨酸 Y Tyr
[0067] L-半胱氨酸 C Cys
[0068] L-色氨酸 W Trp
[0069] L-丙氨酸 A Ala
[0070] L-赖氨酸 K Lys
[0071] L-精氨酸 R Arg
[0072] L-谷氨酰胺 Q Gln
[0073] L-甲硫氨酸 M Met
[0074] L-丝氨酸 S Ser
[0075] L-缬氨酸 V Val
[0076] L-天冬酰胺 N Asn
[0077] L-天冬氨酸 D Asp
[0078] L-谷氨酸 E Glu
[0079] L-组氨酸 H His
[0080] L-苏氨酸 T Thr
[0081] L-苯丙氨酸 F Phe
[0082] L-正-亮氨酸 nL nLeu
[0083] 如文中所用的，术语"磷脂"是指一类由甘油、磷酸基团、作为表征部分的中性或两 性离子部分构成的脂质；这一规则的一个例外是鞘磷脂，其源自鞘氨醇，替代了甘油。甘油 部分或鞘氨醇残基可以用长链脂肪酸（C 14-C22)酯化，所述长链脂肪酸又可以是饱和的（例 如，肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸）、单不饱和的（例如，油酸）或多不饱和的（例如，亚油酸和 花生四烯酸）。
[0084] 本申请中所述的磷脂类别和种类与所用的缩写一起列于以下的表2中。
[0085] 磷脂的表2
[0086]-磷脂：PL ;
[0087] -磷脂酰胆碱：PC;
[0088] -磷脂酰乙醇胺：PE;
[0089] -磷脂酰甘油：PG;
[0090] -磷脂酰肌醇：PI ;
[0091] -磷脂酰丝氨酸：PS;
[0092] -鞘磷脂：SM;
[0093] -1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为二棕榈酰-磷脂酰胆碱：DPPC ;
[0094] -1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为棕榈酰-油酰-磷脂酰胆 碱：POPC ;
[0095] -1-棕榈酰-2-亚油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为棕榈酰-亚油酰-磷脂 酰胆碱：PLPC ;
[0096] -1-棕榈油酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为棕榈油酰-油酰-磷脂 酰胆碱：P(: DOPC ;
[0097] -1-硬脂酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为硬脂酰-油酰-磷脂酰胆 碱：SOPC ;
[0098] -1-硬脂酰-2-亚油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为硬脂酰-亚油酰-磷脂 酰胆碱：SLPC ;
[0099] -1-硬脂酰-2-花生四烯酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为硬脂酰-花生四烯 酰-磷酸胆碱：SAPC ;
[0100] -1-棕榈酰-2-花生四烯酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为棕榈酰-花生四烯 酰-磷酸胆碱：PAPC ;
[0101] -1，2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为二油酰-磷脂酰胆碱：DOPC ;
[0102] -1-棕榈酰-2-二十二碳六烯酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱，通常称为棕榈酰-二十二 碳六烯酰-磷脂酰胆碱：PDPC ;
[0103] -1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为二棕榈酰-磷脂酰乙醇胺： DPPE ；
[0104] -1-棕榈酰-2-亚油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为棕榈酰-亚油酰磷脂 酰乙醇胺：PLPE ;
[0105] -1-硬脂酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为硬脂酰-油酰磷脂酰乙 醇胺：SOPE ;
[0106] -1-硬脂酰-2-亚油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为硬脂酰-亚油酰磷脂 酰乙醇胺：SLPE ;
[0107] -1-硬脂酰-2-花生四烯酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为硬脂酰-花生四 烯酰-磷脂酰乙醇胺：SAPE;
[0108] -1-亚油酰-2-花生四烯酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为亚油酰-花生四 烯酰-磷脂酰乙醇胺：LAPE;
[0109] -1，2-二亚油酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为二亚油酰-磷脂酰乙醇胺： DLPE ；
[0110] -1，2-二油酰-Sn-甘油-3-磷酸乙醇胺，通常称为二油酰-磷脂酰乙醇胺：D0PE ;
[0111] -1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，通常称为棕榈酰-油酰-磷脂酰甘 油：POPG ;
[0112] -1，2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，通常称为二油酰-磷脂酰甘油：DOPG ;
[0113] -1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸-L-丝氨酸，通常称为二棕榈酰-磷脂酰丝氨 酸：DPPS ;
[0114] -1，2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酸甘油，通常称为二棕榈酰-磷脂酰甘油：DPPG ;
[0115] -N-棕榈酰-D-鞘氨醇磷脂酰胆碱：PSM
[0116] 表述"基本上由……组成"表示不饱和磷脂的天然衍生级分可以包含更多的组分， 各自都是非常低的含量（低于〇. 1% w/w)并且基本上没有影响所述级分的活性和特性。
[0117] 表面活性剂制备物的"表面活性剂活性"定义为降低表面张力的能力。
[0118] 通常使用合适的装置，如 Wilhelmy Balance and Captive Bubble Surfactometer，通过测量降低表面张力的能力，来测试外源性表面活性剂制备物的体外功 效。
[0119] 通常通过测量以下参数来测试外源性表面活性剂制备物的体内功效：
[0120] i)潮气量，这是肺顺应性的指数；
[0121] ii)肺气体体积，其是呼气末肺泡空气膨胀或开放的指数，并且因此是呼气末在肺 泡中形成稳定磷脂膜能力的指数；
[0122] iii)肺泡体积密度是肺中肺泡总体积的百分比。根据Berggren P等Respiration Physiology，1999,115,45-33的2. 2. 2段公开的方法，通过将肺泡总体积除以总肺体积（肺 泡+组织，排除例如细支气管、血管）来计算百分比。数值与肺气体体积相似，肺气体体积 是针对整个肺测量的，而肺泡体积密度是从组织切片测量的。
[0123] 如本文中使用的"治疗有效量"是指能够预防、避免、减轻或消除与内源性表面活 性剂不足或功能障碍相关的呼吸道疾病或失调的重建表面活性剂含量。
[0124] 涉及例如细胞或核酸、蛋白质或载体一起使用时，"重组"表示通过引入异源核酸 或蛋白质或改变天然核酸或蛋白质而得到修饰的细胞、核酸、蛋白质或载体。
[0125] 如本文中使用的，应用于点值的术语"约"，表示±5%的可变性。
[0126] 发明详述
[0127] 本发明涉及一种重建表面活性剂，其包含通式（I)的天然表面活性剂蛋白SP-C的 多肽类似物，通式（II)或（III)的天然表面活性剂蛋白SP-B的多肽类似物和包含富含不 饱和磷脂的天然衍生级分的磷脂混合物。
[0128] 实际上已经发现了所述重建表面活性剂制备物就潮气量和肺气体体积而言具有 不次于改性天然表面活性剂（如，poractant α)那些的特性。
[0129] 特别地，发现了除了蛋白质组分以外，在没有呼气末正压（PEEP)通气的动物中， 在呼气末，磷脂组合物对于稳定肺泡也是非常重要的。
[0130] 此外，发现了，使用所述磷脂混合物，可以提供具有低粘度的组合物，即使使用了 通式（m)的SP-B类似物，其短于通式（II)的类似物，但它们与DPPC和POPG的单一磷脂 混合物混合时产生了粘性制备物。
[0131] 有利地，SP-C 蛋白的多肽类似物由通式（I)IPSSPVHL